Kit de detección genética de reporte de Luciferasa de luciérnaga de un solo paso

Las pruebas genéticas reportadas son una herramienta importante en el campo de la investigación de biología molecular moderna para analizar las posibles interacciones entre elementos CIS (como promotores, potenciadores y silenciadores) y factores de interacción trans en áreas laterales de genes estructurales.
La Luciferasa es ampliamente utilizada en la regulación genética y la detección de medicamentos. La Luciferasa es una proteína con un peso molecular de aproximadamente 61 KD que, en presencia de atp, iones de magnesio y oxígeno, puede catalizar la producción de oxiluciferina, que en el proceso de oxidación de la Luciferina produce señales de luz, como se muestra en la figura 1.
La señal óptica de este Kit es un momento instantáneo que debe detectarse inmediatamente después de agregar el líquido de trabajo. La semivida de la señal óptica es de unos 5 minutos.

Componentes del producto:

1. configuración del líquido de trabajo
(1) restaurar todos los componentes a temperatura ambiente.
(2) diluir completamente el componente B (líquido de almacenamiento) con el componente A y preparar un líquido de trabajo de Luciferasa de 0,2 mg / ml, sacudiendo el vórtice para garantizar una mezcla completa.
Nota: el líquido de trabajo de la Luciferasa de luciérnaga no se puede congelar y descongelar repetidamente. si la dosis de un solo experimento es menor, se recomienda empacarlo en un solo uso. A temperatura ambiente, después de la configuración de la solución de trabajo durante 3 horas, la actividad disminuyó en aproximadamente un 10%, y después de 5 horas, la actividad disminuyó en aproximadamente un 25%.
2. detección del valor de Quimioluminiscencia
(1) retire la placa de cultivo celular de la incubadora y incubarla a temperatura ambiente durante 20 minutos para que vuelva a la temperatura ambiente (22 - 25 ° c).
(2) añadir el líquido de trabajo de Luciferasa en volumen con el medio de cultivo a la placa de cultivo y mezclar bien.
(3) incubar a temperatura ambiente durante 5 minutos.
Nota: el tiempo de incubación se puede ajustar adecuadamente con el tipo y el número de células.
(4) lea los valores con un estándar enzimático multifuncional o un quimioluminiscente (parámetros del instrumento: el tiempo de determinación es de 10 s y el intervalo de determinación es de 2 s).

Conservar a - 80 ℃. El componente B se recomienda configurar con agua estéril como almacenamiento de 2 mg / ml, el componente A y el componente B como almacenamiento de acuerdo con el experimento.
Se necesita un pequeño embalaje por lotes. Se recomienda que el líquido de trabajo de detección se distribuya ahora para evitar la congelación y descongelación repetidas.

1. antes de usarlo, centrifugar instantáneamente el producto hasta el Fondo del tubo y luego realizar experimentos posteriores.
2. la longitud de onda fuerte de Zui de bioluminiscencia catalizada por la Luciferasa de luciérnagas es de 560 nm.
3. para evitar la interferencia entre los agujeros, se recomienda usar una placa de agujero blanca hermética.

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