Células endoteliales de la aorta porcina

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Nombre del producto:Células endoteliales de la aorta porcina

Fuente de la organización:Tejido aórtico

Especificaciones del producto:5×105 células/T25Botella de cultivo celular

Información de formación:

Condiciones del sobrePLL()0,1 mg / ml), gelatina0,1%(...)

El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento pegadas a la pared

Morfología celular similar a las células endoteliales

Las características de transmisión se pueden transmitir.2 - 3generación

Líquido digestivo0,25%

Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2，5%

Perfil de la célula:

El epitelio de la aorta porcina separa el tejido arterial autónomo; La aorta es la columna vertebral de la circulación sistémica. Su ruta de funcionamiento es: la aorta ascendente se levanta del ventrículo izquierdo y llega al primer lugar en el lado derecho.2La articulación costal torácica se mueve alto hacia el arco aórtico, que se mueve hacia la izquierda y hacia atrás hasta el primer lugar.4La aorta descendente se mueve en el borde inferior del cuerpo de la columna torácica; En el artículo12El foramen aórtico que atraviesa el diafragma a gran altura del cuerpo torácico se mueve hacia la aorta abdominal, por encima de la cual es la aorta torácica, hasta el primer lugar.4El borde inferior del cuerpo lumbar se divide en la arteria ilíaca común izquierda y derecha; La arteria ilíaca común se divide en arteria ilíaca interna y externa a la altura de la articulación sacroilíaca. Las células endoteliales aórticas son células de una sola capa que cubren la superficie interna de la aorta y pueden secretar una serie de sustancias vasoactivas para mantener la homeostasis vascular, que se destruye cuando se estimula por inflamación u otros factores, lo que provoca la aparición de algunas enfermedades cardiovasculares. Por lo tanto, las células endoteliales aórticas se han convertido en una herramienta para estudiar la patogénesis de las enfermedades cardiovasculares y los medicamentos terapéuticos. Las células endoteliales o las células endoteliales vasculares son una fina capa de células epiteliales especializadas compuestas por una capa de células planas. Forma la pared interior del vaso sanguíneo y es la interfaz entre la sangre y otras paredes vasculares (epitelio escamoso de una sola capa) en el Lumen vascular. Las células endoteliales son a lo largo de todo el sistema circulatorio, desde el corazón hasta los microvasos más pequeños.

Introducción al método:

El epitelio aórtico porcino aislado por el laboratorio de la compañía fue-La colagenasa combinada con el método digestivo combinado con el método de adhesión diferencial a la pared y la preparación a través del cultivo y selección de medios de cultivo especiales para células endoteliales, el número total de células es de aproximadamente5×10?células/Botella.

Pruebas de calidad:

Meridiano endoteliales aórtico porcino aislado por el laboratorio de la compañíaCD31Identificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pasos de cultivo:

I. reanimación de las células: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, añadir 5 ml de medio de cultivo y mezclar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 4 - 6 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se añaden al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a la placa de Petri de 6 cm) y se cultiva durante la noche. Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2. transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede llevar a cabo el cultivo de transmisión.

a）、 Para las células adherentes, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 - 2 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) al frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir 1 - 2 min, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio. si la mayoría de las células se redondean y se desprenden, recuperarlas rápidamente a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y agregar más de 5 ml de medio de cultivo que contiene más del 10% de suero para terminar la digestión.

3. soplar suavemente las células, extraerlas después de caerse, centrifugarlas durante 8 - 10 minutos en condiciones de 1000rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2ml de medio de cultivo y soplarlo bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 5 - 6 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2, según el medio de cultivo complementario de 5 - 6 ml / botella.

b）、 Para las células suspendidas, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:

Método 1: recoger las células, centrifugar durante 8 - 10 minutos a 1000 rpm, abandonar el líquido claro, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien, y dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5.

Método 2: se puede elegir el método de cambio de medio. después de descartar la mitad del medio de cultivo, las células restantes se cuelgan y la suspensión celular se divide en una nueva placa de Petri o botella que contiene 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 3.

¿¿ qué pasa con las células recibidas?

1. en primer lugar, observar si el frasco de cultivo celular está intacto y si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos. En caso afirmativo, tome una foto y Póngase en contacto con el soporte técnico a tiempo (las fotos tomadas servirán de base para el Servicio de seguimiento).

