Células madre mesenquimales de médula ósea porcina

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Nombre del producto:Células madre mesenquimales de médula ósea porcina

Fuente de la organización:Médula ósea

Especificaciones del producto:5×105 células/T25Botella de cultivo celular

Información de formación:

El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento pegadas a la pared

Morfología celular como Fibroblasto

Las características de transmisión se pueden transmitir.5Alrededor de la generación;3Excelente estado dentro de la generación

Líquido digestivo0,25%

Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2，5%

Perfil de la célula:

Tronco mesenquimal de médula ósea porcina()BMSC) aislado de la médula ósea; La médula ósea es el tejido hematopoyético del cuerpo y se encuentra dentro de muchos huesos del cuerpo. La médula ósea de los animales adultos se divide en dos tipos: la médula ósea Roja y la médula ósea amarilla. La médula ósea Roja puede fabricar glóbulos rojos, plaquetas y varios glóbulos blancos. Las plaquetas tienen un efecto hemostático, y los glóbulos blancos pueden matar e inhibir varios patógenos, incluidas bacterias, virus, etc. Algunos linfocitos pueden fabricar anticuerpos. Por lo tanto, la médula ósea no es solo un órgano hematopoyético, sino también un órgano inmune importante. La médula ósea es el ojo de la red presente entre la cavidad de la médula ósea de los huesos largos (como el húmero, el fémur) y los huesos planos (como el ilio), y es un tejido esponjoso, la médula ósea que puede producir células sanguíneas es ligeramente roja, llamada médula roja. Al nacer, la médula ósea Roja está llena de la cavidad de la médula ósea de todo el cuerpo, a medida que envejece, los células grasas aumentan, una parte considerable de la médula ósea roja es reemplazada por la médula ósea amarilla, y finalmente casi solo hay médula ósea Roja en la cavidad de la médula ósea de hueso plano. Las células madre mesenquimales de médula ósea presentes en el sistema estroma de médula ósea son células madre con un alto grado de autorrenovación y potencial de diferenciación multidireccional, además de las células madre hematopoyéticas, que pueden diferenciarse en huesos, cartílagos, tejidos musculares, piel, grasa, nervios y otros tejidos, por lo que pueden servir como células semilla en ingeniería de tejidos. En la médula ósea,BMSCQue representan el total de células nucleares de la médula ósea0001% - 0,1%El contenido es extremadamente bajo. Las condiciones de cultivo in vitro de las células madre mesenquimales de la médula ósea son más exigentes. durante el proceso de cultivo, el tiempo de adhesión a la pared, la densidad de plantación, el contenido sérico, la temperatura de cultivo y el medio de cultivo son altos.El pHValor y otras condiciones.

Introducción al método:

Los tallos mesenquimales de la médula ósea porcina aislados por el laboratorio de la compañía se prepararon mediante lavado de la médula ósea, centrifugación de gradiente de densidad, método de adhesión diferencial a la pared y selección de medios de cultivo, con un total de aproximadamente5×10?células/Botella.

Pruebas de calidad:

Secado mesenquimal de médula ósea porcina aislado por el laboratorio de la compañíaCD90Identificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pasos de cultivo:

I. reanimación de las células: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, añadir 5 ml de medio de cultivo y mezclar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 4 - 6 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se añaden al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a la placa de Petri de 6 cm) y se cultiva durante la noche. Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2. transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede llevar a cabo el cultivo de transmisión.

a）、 Para las células adherentes, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 - 2 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) al frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir 1 - 2 min, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio. si la mayoría de las células se redondean y se desprenden, recuperarlas rápidamente a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y agregar más de 5 ml de medio de cultivo que contiene más del 10% de suero para terminar la digestión.

3. soplar suavemente las células, extraerlas después de caerse, centrifugarlas durante 8 - 10 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2ml de medio de cultivo y soplarlo bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 5 - 6 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2, según el medio de cultivo complementario de 5 - 6 ml / botella.

b）、 Para las células suspendidas, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

Método 1: recoger las células, centrifugar durante 8 - 10 minutos a 1000 rpm, abandonar el líquido claro, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien, y dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5.

