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Células musculares lisas de la arteria pulmonar de pollo

Atributos del producto:
Fuentes organizativas |
Especificaciones del producto |
Morfología celular |
Número de artículo |
Tejido pulmonar |
5×105 células/T25Botella de cultivo celular |
Tipo de Fibroblasto |
YS-01X7010 |
Perfil de la célula:
La fibrogénesis pulmonar de pollo se separa del tejido pulmonar; La arteria pulmonar también se llama tronco pulmonar. En los vertebrados que respiran aire, la sangre venosa se dirige desde el corazón a las arterias de los pulmones. Las arterias pulmonares principales comienzan en el ventrículo derecho y se inclinan hacia arriba y hacia atrás a la izquierda antes de la aorta, y se dividen en arterias pulmonares izquierda y derecha debajo del arco aórtico, que entran en los pulmones a través de la puerta pulmonar. El Tronco pulmonar se encuentra en el pericardio y es un tronco arterial grueso y corto. Desde el ventrículo derecho, se inclina por encima de la parte posterior izquierda en la dirección anterior de la aorta ascendente y se divide en arterias pulmonares izquierda y derecha por debajo del arco aórtico. La arteria pulmonar izquierda es más corta, se cruza por delante del bronquio principal izquierdo y se divide en dos ramas para entrar en los lóbulos superior e inferior del pulmón izquierdo. La arteria pulmonar derecha es larga y gruesa, atraviesa la derecha a través de la aorta ascendente y la vena cava superior en la dirección posterior, y se divide en tres ramas que entran en los lóbulos superior, medio e inferior del pulmón derecho. Fibrocitos..Fibroblasto) es el principal componente celular del tejido conjuntivo suelto, diferenciado de las células mesenquimales durante el período embrionario; Los fibrocitos son más grandes, con contornos claros, en su mayoría en forma de Huso protuberante o estructura plana en forma de estrella, y sus núcleos son ovoides regulares, con núcleos grandes y obvios. Los fibrocitos tienen una fuerte actividad funcional, un citophilo débil y alcalino, con una clara actividad de síntesis y secreción de proteínas, bajo ciertas condiciones, puede lograr la transformación mutua con los fibrocitos; Los fibrocitos juegan un papel muy importante en diferentes grados de degeneración celular, necrosis y reparación de defectos tisulares. Los fibrocitos de la arteria pulmonar recién aislados son redondos, bien refractivos y suspendidos en el medio de cultivo.30 minutosLas células se adhieren a la pared, y algunas de ellas comienzan a extender los pies falsos, mostrando pequeñas protuberancias;6 horasLas células posteriores se adhieren básicamente a la pared, se extienden en forma de fusiforme, el núcleo celular es claro, se distribuye uniformemente, se dispersan en el crecimiento y no se reúnen en grupos; Las células crecen rápidamente,5 - 7El cielo es un Estado de fusión, las células están bien dispuestas, algunas se cruzan y se superponen para crecer, planas, el cuerpo celular es grande, el Citosol es transparente, el núcleo es grande, ovalado y el color es ligero. Las células se fusionan y se conectan entre sí en una red; Las células se distribuyen en forma de Huso protuberante o en forma de estrella plana. Las principales funciones de los fibrocitos pulmonares en condiciones fisiológicas incluyen: construir y mantener la morfología normal de las arterias pulmonares; Sintetizar y liberar la matriz extracelular; Después de la lesión tisular, un gran número de tejidos dañados se reunieron a tiempo para reparar los tejidos dañados.
Introducción al método:
El Músculo liso de la arteria pulmonar de pollo aislado por el laboratorio de la compañía se preparó mediante digestión por colagenasa combinada con el método de adhesión diferencial a la pared, y el número total de células fue de aproximadamente5×10?células/Botella.
Pruebas de calidad:
El Músculo liso de la arteria pulmonar de pollo aislado por el laboratorio de la compañía pasa por alfaSMAIdentificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.
