Células grasas porcinas

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Nombre del producto:Células grasas porcinas

Fuente de la organización:Tejido adiposo

Especificaciones del producto:5×105 células/T25Botella de cultivo celular

Información de formación:

El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento pegadas a la pared

Morfología celular fusiforme, poliángulos

Las características de transmisión pertenecen a las células diferenciadas finales; Pertenece a la población de células no proliferantes

Líquido digestivo0,25%

Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2，5%

Perfil de la célula:

La grasa porcina se separa del tejido adiposo; El tejido adiposo se compone principalmente de un gran número de grupos de células grasas, y las células grasas reunidas en grupos se dividen en folletos por una fina capa de tejido conjuntivo suelto; Las grasas almacenadas, que se descomponen rápidamente en glicerina y ácidos grasos cuando es necesario, se transportan a los tejidos a través de la sangre para su uso. Afectan la sensibilidad a la insulina, los niveles de presión arterial, la función endoteliales, la actividad fibrolítica y la respuesta inflamatoria, y participan en una variedad de procesos fisiopatológicos importantes; El tejido adiposo se ha convertido en un sistema endocrino extremadamente importante desde que solía ser un órgano puramente almacenado en energía. Las células grasas se dividen en células grasas blancas y células grasas marrones (marrones), a menudo blancas, que proliferan en grandes cantidades en la infancia y alcanzan su número en la adolescencia, después de lo cual el número generalmente ya no aumenta. Las células contienen una gran cantidad de vesículas ricas en grasas, conocidas como vesículas lipídicas, ricas en retículas endoplásticas de superficie luminosa. Además, hay una célula grasa marrón que se encuentra principalmente en animales entre los omóplatos, el cuello y la espalda, las axilas, el mediastino y alrededor de los riñones, y contiene grasa marrón altamente reducida, que actúa para descomponer los lípidos y producir calor, regulando la proporción de lípidos en el cuerpo.

Introducción al método:

La grasa de cerdo aislada por el laboratorio de la compañía se prepara por digestión, y el número total de células es de aproximadamente5×10?células/Botella.

Pruebas de calidad:

La grasa de cerdo separada por el laboratorio de la compañía es roja por aceite.ODetección de teñido, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pasos de cultivo:

I. reanimación de las células: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, añadir 5 ml de medio de cultivo y mezclar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 4 - 6 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se añaden al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a la placa de Petri de 6 cm) y se cultiva durante la noche. Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2. transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede llevar a cabo el cultivo de transmisión.

a）、 Para las células adherentes, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 - 2 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) al frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir 1 - 2 min, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio. si la mayoría de las células se redondean y se desprenden, recuperarlas rápidamente a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y agregar más de 5 ml de medio de cultivo que contiene más del 10% de suero para terminar la digestión.

3. soplar suavemente las células, extraerlas después de caerse, centrifugarlas durante 8 - 10 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2ml de medio de cultivo y soplarlo bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 5 - 6 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2, según el medio de cultivo complementario de 5 - 6 ml / botella.

b）、 Para las células suspendidas, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

Método 1: recoger las células, centrifugar durante 8 - 10 minutos a 1000 rpm, abandonar el líquido claro, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien, y dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5.

Método 2: se puede elegir el método de cambio de medio. después de descartar la mitad del medio de cultivo, las células restantes se cuelgan y la suspensión celular se divide en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 3.
Productos que la compañía está vendiendo:

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Anticuerpos contra el Músculo liso de ratones(ASMA) ELISAKit96T/48T

Kit de ELISA de proteína 20 de choque térmico humano (HSP-20)Proteína de choque térmico humano20 (HSP-20)Kit

Buscando pruebas.persona(Protamina)Kit96T/48TEmbalaje importado

Androstenediona humanaKit xiongen humano ditong(ASD)Especificaciones del kit:96T/48T

No proteico vegetal/.Kit cuantitativo de método colorimétrico de contenido de sulfhídrico libre20vez

MhcelipainComplejo de histocompatibilidad principal de peces(MHC)Especificaciones del kit:96T/48T

PE-Cy7MarcadorCD56 (NCAM)Anticuerpos monoclonales

Proteína del dedo anular8Anticuerpos

CD38Conejo recombinanteSCARB3ProteínaProteína

NTN (proteína del proceso nervioso 0,5 mg ntn)Factor de crecimiento nervioso(Antígenos(...)

