Células madre de pulpa humana

La compañía tiene células madre de pulpa dental humana otros productos: receptor de quimioquina CC humana 5 (ccr5) kit de prueba Elisa prueba gratuita para el receptor de quimioquina CC humana 2 (ccr2) kit de prueba ELISA para el receptor de quimioquina CC humana 1 (ccr1) kit de prueba Elisa

Fuente del tejido: tejido pulpa dental

Especificaciones del producto: botella de cultivo celular 5 × 105cells / t25

Perfil de la célula:

　　Células madre de pulpa humanaSeparar el tejido sinovial; El tejido pulpa se encuentra en la cavidad pulpa del Interior del diente. La forma de la cavidad pulpa es aproximadamente similar a la forma del cuerpo dental, la cavidad pulpa de la corona dental es más grande, se llama Cámara pulpa, la cavidad pulpa de la raíz dental es más pequeña, se llama Canal radicular, y hay pequeños agujeros en la punta de la raíz, se llama agujero apical. El tejido pulpa contiene principalmente nervios, vasos sanguíneos, ganglios linfáticos y tejido conjuntivo, así como células odontogénicas dispuestas en la periferia de la pulpa dental, que actúan como odontogénesis. La pulpa dental presenta diferentes cambios patológicos debido a los diferentes efectos de los estimulantes patógenos y las diferencias en la resistencia del cuerpo, que se manifiestan clínicamente como una serie de síntomas y signos diferentes. Después de una larga duración de la congestión de la pulpa dental, se convirtió en inflamación aguda de la pulpa dental. Las células madre mesenquimales (mscs) provienen del tejido mesenquimal en el período embrionario, tienen un fuerte potencial de autorreplicación y diferenciación multidireccional, tienen la capacidad de diferenciarse direccionalmente en una variedad de células finales, como células grasas, osteoblastos, condrocitos y miocitos, y el uso de mscs para reparar el daño cartilaginoso tiene buenas perspectivas de aplicación, y ahora pueden aislar y preparar células madre mesenquimales de médula ósea, grasa, sinovial, huesos, músculos y otros tejidos, así como de líquido amniótico, cordón umbilical y sangre de cordón umbilical.

Introducción al método:

El Laboratorio de la compañía fue aislado por digestión de colagenasa y clonación de dilución de baja densidad, con un total de células de aproximadamente 5 × 10. Cells / botella.

Pruebas de calidad:

El Laboratorio de la compañía fue aislado por inmunofluorescencia cd90, con una pureza de más del 90%, y no contiene VIH - 1, hepatitis b, hepatitis c, micoplasma, bacterias, levadura y hongos.

Información de formación:

Medios de cultivo: contiene fbs, aditivos para el crecimiento, pencilina, streptomicina, etc.

Frecuencia de cambio de líquido: cambio de líquido cada 2 - 3 días

Características de crecimiento: pegado a la pared

Morfología celular: tipo de Fibroblasto

Características de la transmisión: se puede transmitir alrededor de 3 - 5 generaciones

Líquido digestivo: 0,25%

Condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire, 95%; CO2，5%

¿¿ el método de Criopreservación de las células?

Método de congelación y conservación 1: el tubo de congelación se coloca a 4 ° C durante 30 a 60 minutos → (- 20 ° C durante 30 minutos *) → - 80 ° C durante 16 a 18 horas (o durante la noche) → almacenamiento a largo plazo de vaporphase en tanque de nitrógeno líquido.

Método de congelación y conservación 2: el tubo de congelación se coloca en una máquina de enfriamiento programable con un programa establecido para bajar de 1 - 3 ° C a menos de - 80 ° C por minuto, y luego se coloca en un tanque de nitrógeno líquido vaper fase para su almacenamiento a largo plazo. No más de una hora a - 20 ° C para evitar que los cristales de hielo sean demasiado grandes y causen una gran cantidad de muertes celulares, también se puede saltar este paso y ponerlo directamente en el refrigerador a - 80 ° c, pero la tasa de supervivencia se reduce ligeramente.

Operación de cultivo:

1) células de reanimación: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, añadir 4 ml de medio de cultivo y mezclar uniformemente. Centrifugar durante 4 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, se añaden todas las suspensiones celulares al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a una placa de Petri de 10 cm, se añaden unos 8 ml del medio de cultivo y se cultiva durante la noche). Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2) transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de transmisión.

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) en el frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de las células se redondean y se caen, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y añadir una pequeña cantidad de medio de cultivo para terminar la digestión.

3. presione 6 - 8 ml / botella para complementar el medio de cultivo, revuelva suavemente y exprima, centrifuga durante 4 minutos en condiciones de 1000rpm, abandone el sobrenadante, agregue 1 - 2ml de medio de cultivo y sople bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2.

