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Fibroblasto de ratón

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Descripción general

Anwei Biology estableció el NCTC clone 929 (tejido conjuntivo de ratón), la clonación de la línea celular l, en marzo de 1948. La línea celular L fue una de las primeras líneas celulares de cultivo continuo establecidas, mientras que el clone 929 fue la primera línea clonal. Se estableció la línea celular parental l a partir de la entrada de tejido conjuntivo suelto subcutáneo normal en el tejido adiposo de un ratón macho c3h / AN de 100 días. la línea celular L de la generación 95 estableció el clone929 utilizando el método capilar para aislar células individuales. La prueba encontró que el virus de la viruela de ratas era negativo.

Detalles del producto

Fibroblasto de ratón l929Identificación de especies y géneros como organismos

También conocido como NCTC clone 929, es una línea celular aislada de la areola subcutánea normal y el tejido adiposo de ratones c3h / An. Esta línea celular fue establecida en marzo de 1948 y fue una de las primeras líneas celulares de cultivo continuo. Las células l929 tienen la forma de un fibroblasto, crecen adheridas a la pared y son sensibles a una variedad de virus, como el virus de la estomatología ampollas de glasgow, el virus de la estomatología ampollas de orsay, el virus de la miocarditis cerebral, etc. Además, son tumoral en ratones inmunodeprimidos y pueden ser utilizados como células huésped para experimentos de transfección.

Las células l929 tienen una amplia gama de aplicaciones en biología celular e investigación biomédica, incluyendo ensayos de toxicidad, investigación virológica, detección de medicamentos, determinación inmunológica e ingeniería de tejidos. Sus características de crecimiento los convierten en modelos importantes para el estudio de la proliferación celular, la citotoxicidad, la adhesión celular y la Unión intercellular. En condiciones de cultivo, las células l929 suelen crecer en un medio de cultivo alto en azúcar dmem que contiene un 10% de suero bovino fetal y se cultivan a 37 grados centígrados, 95% de aire y 5% de dióxido de carbono en fase gaseosa.

En el cultivo celular, la proporción de paso de las células l929 suele ser de 1: 2 a 1: 8, el ciclo de paso es de aproximadamente 2 - 3 días, y la fórmula del liofilizado es el medio de cultivo 92% y Dmso 8%. Estas células son muy utilizadas en la investigación científica, pero hay que tener en cuenta que todas las células tumorales y transmitidas por virus se consideran potencialmente bionocivas, por lo que deben realizarse en una plataforma de bioseguridad secundaria al operar y con las medidas de protección adecuadas.

Fibroblasto de ratón l929

El clon NCTC 929[L929]

Identificación de células l

Se ha aprobado la identificación de especies y géneros

L fuente celular

Banco Nacional de recursos

L Fondo celular

En marzo de 1948 se estableció el NCTC clone 929 (tejido conjuntivo de ratón), un clon de la línea celular L. La línea celular L fue una de las primeras líneas celulares de cultivo continuo establecidas, mientras que el clone 929 fue la primera línea clonal. Se estableció la línea celular parental l a partir de la entrada de tejido conjuntivo suelto subcutáneo normal en el tejido adiposo de un ratón macho c3h / AN de 100 días. la línea celular L de la generación 95 estableció el clone929 utilizando el método capilar para aislar células individuales. La prueba encontró que el virus de la viruela de ratas era negativo.

L características celulares

1) fuente: tejido: tejido conjuntivo subcutáneo; Tejido conjuntivo suelto y línea de grasa: c3h / an;

2) morfología: fibroblasto, crecimiento pegado a la pared;

3) contenido: > número de células 1x106;

4) especificaciones: embalaje de t25 botellas o 1 ml de tubo de almacenamiento congelado;

5) uso: solo para investigación científica.

L condiciones de cultivo

1) preparar el medio de cultivo MEM (recomendado awcell - 0012); Suero de caballo (recomendado: awcell - 002b) 10%; Doble resistencia, 1%. La célula no se puede cultivar con suero bovino fetal.

2) condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 grados centígrados, humedad de la incubadora del 70% al 80%.

L precauciones

Para la transmisión de células adherentes, se pueden consultar los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 0,25% (w / v) Tripsina - 0,53 mm EDTA al frasco de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), digerir en una incubadora a 37 ° C durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si una gran parte de La célula se redondea y se cae, recuperarla rápidamente a la Mesa de operaciones y añadir 3 - 4 ml de medio de cultivo con 10 ° s después de golpear ligeramente el frasco de cultivo para terminar la digestión.

3. mezclar suavemente y aspirar, centrifugar durante 3 - 5 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. Dividir la suspensión celular en un nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir un nuevo medio de cultivo * configurado de 6 - 8 ml de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se realiza en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real.

3) Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior.

L forma de transporte

Baja temperatura: (1) embalaje de almacenamiento congelado de 1 ML para el transporte de hielo seco, después de la recepción, el refrigerador de - 80 grados se conserva durante la noche y se transfiere al nitrógeno líquido o se recupera directamente para encontrar que el hielo seco se ha volatilizado limpio, la tapa de la botella del almacenamiento congelado se ha caído, se ha roto y las células están contaminadas, por favor póngase en contacto con nosotros de inmediato.

Temperatura ambiente: (2) las células sobrevivientes de la recuperación de t25 se envían a temperatura ambiente y se operan de acuerdo con el método de tratamiento después de la recepción celular después de la recepción.

L bioseguridad

1. todas las células animales se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en la Plataforma de bioseguridad secundaria. preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados antes de que puedan ser desechados.

2. se recomienda usar siempre guantes protectores, ropa y máscaras protectoras al reanimar las células congeladas. Nota: el congelador Se filtrará cuando se sumerja en nitrógeno líquido y se llenará lentamente de nitrógeno líquido. Al descongelarse, la conversión del nitrógeno líquido en fase gaseosa puede provocar la explosión del recipiente o soplar su tapa con fuerzas peligrosas, produciendo así escombros voladores que causan daños humanos.