Kit de prueba de diaminoxidasa

Kit de prueba de diaminoxidasaMétodo de trazabilidad

Nota: antes de la determinación formal, se seleccionan 2 - 3 muestras con grandes diferencias esperadas para la determinación predictiva.

Número de artículo:BC1285

Especificaciones:100T/48S

Contenido del producto:

Extracto: líquido100ml × 1Botellas,4℃保存。

Reactivo 1: líquido0,25 ml × 1Ramas,4℃保存。

Reactivo 2: líquido2ml × 1Tubo,4℃保存。

Reactivo 3: líquido1 ml x 1Tubo,4℃保存。

Descripción del producto:

DAO(EC1.4.3.6)Está ampliamente presente en animales (mucosa intestinal, pulmones, hígado, riñones, etc.), plantas y microorganismos. La oxidación catalítica de las Poliaminas en acetales, cuya actividad está estrechamente relacionada con la síntesis de ácidos nucleicos y proteínas, puede reflejar la integridad y el grado de daño de la barrera mecánica intestinal.

DAOCatalizar la deamina para producir acetales y *, añadir un exceso de superóxidasa de rábano picante externamente, catalizar la oxidación de vecinos

La diamina produce la diamina vecino oxidada, que se encuentra en460 nmHay picos de absorción característicos en el lugar, y se calcula determinando la tasa de aumento de la absorción de esta longitud de onda.DAOActividad.

Suministros e instrumentos experimentales propios:

Básculas, centrifugadoras criogénicas, espectrómetros visibles/.Medidor de estándar enzimático, placa de Petri de cuarzo traza/ 96Placa de agujero, agua destilada.

Pasos de operación:

I. extracción de enzimas gruesas:

1. Organización: según la calidad de la organización..g): volumen del extracto(ml)Para1:5 a 10Proporción (se recomienda llamar cita)0.1gOrganización, adhesión1 mlExtracto) para homogeneizar el baño de hielo y luego10000g，4℃ centrífuga20 minutos, limpiar y poner hielo para medir.

2. Bacterias, hongos: por número de células..10⁴: volumen del extractoml) para500 a 1000:1Proporción (recomendado)500Diez mil células se unen1 mlExtracto), ultrasonido de baño de hielo para romper células (potencia)300w, ultrasonido3Segundos, intervalos7Segundos, tiempo total3 minutos); luego10000g，4℃, centrífuga10 minutosTomar el líquido superior y colocarlo sobre hielo para su prueba.

3. Suero y otros líquidos: determinación directa.

2. tabla de Operaciones de determinación:

1, fotómetro/.Precalentamiento del medidor de estándar enzimático30 minutos, ajustar la longitud de onda460 nm, el agua destilada se ajusta a cero.

2, tabla de Operaciones

3. fórmula de cálculo de la actividad enzimática:

a.La fórmula de cálculo para la determinación con una placa de Petri de cuarzo traza es la siguiente:

（1(calculado por la concentración de proteínas de la muestra:

Definición de la actividad enzimática: enpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto de proteína tisular por miligramo en condiciones Celsius1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria es una unidad de actividad enzimática..U).

DAOActividad..nmol/min/mg prot(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra× Cpr(...)÷T= 18×A 460 ÷Cpr

（2(calculado por la masa de la muestra:

Definición de la actividad enzimática: enpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto por gramo de tejido en condiciones de ℃.1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..Nmol / min / g(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra÷VTotal de muestras× W(...)÷T= 18×A 460 ÷W

（3) por número de células:

Definición de la actividad enzimática: EnpH 7.2, la temperatura es37En condiciones celsius, cada10⁴Producción catalítica de células individuales por minuto1 nmol de H²O²La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..nmol / min / 10⁴celda(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra÷VTotal de muestras×Número de células)÷T= 18×A₄₆₀△Número de células

(4)Calculado en volumen líquido

Definición de la actividad enzimática: EnpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto por mililitro de suero en condiciones Celsius1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..Nmol / min / ml(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total÷VMuestra÷T= 18×A₄₆₀

ε: coeficiente de extinción en milimoles de o - anisidina oxidada:7,5 L/mmol/cmV;d: diámetro de la luz de la placa de petri,1 cmV;VAnti - total: anti - TotalDebe ser el volumen total,0,2 mlV;VMuestra: volumen de la muestra en la reacción,0,05 mlV;VTotal de la muestra: añadir el volumen del extracto,1 mlV;CPR:

Concentración de proteínas de la muestra,mg/mlV;W: calidad de la muestra,gV;T: tiempo de reacción,30 minutos

b.usar 96 La fórmula de cálculo para la determinación de la placa de agujero es la siguiente:

（1(calculado por la concentración de proteínas de la muestra:

Definición de la actividad enzimática: enpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto de proteína tisular por miligramo en condiciones Celsius1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria es una unidad de actividad enzimática..U).