3) Criopreservación celular: cuando la célula está en buen estado de crecimiento, se puede congelar la célula. Las siguientes botellas t25 son de la categoría;

1. al congelar la célula, después de descartar el medio de cultivo, se añade 1 ML después de limpiar el pbs, y después de que la célula se redondea y se cae, se añade 1 ml del medio de cultivo que contiene suero para terminar la digestión, que se puede contar con una placa de recuento de sangre.

2. eliminar el sobrenadante por centrifugación de 1000rpm en 4min. Añadir 1 ml de células de suspensión de suero, añadir suero y Dmso de acuerdo con el número de células, mezclar suavemente, la concentración final de Dmso es del 10%, la densidad celular no es inferior a 1x106 / ml, congelar 1 ml de suspensión celular en cada liofilizador, prestar atención al liofilizado para hacer un buen trabajo de identificación.

3. coloque el criodepósito en la Caja de enfriamiento del programa, Póngalo en el refrigerador de - 80 grados y pase al almacenamiento de nitrógeno líquido después de 2 horas. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez.

Informe experimental:

Los productos solo se utilizan para la investigación científica:

I. aislamiento y cultivo:

1. en condiciones estériles, se extrae el tejido auricular de las ratas de SD de 1 - 3 días de edad, y luego se limpia este bloque de tejido dos veces con pbs, que luego se convertirá en aproximadamente 1 mm3;

2. añadir 4 ml de líquido digestivo enzimático (0,1% y 0,1% de colagenasa tipo i) al bloque de tejido, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, luego soplar con un gotero para hacer una suspensión unicelular, precipitar naturalmente y recoger el suero superior, y terminar la digestión con un medio de cultivo que contiene 10 ° s y colocarlo a 4 ° c;

3. añadir 3 a 4 ml de líquido digestivo enzimático al tejido restante, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, recoger el suero superior de acuerdo con el método anterior y terminar la digestión y colocarlo a 4 ° c. repetir este paso 2 - 3 veces hasta que el tejido sea digerido;

4. filtrar el líquido digestivo celular con un tamiz de acero inoxidable de 200 mallas, centrifugar 1200r / MIN durante 10 minutos, descartar el sobrenadante, precipitar las células con suspensión de medio de cultivo que contiene 10 / S dmem / f12, vacunarlas en un frasco de cultivo de 25 cm 2, colocarlas a 37 ° C y cultivarlas en una incubadora de CO2 Al 5%;

5. después de pegar la pared a una velocidad diferencial durante 1 hora, se succiona el medio de cultivo y se inocula en una placa de 6 agujeros para continuar el cultivo de acuerdo con las necesidades del experimento.

2. identificación por inmunofluorescencia:

1. cuando los miocitos auriculares crezcan hasta el 80% de fusión, abandone el medio de cultivo, lave las células 2 veces con PBS cultivados a temperatura ambiente, 10 minutos cada vez, y luego fije las células a temperatura ambiente durante 15 minutos con poliformaldehído al 4%;

2. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego penetra la película con un 0,1% de Tritón X - 100 a 4 ° C durante 15 minutos;

3. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego cierra las células con un 4% de BSA durante 30 minutos a temperatura ambiente;

4. diluir alfa - Acción un anticuerpo en una proporción de 1: 100, y luego colocarlo en un refrigerador a 4 ° C para incubar células durante la noche;

5. el PBS enjuaga las células tres veces, 10 minutos cada vez, diluye la resistencia secundaria a la alfa - Acción en una proporción de 1: 150 y las coloca durante 1 hora a 37 ° c;

6. enjuagar con PBS tres veces, 10 minutos cada vez, y luego observar la imagen bajo un microscopio fluorescente invertido y tomar fotos.

Anticuerpos contra la ang II

Anticuerpos contra el receptor 1 de la angiotensina II

Anticuerpos contra la angiogénesis - 1

Anticuerpos contra la proteína 2 similar a la angiogénesis

Receptor de quimioquina CC humana 5 (ccr5) kit de prueba Elisa prueba gratuita

Kit de detección Elisa del receptor 2 de la quimioquina CC humana (ccr2)

Kit de detección Elisa del receptor humano de quimioquina CC 1 (ccr1)

Kit de prueba Elisa de la quimioquina CC humana 7 (ccl7 / mcp3 / scya6 / scya7)

Kit de prueba Elisa de quimiotaxia CC humana 5 (ccl5 / d17s136e / scya5) prueba gratuita

Kit de prueba Elisa de ratón IL - 17a (il - 17a)

Kit de prueba Elisa de ratón il 17B (il17b)

Kit de prueba Elisa de ratón il 17c (il17c)

Kit de prueba Elisa de ratón il 17f (il17f)