Método 2: se puede elegir el método de cambio de medio. después de descartar la mitad del medio de cultivo, las células restantes se cuelgan y la suspensión celular se divide en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 3.

¿¿ qué pasa con las células recibidas?

1. en primer lugar, observar si el frasco de cultivo celular está intacto y si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos. En caso afirmativo, tome una foto y Póngase en contacto con el soporte técnico a tiempo (las fotos tomadas servirán de base para el Servicio de seguimiento).

2. limpiar la superficie del frasco de cultivo celular con un 75% de alcohol y observar el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, algunas células adherentes se desprenderán de la pared del frasco en pequeñas cantidades; No abra primero la tapa del frasco de cultivo, coloque la célula en una caja de cultivo celular y deje reposar el cultivo durante 2 - 4 horas para estabilizar el Estado celular.

3. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como las características de la pared adherida (pared adherida / suspensión), la morfología celular, el medio de cultivo básico utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, la proporción de paso, la frecuencia de cambio de líquido, etc.

4. después de completar la reposo, retire el frasco de cultivo celular, la microscopía, tome fotos y registre el Estado celular (las fotos tomadas se utilizarán como base para el Servicio de seguimiento); Se recomienda tomar fotos y registrar regularmente el Estado de crecimiento celular después del cultivo celular.

5. células adherentes: si la densidad de crecimiento celular supera el 80%, se puede transmitir normalmente; Si no supera el 80%, retire el medio de cultivo en el frasco de cultivo celular y reserve alrededor de 5 ML para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance alrededor del 80% antes de realizar la operación de transmisión, y la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente.

6. células suspendidas: transferir todo el líquido del frasco de cultivo celular a un tubo centrífuga estéril de 50 ml, centrifugar 1200 RPM durante 5 minutos, después de la centrifugación, el medio de cultivo de sobrenadante se puede recoger para reserva, y la precipitación de las células de fondo del tubo se añade al medio de cultivo de 5 ML para soplar y volver a colgar. En el momento de la microscopía, si la densidad celular supera el 80%, se puede dividir la suspensión celular en dos frascos de cultivo celular para el cultivo y complementar el medio de cultivo a 5 ml; si la densidad celular no supera el 80%, se puede mover la suspensión celular al vial original para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance Alrededor del 80%.

Productos que la compañía está vendiendo:

Complejo de histocompatibilidad principal del cobaya(mhc / gpla) elisay Elisa. 96T/48T

Enzima sintasa endoteliales de cobaya(eNOS)ELISAKit Elisa. 96T/48T

Péptido relacionado con el gen de la Calcitonina de cobaya(cgrp) eliminación Elisa. 96T/48T

Complejo antiplasimolítico plasmolítico de cobaya(pap) elisay Elisa. 96T/48T

Monoaminidasa de ratónA(MAOA)Kit96T/48T

Kit de ELISA de peptidoglicano humano (PG)Péptido humano glicano(PG)Kit

Glicogenofosforilasa humana MM, GP-MMELISAKitGlucógeno humano0Enzima acidificante isozymeMM (GP-MM)Kit96T/48TEmbalaje importado

Bactericida humano/permeabilidad en proteína creciente, BPIEsterilización humana del kit/.Aumento de la proteína de permeabilidad(BPI)Especificaciones del kit:96T/48T

Kit cuantitativo de método colorimétrico de Amilopectina vegetal20vez

HumaGF-beta-inducible leaarlyresponsegeno-1, TIEG1ELISAKitpersonaTGF -Genes tempranos inducidos por beta1 (TIEG1)Especificaciones del kit:96T/48T

ORC5LAnticuerpos proteicos

El melanoma prioriza la expresión de anticuerpos antigénicos

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HTRA2ReorganizadorHTRA2 / OMIProteínaProteína

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Células madre mesenquimales de médula ósea porcinaProteína de choque térmico de alta sensibilidad de rata70 (HSP-70)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA HSP-70

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ELISARatonesC -Péptidos(péptido C de ratón) Embalaje importado

El atractivo islandés de cliakildlComplejo inmunológico de LPL de rata

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