Kit de detección de proliferación celular mts

Kit de detección de proliferación celular mts(mts Cell proliferación Assey kit) es un kit común de detección de proliferación celular y toxicidad. El mts es un nuevo tipo de sal de tetrazol que puede ser reducida por la Succinato deshidrogenasa en las mitocondrias de las células vivas a un producto soluble en agua, formazan. El Naan tiene una absorción específica a 490 nm, por lo que puede reflejar la proliferación celular determinando la absorción a 490 nm. Cuanto más rápida sea la proliferación celular, mayor será el valor de absorción.
En comparación con los kits MTT comunes, este Kit no necesita eliminar el medio de cultivo original ni usar otro disolvente para disolver el naan, lo que es más conveniente de usar y, al mismo tiempo, puede evitar errores experimentales causados por quitar parte del Naan al eliminar el medio de cultivo. Este Kit es muy flexible de usar y se puede seguir incubando después de la prueba para obtener mejores resultados de color. Además, este Kit también tiene las ventajas de un amplio rango lineal, alta sensibilidad y uso seguro.
Componentes del producto:

Operación experimental:
1. preparación del líquido de trabajo mts:
Mezclar mts Solution y PMS Solution en una proporción de 20: 1 es el líquido de trabajo mts. Si el líquido de trabajo mts preparado necesita ser almacenado, debe conservarse a - 20 ℃ para evitar la luz. en este momento, se recomienda empacarlo adecuadamente para evitar la congelación y descongelación repetidas.
Nota: tanto mts Solution como PMS Solution son fáciles de descomponer al ver la luz, por lo que es necesario evitar la luz durante la preparación y el uso (se puede envolver en papel de aluminio). Si se necesita un uso frecuente, se quiere conservar este Kit a 4 ° c, en este momento se debe preparar el líquido de trabajo mts antes de cada prueba. El líquido de trabajo mts preparado sin usar debe conservarse a - 20 ° C para evitar la luz.
2. cultivo celular:
Las células se inoculan en contenedores adecuados, como las placas de foramen. Para 96 placas de agujero, se recomienda agregar un medio de cultivo de 100 ul por agujero, mientras que se recomienda vacunar 5 - 100 × 10 por agujero.3Células individuales. Las células del grupo experimental se pueden tratar con medicamentos de interés de acuerdo con el diseño experimental durante un período de tiempo, cuando es necesario establecer un grupo en blanco adicional (solo medio de cultivo) y un grupo de control (incluyendo medio de cultivo, células y disolventes farmacéuticos).
Nota: el número específico de células vacunadas por agujero se puede ajustar de acuerdo con el tipo específico de célula.
3. incubación de mts:
Añadir 20 ul de líquido de trabajo mts por agujero y luego incubarlo en una incubadora celular durante 1 - 4 horas.
Nota: el tiempo de incubación de MTS se puede ajustar de acuerdo con el experimento específico.
4. pruebas:
La absorción (a) se determina a 490 nm con un medidor estándar enzimático. Si no hay un filtro de 490 nm, se puede optar por usar un filtro de 450 - 540 nm.
5. análisis de datos:
La fórmula para calcular la supervivencia celular es la siguiente:
Tasa de supervivencia celular (%) = ((a)Grupo experimental-AGrupo en blanco) / (AGrupo de control-AGrupo en blanco)] x 100

1. cuando las células se cultivan durante mucho tiempo, los agujeros marginales de la placa de 96 agujeros son propensos a la evaporación de líquidos. Se recomienda abandonar un círculo alrededor de la placa de 96 agujeros y agregar agua estéril, medio de cultivo o pbs; Al mismo tiempo, se puede colocar una placa de 96 agujeros en una incubadora cerca de la fuente de agua.
2. mts Solution y PMS solutin se solidificarán a baja temperatura. antes de usarlo, vuelva a calentarse a temperatura ambiente o tome un baño de agua a 37 ° c con antelación durante unos 10 minutos hasta que Wan se derrita por completo.
3. mts Solution y PMS Solution son sensibles a la luz y el color de la solución puede cambiar ligeramente si se conserva a 4 ° c, lo que puede aumentar la absorción de fondo, pero no afectará el resultado experimental final.
4. si no se puede detectar a tiempo, se puede agregar un 10% de SDS de 25ul por agujero después de la incubación en el paso 3 para detener la reacción. Se puede colocar la placa de agujero tratada con SDS
Conservar a la luz en la incubadora durante no más de 18 horas.
5. para su seguridad y salud, Use ropa experimental y guantes desechables.

Almacene el kit a -20 ° C lejos de la luz y la humedad, estable durante 1 año. Para uso frecuente, el kit se puede almacenar a 4°C lejos de la luz y la humedad, estable durante 6 semanas.