DAOActividad..nmol/min/mg prot(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra× Cpr(...)÷T= 36×A 460 ÷Cpr

（2(calculado por la masa de la muestra:

Definición de la actividad enzimática: enpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto por gramo de tejido en condiciones de ℃.1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..Nmol / min / g(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra÷VTotal de muestras× W(...)÷T= 36×A₄₆₀÷W

（3) por número de células:

Definición de la actividad enzimática: EnpH 7.2, la temperatura es37En condiciones celsius, cada10⁴Producción catalítica de células individuales por minuto1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..nmol / min / 10⁴celda(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total△()VMuestra÷VTotal de muestras×Número de células)÷T = 36×A₄₆₀△Número de células

(4)Calculado en volumen líquido

Definición de la actividad enzimática: enpH 7.2, la temperatura es37Producción catalítica por minuto por mililitro de suero en condiciones Celsius1 nmol de H₂O₂La cantidad de enzima necesaria se define como una unidad de actividad enzimática.

DAOActividad..Nmol / min / ml(...)= A₄₆₀△()ε×d(...)× VAnti - Total÷VMuestra÷T= 36×A₄₆₀

ε: coeficiente de extinción en milimoles de o - anisidina oxidada:7,5 L / mmol / cmV;d:96 Diámetro de la placa de agujero,0,5 cmV;VAnti - total:

Volumen total de reacción,0,2 mlV;VMuestra: volumen de la muestra en la reacción,0,05 mlV;VTotal de la muestra: añadir el volumen del extracto,1 mlV;CPR: concentración de proteínas de la muestra,mg/mlV;W: calidad de la muestra,gV;T: tiempo de reacción,30 minutos

Precauciones:

1, siODEl valor es menor que0.01Aumentar adecuadamente el tamaño de la muestra utilizada para la extracción;ODEl valor es mayor que0.8La enzima bruta se puede diluir adecuadamente o reducir el tamaño de la muestra utilizada para la extracción.

2El contenido de proteínas de la muestra debe determinarse por separado.

Kit de prueba de diaminoxidasaInstrucciones de pedido:

1. la mayoría de los productos están disponibles al contado y, en general, se pueden ordenar y enviar el mismo día.
2. algunos productos no convencionales deben reservarse con 1 - 2 días de antelación, mientras que los futuros en el extranjero deben reservarse con 3 - 6 semanas de antelación.
3. los precios de algunos productos cambiarán debido a factores como la fecha de entrega y el lote. si hay cambios, prevalecerá el nuevo precio el día del pedido.
4. el plazo diario de pedidos es de 16: 00 en punto, y algunas ciudades pueden llegar a 17: 00 en punto. si no se puede enviar ese día debido a que se excede el plazo, se organizará el envío al día siguiente.
5. después de tramitar el pago, por favor, Llámenos el pedido de fondo, junto con la dirección, el nombre y así sucesivamente del destinatario, por fax, mensaje de texto, etc.

Instrucciones de transporte:

Productos de temperatura extremadamente baja: se instala hielo seco durante el transporte de productos de temperatura extremadamente baja. Envolver el producto con hielo seco y sellarlo con una caja de espuma, pegarlo con cinta adhesiva capa por capa, colocarlo en la Caja de solebao y luego entregarlo a un servicio de mensajería cooperativo, que entrega a los clientes de manera segura, rápida, eficiente y segura, para garantizar que la naturaleza del producto sea estable como la misma y escoltar su experimento.
Productos de baja temperatura: durante el transporte de productos de baja temperatura, se instalan bolsas de hielo solebao para el transporte. Envuelva el producto en una bolsa de hielo con antelación, luego Selle con una caja de espuma, Selle firmemente la Caja de espuma con cinta adhesiva, luego Póngalo en la Caja de solebao (el efecto de aislamiento térmico puede durar menos de una semana), y luego Póngalo en manos de un cliente de mensajería cooperativa, segura, rápida, eficiente y segura, para garantizar que la naturaleza del producto sea estable y escoltar su experimento.
Productos a temperatura ambiente: no es necesario agregar hielo o envases especiales durante el transporte de productos a temperatura ambiente. Los productos son distribuidos rápidamente por el personal del almacén de la empresa, y la entrega urgente precisa, rápida y eficiente garantiza que los productos lleguen rápidamente a sus manos.