Información de formación:
El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar
Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día
Características de crecimiento pegadas a la pared
Morfología celular como Fibroblasto
Las características de transmisión se pueden transmitir.5Alrededor de la generación;3Excelente estado dentro de la generación
Líquido digestivo0,25%
Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2,5%

Transmisión celular y criopreservación:
| Pasos de paso celular | Pasos de Criopreservación celular |
| Si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de paso. 1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio. 2. añadir 2 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) en el frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de las células se redondean y se caen, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y añadir una pequeña cantidad de medio de cultivo para terminar la digestión. 3. presione 6 - 8 ml / botella para complementar el medio de cultivo, revuelva suavemente y exprima, centrifuga durante 4 minutos en condiciones de 1000rpm, abandone el sobrenadante, agregue 1 - 2ml de medio de cultivo y sople bien. 4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5. | Cuando la célula está en buen estado de crecimiento, se puede congelar la célula. Tomemos como ejemplo las siguientes botellas t25; 1. al congelar la célula, después de descartar el medio de cultivo, PBS limpia el Fondo de la botella 1 - 2 veces y agrega 1 ML. después de que la célula se redondea y se cae, agrega 2 ml del medio de cultivo para terminar la digestión, que se puede contar con una placa de recuento de sangre. 2.1000rpm se centrifuga durante 5 minutos para eliminar el desbridamiento. Resuspensión con suero, más Dmso hasta una concentración final del 10%. Después de agregar dmso, mezcle rápidamente y asigne al congelador de acuerdo con la cantidad de cada 1 ml, preste atención al congelador para hacer un buen trabajo de identificación. La compañía congela más de 1x106 células por célula criogénica. 3. coloque el criodepósito en la Caja de enfriamiento del programa, colócalo en el refrigerador de - 80 grados y transfiera al depósito de nitrógeno líquido al menos 2 horas después. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez. |
Los métodos de cultivo de células primarias generalmente incluyen los siguientes cuatro tipos:
① método de cultivo de bloques de tejido
El cultivo de bloques de tejido es un método de cultivo primario comúnmente utilizado, simple, fácil y con alta tasa de éxito. El método básico es vacunar las pequeñas masas de tejido cortadas en un frasco de cultivo (o placa de petri), que se puede aplicar previamente con una fina capa de colágeno para facilitar que los bloques de tejido se adhieran a la pared del frasco, de modo que las células circundantes puedan crecer hacia afuera a lo largo de la pared del frasco.
② método de cultivo digestivo
③ método de cultivo de células suspendidas
Para las células que crecen en suspensión, como las células leucémicas, los linfocitos, las células de médula ósea, las células cancerosas e inmunes en el líquido torácico y ascite, no es necesario digerir, se puede separar por centrifugación de baja velocidad, cultivar directamente o vacunarse después de la separación por estratificación de linfocitos.
④ cultivo de órganos
El cultivo de órganos se refiere al cultivo directo en condiciones ambientales específicas in vitro sin separación de tejidos después de obtener un órgano o un bloque de tejido de un donante. el cultivo de órganos puede mantener la integridad relativa del tejido orgánico y puede usarse para centrarse en la observación de la conexión, disposición e interacción entre las células, así como la regulación biológica del entorno local.

