Células de Membrana basal folicular de pollo

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Nombre del producto:Células de Membrana basal folicular de pollo

Fuente de la organización:Tejido folicular de pollo

Especificaciones del producto:5×105 células/T25Botella de cultivo celular

Información de formación:

El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento pegadas a la pared

Morfología celular como Fibroblasto

Las características de transmisión se pueden transmitir.2 - 3generación

Líquido digestivo0,25%

Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2，5%

Perfil de la célula:

La Membrana basal del folículo de pollo se separa del tejido folicular de pollo; Los folículos maduros son uno de los componentes de la estructura tisular de los ovarios, con grandes cavidades foliculares y Cúmulos obvios. Las células del endometrio folicular están cerca de la capa de partículas foliculares, con una Membrana basal separada de las células de la capa de partículas, las células del endometrio son poligonosas, el plasma celular es claro, el núcleo celular es circular, se pueden ver muchos capilares entre las células, las células de la membrana externa se encuentran en la capa más externa, en su mayoría en forma de fusiforme, y la demarcación con el tejido conjuntivo circundante no es obvia. Folículos..folículo) hay una capa de células en forma de diamante o planas alrededor de los ovocitos medios. mientras los folículos comienzan a desarrollarse y los ovocitos crecen, las células en forma de diamante circundantes se convierten en forma de cubo y se multiplican por una sola capa. debido a que su plasma contiene partículas, se llama células granulares. Las células granulares de los folículos primarios son monocapas; Las células granulares de los folículos secundarios aumentan a la capa doble; El desarrollo de células granulares de folículos maduros se convierte en una sola capa. El núcleo celular de las células granuladas es grande y redondo, el color es profundo, y la superficie libre de las células tiene muchas protuberancias delgadas que se extienden a la depresión de la zona de radiación.

Introducción al método:

La Membrana basal folicular de pollo separada por el laboratorio de la compañía se prepara mediante la digestión repetida de la enzima colagenasa después de la Separación mecánica y la selección a través de un medio de cultivo especial, con un total de aproximadamente5×10?células/Botella.

Pruebas de calidad:

Membrana basal folicular de pollo aislada por el laboratorio de la empresa3β- HSDIdentificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pasos de cultivo:

I. reanimación de las células: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, añadir 5 ml de medio de cultivo y mezclar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 4 - 6 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se añaden al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a la placa de Petri de 6 cm) y se cultiva durante la noche. Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2. transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede llevar a cabo el cultivo de transmisión.

a）、 Para las células adherentes, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 - 2 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) al frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir 1 - 2 min, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio. si la mayoría de las células se redondean y se desprenden, recuperarlas rápidamente a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y agregar más de 5 ml de medio de cultivo que contiene más del 10% de suero para terminar la digestión.

3. soplar suavemente las células, extraerlas después de caerse, centrifugarlas durante 8 - 10 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2ml de medio de cultivo y soplarlo bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 5 - 6 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2, según el medio de cultivo complementario de 5 - 6 ml / botella.

b）、 Para las células suspendidas, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

Método 1: recoger las células, centrifugar durante 8 - 10 minutos a 1000 rpm, abandonar el líquido claro, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien, y dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5.

Método 2: se puede elegir el método de cambio de medio. después de descartar la mitad del medio de cultivo, las células restantes se cuelgan y la suspensión celular se divide en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 3.

¿¿ qué pasa con las células recibidas?

1. en primer lugar, observar si el frasco de cultivo celular está intacto y si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos. En caso afirmativo, tome una foto y Póngase en contacto con el soporte técnico a tiempo (las fotos tomadas servirán de base para el Servicio de seguimiento).

2. limpiar la superficie del frasco de cultivo celular con un 75% de alcohol y observar el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, algunas células adherentes se desprenderán de la pared del frasco en pequeñas cantidades; No abra primero la tapa del frasco de cultivo, coloque la célula en una caja de cultivo celular y deje reposar el cultivo durante 2 - 4 horas para estabilizar el Estado celular.

3. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como las características de la pared adherida (pared adherida / suspensión), la morfología celular, el medio de cultivo básico utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, la proporción de paso, la frecuencia de cambio de líquido, etc.

4. después de completar la reposo, retire el frasco de cultivo celular, la microscopía, tome fotos y registre el Estado celular (las fotos tomadas se utilizarán como base para el Servicio de seguimiento); Se recomienda tomar fotos y registrar regularmente el Estado de crecimiento celular después del cultivo celular.

5. células adherentes: si la densidad de crecimiento celular supera el 80%, se puede transmitir normalmente; Si no supera el 80%, retire el medio de cultivo en el frasco de cultivo celular y reserve alrededor de 5 ML para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance alrededor del 80% antes de realizar la operación de transmisión, y la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente.

6. células suspendidas: transferir todo el líquido del frasco de cultivo celular a un tubo centrífuga estéril de 50 ml, centrifugar 1200 RPM durante 5 minutos, después de la centrifugación, el medio de cultivo de sobrenadante se puede recoger para reserva, y la precipitación de las células de fondo del tubo se añade al medio de cultivo de 5 ML para soplar y volver a colgar. En el momento de la microscopía, si la densidad celular supera el 80%, se puede dividir la suspensión celular en dos frascos de cultivo celular para el cultivo y complementar el medio de cultivo a 5 ml; si la densidad celular no supera el 80%, se puede mover la suspensión celular al vial original para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance Alrededor del 80%.

Productos que la compañía está vendiendo:

Proteasa metálica de matriz de ratón-2 Nombre en inglés: metaloproteinasa de maíz 2 Especificaciones: Siglas en inglés: MMP-2

Proteasa metálica de matriz de ratón-3 Nombre en inglés: metaloproteinasa de maíz 3 Especificaciones: Siglas en inglés: MMP-3

Proteasa metálica de matriz de ratón-9 Nombre en inglés: metaloproteinasa de maíz 9 Especificaciones: Siglas en inglés: MMP-9

Malasa de ratón Nombre en inglés: Enzima Málica del Ratón Especificaciones: Siglas en inglés: ME

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Proteasa metálica matricial21Anticuerpos

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DCUN1D2 Proteína humanaReorganizadorDCUN1D2Proteína

FZD5 Proteína humanaReorganizadorFrizzled-5 / FZD5ProteínaSu & FcEtiquetas(...)

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DCUN1D2 Proteína humanaReorganizadorDCUN1D2Proteína

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Células de Membrana basal folicular de polloácido dimetilspermónico asimétrico en ratas(ADMA)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA ADMA

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ELISADopamina en ratones(dopamina del ratón) Embalaje importado

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