2. limpiar la superficie del frasco de cultivo celular con un 75% de alcohol y observar el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, algunas células adherentes se desprenderán de la pared del frasco en pequeñas cantidades; No abra primero la tapa del frasco de cultivo, coloque la célula en una caja de cultivo celular y deje reposar el cultivo durante 2 - 4 horas para estabilizar el Estado celular.

3. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como las características de la pared adherida (pared adherida / suspensión), la morfología celular, el medio de cultivo básico utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, la proporción de paso, la frecuencia de cambio de líquido, etc.

4. después de completar la reposo, retire el frasco de cultivo celular, la microscopía, tome fotos y registre el Estado celular (las fotos tomadas se utilizarán como base para el Servicio de seguimiento); Se recomienda tomar fotos y registrar regularmente el Estado de crecimiento celular después del cultivo celular.

5. células adherentes: si la densidad de crecimiento celular supera el 80%, se puede transmitir normalmente; Si no supera el 80%, retire el medio de cultivo en el frasco de cultivo celular y reserve alrededor de 5 ML para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance alrededor del 80% antes de realizar la operación de transmisión, y la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente.

6. células suspendidas: transferir todo el líquido del frasco de cultivo celular a un tubo centrífuga estéril de 50 ml, centrifugar 1200 RPM durante 5 minutos, después de la centrifugación, el medio de cultivo de sobrenadante se puede recoger para reserva, y la precipitación de las células de fondo del tubo se añade al medio de cultivo de 5 ML para soplar y volver a colgar. En el momento de la microscopía, si la densidad celular supera el 80%, se puede dividir la suspensión celular en dos frascos de cultivo celular para el cultivo y complementar el medio de cultivo a 5 ml; si la densidad celular no supera el 80%, se puede mover la suspensión celular al vial original para continuar el cultivo hasta que la densidad celular alcance Alrededor del 80%.

Productos que la compañía está vendiendo:

Ratones(CH)Kit 96T/48T

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Proteína quimiotaxia monocitos de ratón4 (MCP-4/CCL13)Kit 96T/48T

Proteína quimiotaxia monocitos de ratón3 (MCP-3/CCL7)Kit 96T/48T

Factores neurotróficos derivados de líneas de células gliales en ratonesELISA (GDNF)Kit96T/48T

Kit de ELISA de proteína de maíz oligomérica de cailage humano (COMP)Proteína de la matriz oligomérica del cartílago humano(COMP)Kit

Productos de proteína de oxidación avanzada humana, AOPPELISAKitProductos proteicos oxidados avanzados humanos(AOPP)Kit96T/48TEmbalaje importado

HumanAi-Complejo 1qaibody, C1qKit anticomplemento humano1qAnticuerpos(C1q)Especificaciones del kit:96T/48T

Kit de separación mitocondrial activa vegetal10vez

Humanosα1βglicoproteína,α1β- sí, señor.Alfa humano1Glicoproteína beta()α1βGP)Especificaciones del kit:96T/48T

PerCP-Cy5.5MarcadorCD9Anticuerpos monoclonales

Activar moléculas inducidasCD69Anticuerpos

Cxcl 12ReorganizadorCXCL12 / SDF1bProteína(FcEtiquetasProteína

Hemoglobina cerebral(NGB)Proteína recombinanteNeuroglobina recombinante (NGB)

ADPRHReorganizadorADPRH / ARH1ProteínaProteína

Proteína EGF HumanaReorganizadorEGF / Factor de Crecimiento EpidérmicoProteína

Proteína HA H7N9Gripe a recombinanteH7N9 (A/Anhui/1/2013)Hemaglutinina(Hemaglutinina / HA)Proteína

Hemoglobina cerebral(NGB)Proteína recombinanteNeuroglobina recombinante (NGB)

Proteína EGF HumanaReorganizadorEGF / Factor de Crecimiento EpidérmicoProteína

Cxcl 12ReorganizadorCXCL12 / SDF1bProteína(FcEtiquetasProteína

Proteína HA H7N9Gripe a recombinanteH7N9 (A/Anhui/1/2013)Hemaglutinina(Hemaglutinina / HA)Proteína

ADPRHReorganizadorADPRH / ARH1ProteínaProteína

Células endoteliales de la aorta porcinaLaminina de rata(LN)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA LN

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CLIAKitforHumanP27proteinELISAKitpersonaP27Proteína

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ELISAKitLptn/LTN/XCL1Factor de quimiotaxia linfocitaria de rata