Productos que la compañía está vendiendo:
Proteína osteogénica de ratón7 Nombre en inglés: Proteína Morfogenetica del Hueso del Ratón 7 Especificaciones: Siglas en inglés: BMP7
RatonesBFactor estimulante de linfocitos Nombre en inglés: Estimulador de linfocitos B Especificaciones: Siglas en inglés: BAFF
Factor apoptótico de ratónBAX Nombre en inglés: apoptógeno BAX Especificaciones: Siglas en inglés: BAX
Genes relacionados con la apoptosis celular en ratonesBCL-2 Nombre en inglés: BCL-2 inhibidor de la apoptosis celular Especificaciones: Siglas en inglés: BCL-2
Anticuerpos anti - III de ratón(AT-ⅢELISAKit96T/48T
Kit de ELISA de proteína 40 de choque térmico humano (HSP-40)Proteína de choque térmico humano40 (HSP-40)Kit
EuglobulinLisis humana, ELELISAKitEuglobulina humana(EL)Kit96T/48TEmbalaje importado
La angiogénesis humana 1, la ira 1Kit de angiogénesis humana1 (ANG-1)Especificaciones del kit:96T/48T
Plantas conservadas(prolina)Kit cuantitativo de colorimetría de contenido20vez
El regalo principalHormona luteinizante de pescado(LH)Especificaciones del kit:96T/48T
PERatones marcadosCD5Anticuerpos monoclonales
Anticuerpos contra la tirokinasa del receptor musculoesquelético
El THOP1Ratones recombinantesEl THOP1ProteínaProteína
S100Proteína de Unión al calcio(S100)Proteína recombinanteProteína de unión al calcio recombinante S100 (S100)
KLRK1ReorganizadorNKG2D / CD314Proteína(aa 78-216, SuEtiquetasProteína
DSC2 Proteína humanaReorganizadorDSC2 / Desmocolina-2Proteína
EPCAM Proteína CynomolgusMono cangrejo recombinanteEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Proteína
Defensina beta103B (DEF)β103B)Proteína recombinanteDefensina Beta 103B recombinante (DEFB103B)
DSC2 Proteína humanaReorganizadorDSC2 / Desmocolina-2Proteína
FIGFRatones recombinantesVEGF-D / VEGFD / FIGFProteínaProteína
IGFBP1 Proteína CynomolgusMono cangrejo recombinanteIGFBP1Proteína
BIRC5ReorganizadorSurvivin / BIRC5 / API4ProteínaProteína
Células musculares lisas de la arteria pulmonar de polloLaminina de rata/.Lamina(LN)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA LN
N-acetil-seril-aspail-lisil-prolina de ratón (AcSDKRatonesN-Acilo-Amido de seda-Asparaginilo-Lisina-ConservarAcSDK
ELISADoble cadena de ratónADN (ADN de ratón) Embalaje importado
CLIAKitforLC1(Humanai-heparcytosolaiboditipe1)ELISAKitCitosol de células hepáticas humanas1Anticuerpos tipo
Tipo universalveroToxinas Escherichia coli Shigella-1(VTEC-Shigatoxina1)Kit20vez
ELISAKitBVMonoBVirus
Condiciones de cultivo de las células primarias:
I. cultivo de células adherentes estáticas (incluido el cultivo de células semiadherentes)
1. las células deben enjuagarse adecuadamente para eliminar la toxicidad del líquido digestivo en la medida de lo posible;
2. la concentración celular debe ser ligeramente mayor al vacunarse, al menos 5 × 108 células / l;
3. los medios de cultivo se pueden cultivar con Eagle (mem Corning 10 - 010 - cvr) o dmem (corning 10 - 013 - cvr);
4. la concentración sérica de ganado fetal es del 10% al 80%.
5. se debe cultivar en una incubadora con 37 ° C y 5% de co2;
6. minimizar las oscilaciones durante los 2 días iniciales para evitar que las células recién adheridas se caigan y floten;
7. cuando la célula se estira básicamente contra la pared y forma gradualmente una red, la célula primaria debe ser reemplazada por líquido;
8. cuando las células suspendidas de la médula ósea o la sangre periférica se cultivan en reposo durante una semana, la suspensión celular debe cambiarse después de la centrifugación a baja velocidad.
II. cultivo de células en suspensión
1. en el cultivo primario, los glóbulos rojos deben eliminarse en la medida de lo posible;
2. el cultivo a corto plazo se puede realizar en un medio de cultivo rpmi1640 que contiene 10% de suero de ternera;
3. la concentración celular puede estar dentro del rango de 5 - 8 × 109 / L y se puede realizar una prueba de botella dividida;
4. en el cultivo a largo plazo, se debe agregar un factor de crecimiento a los linfocitos y una pequeña cantidad de suero de pacientes originales a las células de leucemia para facilitar el crecimiento celular;
5. el cambio de líquido celular generalmente requiere un cambio de líquido de media cantidad cada 3 días;
6. la transmisión celular generalmente se realiza cuando la proliferación celular se acelera y la densidad celular es alta.