BCA Instrucciones del kit para la determinación del contenido de proteínas del método

Método de trazabilidad 100T/96S

Asegúrese de tomar antes de la determinación formal. 2 - 3 Cada muestra con grandes diferencias en las expectativas hace predicciones.Importancia de la determinación:

El contenido de proteínas solubles de la muestra se utiliza a menudo para calcular la actividad enzimática. Además, el contenido de proteínas solubles también se utiliza en análisis de calidad como los alimentos.

Principio de determinación:

En condiciones alcalinas, la cisteína, la cisteína, el ácido cianico, el ácido hialurónico y los enlaces péptidos en las proteínas pueden Cu^{2 +}Reducir aCu^{- sí.}V;2 MoléculasdeBCAyCu^{- sí.}Combinado para generar complejos morados, en 540-595nmHay picos de absorción,562nmEl Pico de absorción local Zui es Fuerte.

El kit de determinación del contenido de proteínas del método BCA está disponible en Stock.

Composición:

Preparación del líquido de trabajo:Antes del uso temporal, según el volumen de líquido de trabajo propuesto (número de muestras)×0,2 ml), reactivosA yB según 50:1 Mezcla proporcional, tapaMezclar bien después de apretarlo.

Los parámetros del producto específico se basan en los parámetros recibidos de las instrucciones del producto.

Instrumentos y suministros propios:

Centrifugadora de mesa, olla de baño de agua a temperatura constante, espectrómetro visible/.Medidor de estándar enzimático, placa de Petri de cuarzo traza/ 96 Placa de agujero, pipeta y agua destilada.

Extracción de proteínas solubles de la muestra:

1, muestras líquidas:Las muestras de líquido aclarado se pueden determinar directamente.

2, muestras de tejido: de acuerdo con la calidad de la organización..g): volumen del extracto(ml)Para 1:5 a 10 Proporción deSe recomienda hacer una cita. 0.1g Organización, adhesión 1 mlExtracto (propio, seleccione el tampón de extracción enzimática o el agua destilada o la solución salina normal según sea necesario)Homogeneizado de baño de hielo,10000 rpm,4℃Centrifugadora 10 minutosSe extrae el líquido superior, es decir, el líquido a medir.

3 , bacterias, células: por número de células..104 (individual): volumen del extractoml(...)Para 500 a 1000:1 Proporción desugerencia 500 Diez mil célulasunirse 1 ml Extracto(...), baño de hielo ultrasonido rompe células（potencia 300w, ultrasonido 3 Segundos, intervalos 7 Segundos, tiempo total 3min(...); luego 10000 rpm, 4℃, centrífuga 10 minutosTomar el líquido superior y colocarlo sobre hielo para su prueba.

Operación de determinación:

1. Fotómetro visible/.Precalentamiento del medidor de estándar enzimático 30 minutosAjustar la longitud de onda a 562 nm, el agua destilada se ajusta a cero.

2. El líquido de trabajo se coloca en 60Precalentamiento de baño de agua en grados Celsius30 mínimo.

Precauciones:Los tubos en blanco y los tubos estándar solo deben hacerse una vez.

Fórmula de cálculo:

CPR ()mg por ml))C Productos estándar×()A Tubo de determinación -A Tubo en blanco)△()A Tubo estándar -A Tubo en blanco(...)

= 0,5 ×()A Tubo de determinación -A Tubo en blanco)△()A Tubo estándar -A Tubo en blanco(...)

CPR ()mg/g Peso fresco))C Productos estándar×()A Tubo de determinación -A Tubo en blanco)△()A Tubo estándar -A Tubo en blanco)△W

= 0,5 ×()A Tubo de determinación -A Tubo en blanco)△()A Tubo estándar -A Tubo en blanco)△W W: Calidad de la muestra,g

Precauciones:

BCA Kit de determinación del contenido de proteínas, adecuado para determinar la concentración de proteínas en 20-5000μg/ml Muestras. Antes de la determinación 1 - 2 Una muestra para hacer un experimento previo, siA Tubo de determinación -A Tubo en blanco >.1.5Es necesario diluir la muestra con un extracto antes de determinarla para garantizar la precisión de la determinación.

El kit de determinación del contenido de proteínas del método BCA está disponible en Stock.