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¿¿ qué?Shanghai anwei Biotechnology co., Ltd.
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Osteoblasto embrionario de ratón mc3t3 - E1Identificación de especies y géneros
Mc3t3 - E1 es un precursor de osteoblastos embrionarios de ratón derivado del cráneo embrionario de ratón de la línea c57bl / 6. Esta célula tiene la capacidad de diferenciarse en osteoblastos y osteocitos, y puede formar tejido óseo calcificado in vitro. La línea celular mc3t3 - E1 tiene múltiples subclones y es un material ideal para estudiar la diferenciación de osteoblastos, la biología de los osteocitos, el metabolismo óseo y enfermedades como el osteosarcoma, especialmente adecuado para estudiar el papel de las vías de señalización de la matriz extracelular (ecm). La morfología celular es como un fibroblasto, creciendo pegado a la pared, las condiciones de cultivo son del 5% CO2 y 37 ° c, y la fórmula común del medio de cultivo es el medio de cultivo memalfa que contiene Nucleósidos y aditivos glutamax, añadiendo el 10% de suero bovino fetal fbs. El ciclo de transmisión es de unos 3 - 4 días, la proporción de transmisión es generalmente de 1: 3, y la frecuencia de cambio de líquido es cada 2 - 3 días. Las células mc3t3 - E1 son ampliamente utilizadas en la investigación científica y se utilizan en la investigación de osteoporosis, osteosarcoma, desarrollo dental e ingeniería de tejidos óseos. Los resultados de las pruebas celulares mostraron que mc3t3 - E1 no contenía contaminación por VIH - 1, hepatitis b, hepatitis c, micoplasma, bacterias, levadura y hongos.
| Osteoblasto embrionario de ratón mc3t3 - E1 | |
| Identificación de células l | Se ha aprobado la identificación de especies y géneros |
| L fuente celular | Banco Nacional de recursos |
| L Fondo celular | Se estableció a partir del cráneo del ratón c57bl / 6 embrionario / fetal; La diferenciación descrita en la literatura en osteoblastos y la producción de colágeno. La célula tiene múltiples subclones y puede servir como un buen modelo para estudiar la diferenciación de osteoblastos in vitro. |
| L condiciones de cultivo: | 1) preparar el medio de cultivo MEM alfa (recomendado awcell - 0003); Suero bovino fetal de alta calidad, 10%; Doble resistencia, 1%. 2) condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 ° c, humedad de la incubadora del 70% al 80%. |
| L precauciones:
| Para la transmisión de células adherentes, se pueden consultar los siguientes métodos: 1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio. 2. añadir 0,25% (w / v) Tripsina - 0,53 mm EDTA al frasco de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), digerir en una incubadora a 37 ° C durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si una gran parte de La célula se redondea y se cae, recuperarla rápidamente a la Mesa de operaciones y añadir 3 - 4 ml de medio de cultivo con 10 ° s después de golpear ligeramente el frasco de cultivo para terminar la digestión. 3. mezclar suavemente y aspirar, centrifugar durante 3 - 5 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. Dividir la suspensión celular en un nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir un nuevo medio de cultivo * configurado de 6 - 8 ml de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se realiza en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real. 3) Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior. |
| L forma de transporte: | Baja temperatura: (1) transporte de hielo seco empaquetado en congelador de 1 ml, después de recibir, el refrigerador de - 80 grados se conserva durante la noche y se transfiere al nitrógeno líquido o se recupera directamente. si se encuentra que el hielo seco se ha volatilizado, la tapa del congelador se ha caído, la tapa del congelador está rota y las células están contaminadas, Póngase en contacto con nosotros de inmediato. Las células sobrevivientes de la recuperación de t25 botellas a temperatura ambiente (2) se envían a temperatura ambiente y se operan de acuerdo con el método de tratamiento después de la recepción celular después de la recepción. |
| L bioseguridad | 1. todas las células animales se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en la Plataforma de bioseguridad secundaria. preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados antes de que puedan ser desechados. 2. se recomienda usar siempre guantes protectores, ropa y máscaras protectoras al reanimar las células congeladas. Nota: el congelador Se filtrará cuando se sumerja en nitrógeno líquido y se llenará lentamente de nitrógeno líquido. Al descongelarse, la conversión del nitrógeno líquido en fase gaseosa puede provocar la explosión del recipiente o soplar su tapa con fuerzas peligrosas, produciendo así escombros voladores que causan daños humanos. |