MEP1AReorganizadorMEP1A / PPHAProteínaProteína

DPYS Proteína humanaReorganizadorDPYS / DihidropirimidinasaProteína(Su & GSTEtiquetas(...)

Ratón de proteína KLK1Ratones recombinantesKLK1 / Kallikrein 1Proteína

NTN (proteína del proceso nervioso 0,5 mg ntn)Factor de crecimiento nervioso(Antígenos(...)

DPYS Proteína humanaReorganizadorDPYS / DihidropirimidinasaProteína(Su & GSTEtiquetas(...)

CD38Conejo recombinanteSCARB3ProteínaProteína

Ratón de proteína KLK1Ratones recombinantesKLK1 / Kallikrein 1Proteína

MEP1AReorganizadorMEP1A / PPHAProteínaProteína

Células grasas porcinasSubunidad gamma de laminina de rata-2(LAMC2)Kit, nombre en inglés:Kit ELISA LAMC2

Kit de ELISA del péptido naiurético del cerebro terminal N del ratón (-proBNP)RatonesNCerebrina terminal(-proBNP)Kit

ELISAFactor estimulante de colonias de macrófagos de ratón(ratón M-CSF) Embalaje importado

Activación 2 (proteína portadora de lípidos humanos 2) elistorProteína portadora de lípidos humanos2

Tipo universalRFLPKit de análisis genético20vez

Elisakiven -Interferón alfa mono alfa

¿¿ qué pasa con las células recibidas?

1. en primer lugar, observar si el frasco de cultivo celular está intacto y si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos. En caso afirmativo, tome una foto y Póngase en contacto con el soporte técnico a tiempo (las fotos tomadas servirán de base para el Servicio de seguimiento).

2. limpiar la superficie del frasco de cultivo celular con un 75% de alcohol y observar el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, algunas células adherentes se desprenderán de la pared del frasco en pequeñas cantidades; No abra primero la tapa del frasco de cultivo, coloque la célula en una caja de cultivo celular y deje reposar el cultivo durante 2 - 4 horas para estabilizar el Estado celular.

3. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como las características de la pared adherida (pared adherida / suspensión), la morfología celular, el medio de cultivo básico utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, la proporción de paso, la frecuencia de cambio de líquido, etc.

4. después de completar la reposo, retire el frasco de cultivo celular, la microscopía, tome fotos y registre el Estado celular (las fotos tomadas se utilizarán como base para el Servicio de seguimiento); Se recomienda tomar fotos y registrar regularmente el Estado de crecimiento celular después del cultivo celular.

5. células adherentes: si la densidad de crecimiento celular supera el 80%, se puede transmitir normalmente; Si no supera el 80%, retire el medio de cultivo en el frasco de cultivo celular y reserve alrededor de 5 ML para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance alrededor del 80% antes de realizar la operación de transmisión, y la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente.

6. células suspendidas: transferir todo el líquido del frasco de cultivo celular a un tubo centrífuga estéril de 50 ml, centrifugar 1200 RPM durante 5 minutos, después de la centrifugación, el medio de cultivo de sobrenadante se puede recoger para reserva, y la precipitación de las células de fondo del tubo se añade al medio de cultivo de 5 ML para soplar y volver a colgar. En el momento de la microscopía, si la densidad celular supera el 80%, se puede dividir la suspensión celular en dos frascos de cultivo celular para el cultivo y complementar el medio de cultivo a 5 ml; si la densidad celular no supera el 80%, se puede mover la suspensión celular al vial original para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance Alrededor del 80%.