Kit de detección de vitalidad celular fluorescente CTF - ltm 2d

Hay muchos métodos para detectar la vitalidad celular, como detectar la exclusión de tintes, cambios en la concentración de atp, cambios en la actividad enzimática, etc. Las pruebas celulares a veces requieren estudios de mecanismos de Citotoxicidad y / o la creación de controles de parámetros internos, lo que genera múltiples necesidades de análisis, es decir, la detección de la misma muestra con múltiples métodos de análisis, con diferentes mecanismos de detección entre sí y sin interferencia entre sí, lo que permite hacer comparaciones relevantes, revelando así los mecanismos de Citotoxicidad o excluyendo diferencias sistémicas. Los productos extranjeros celltiter Flower (ctf) están diseñados sobre la base de este principio. La compañía ha desarrollado y lanzado su propio kit de detección de vitalidad celular fluorescente similar, que no tiene diferencias obvias en el rendimiento con productos de marcas extranjeras. Este producto se basa en la degradación de los productos de sustrato de péptidos - grupos fluorescentes por proteasas en células vivas, produciendo señales fluorescentes. Cuando la integridad de la membrana celular está dañada, la proteasa pierde su actividad de degradación del sustrato y no produce señales fluorescentes. CTF-LTMA diferencia del principio de detección del kit de luciferasa, el método de detección también es diferente, su sensibilidad de detección es menor que la del método de luciferasa, pero se puede detectar un daño celular leve más temprano, y las dos pruebas tienen una buena compatibilidad y se pueden realizar pruebas multiplex.
Características del producto:
1. rendimiento
Detectar señales, Window， La sensibilidad y especificidad son similares a las de productos similares de marcas extranjeras.
2、 相容性
Es compatible con reactivos de análisis comunes como ctg y no forma interacción.
3. características
Es más sensible al daño de la membrana celular temprana.
4. conveniencia
"Añadir - mezclar educación térmica - detección", todo el paso experimental es simple y fácil de operar.
Composición del producto:
El sustrato de la proteasa, mezclado con el amortiguador, se llena en una botella marrón de 10 ml o 100 ml y en un tubo de 2 ml, con las siguientes especificaciones:

1. preparación celular:
(1) colocar una densidad adecuada de células a detectar en una placa de cultivo celular de 96 o 384 agujeros. Se recomienda usar pizarras (si se usan en combinación con reactivos luminosos, se puede elegir la pizarra blanca).
(2) preparar el compuesto a inspeccionar. Añadir la concentración adecuada del compuesto a detectar al agujero de la placa celular. La concentración de disolvente orgánico en el medio de cultivo se mantuvo por debajo del 1% al 2%. Establecer un grupo de control sin compuestos. Continuar entrenando el tiempo adecuado de acuerdo con las necesidades del proyecto.
2. detección de la vitalidad celular:
(1) extracción de CTF - lTMEl reactivo de detección de vitalidad celular, El amortiguador CTF wan, se equilibra a temperatura ambiente después de la disolución completa. La oscilación del vórtice del sustrato de CTF hace que su Fondo che se mezcle uniformemente, y la centrifugación instantánea recoge el sustrato de CTF al Fondo del tubo.
(2) preparar el líquido de reacción ctf: el sustrato CTF es de 100x, y el líquido de reacción 1x se prepara con un amortiguador CTF de acuerdo con la cantidad, que se mezcla completamente.
(3) retire la placa de cultivo celular a medir y agregue el mismo volumen de líquido de reacción CTF por agujero, como 100 μl de medio de cultivo y 100 μl de líquido de reacción CTF 1x.
(4) la placa de vibración de baja velocidad se mezcla bien durante 20 segundos, y la detección de fluorescencia se realiza después de una reacción de protección de la luz de 37 ° C durante 60 minutos. Las diferentes células cortan los sustratos de CTF a diferentes velocidades, y el mejor tiempo de lectura de la tabla debe optimizarse de acuerdo con las células. El tablero de lectura se puede realizar tan pronto como 30 minutos después de agregar el reactivo. Por lo general, después de 60 minutos o más, la relación señal - ruido del resultado del tablero de lectura es mayor. Se recomienda que el tiempo máximo de lectura del tablero no supere los 3 horas.
(5) leer la señal fluorescente en el lector fluorescente, estimular la luminiscencia ex 380 - 400 nm y emitir luz em 505 nm.
(6) continuar con múltiples análisis aguas abajo según sea necesario, como la prueba de Apoptosis celular caspases 3 / 7.

1. después del uso inicial, se recomienda empaquetar el sustrato en - 20 ℃ para conservarlo y preparar el líquido de reacción fresco cada vez.
2. no se recomienda cambiar la cantidad de reactivos de reacción a voluntad sin una verificación estricta.

Almacenamiento protegido de la luz a - 20 ℃ o menos, válido por 12 meses.