Medio de cultivo especial para células Sv - huc - 1

SV-HUC-1Medio de cultivo específico para células

Presentación del producto

SV-HUC-1El medio de cultivo celular está compuesto porEl equipo está cuidadosamente optimizado y después de pruebas a largo plazo, este producto se puede mantener.Las células Sv - huc - 1 tienen un excelente estado de crecimiento.

Este producto ya está incluidoLos diversos ingredientes necesarios para el crecimiento de las células Sv - huc - 1, sin necesidad de añadir ningún ingrediente, se pueden utilizar directamente en el cultivo de células Sv - huc - 1.

Los principales ingredientes del producto

Medio básico f12k 445 ml

Suero bovino fetal especial de 50 ml

Transporte y conservación

Transporte: transporte a temperatura media y baja en cajas térmicas que contienen bolsas de hielo biológicas

Método de conservación: 2 ℃ ~ 8 ℃, evitar la luz, conservar durante 2 meses; ׏

Precauciones

Solo para investigación científica.

Algunos de los componentes del sistema de cultivo son sustancias nocivas para la salud humana. no toque el interior del recipiente con el líquido del sistema de cultivo y el líquido residual del sistema de cultivo con la piel expuesta; La concentración y la nocividad de esta parte de las sustancias nocivas son bajas, y en caso de contacto, se puede lavar inmediatamente con agua del grifo.

Recuperación

1) calentar el agua en la olla de baño de agua a temperatura constante a 37 ° c;

2) preparar un tubo centrífuga de 15 ml, añadir 5 ml de medio de cultivo que contenga 10% de FBS y precalentarlo en una olla de baño de agua a 37 ° c;

3) después de ponerse gafas protectoras y guantes de lana gruesa, retire las células que deben recuperarse del tanque de nitrógeno líquido y transfiera a una olla de baño de agua a temperatura constante de 37 ° C lo antes posible.

La recuperación de la temperatura sacude el congelador para aumentar la tasa de recuperación de la temperatura;

4) inhalar las células del criodepósito derretido en un tubo centrífuga preparado de antemano, mezclar bien y centrifugar 1000 RPM durante 5 minutos;

5) preparar un frasco de cultivo T - 25, escribir el nombre y la fecha de la célula, y luego agregar 4 ml de medio de cultivo;

6) desechar el sobrenadante después de completar la centrifugación, suspender las células con un medio de cultivo de 1 ml, transferirlas al cultivo de células T - 25, mezclar bien y transferirlas

Se cultiva en una incubadora de CO2 y se deja reposar.

Transmisión (se recomienda la transmisión celular de una a dos)

1) cuando el grado de confluencia celular alcanza más del 85%, se puede transmitir.

2) en el Gabinete de bioseguridad, abra la boca del frasco de cultivo y recoja el medio de cultivo en el frasco;

3) después de agregar 3 ml de 1 × PBS estéril al frasco de cultivo, coloque el frasco de cultivo horizontalmente para que el PBS pueda infiltrarse en todas las áreas de la superficie inferior del frasco de cultivo y descartar el pbs;

4) añadir 1 ml de líquido digestivo al frasco, infiltrar el Fondo y colocarlo en una incubadora de CO2 a 37 ° C para incubar durante 1 a 2 minutos;

5) después de la incubación, observar si las células se vuelven redondas y flotan bajo un microscopio invertido, y si se digieren todas, añadir directamente 2 ml de medio de cultivo que contiene 10% de FBS al frasco de cultivo, e inhalar la suspensión en un tubo centrífuga de 15 ml;

① preparar un tubo centrífuga estéril de 15 ML y añadir 2 ml de medio de cultivo que contenga 10% fbs;

② neutralizar las células digeridas en el tubo centrífuga en ① (evitar soplar ③); Agregue 1 ML al frasco de cultivo digerido anteriormente para continuar digiriendo durante unos 2 minutos, golpee suavemente el frasco de cultivo y retire alrededor del 95% de las células.

6) centrifugación de 1000 RPM durante 5 min;

7) preparar dos nuevos frascos de cultivo T - 25, cada uno con un medio de cultivo de 4 ML.

8) después de la finalización de la centrifugación, abandone la parte superior, vuelva a colgar las células centrifugadoras con un medio de cultivo de 2 ml, y transfiera las células después de la suspensión pesada a 2 frascos de cultivo T - 25, 1 ML cada uno;

9) coloque el frasco de cultivo horizontalmente, después de mezclar bien la conmoción, coloque el frasco de cultivo a 37 ° C y deje el cultivo en una incubadora de CO2 al 5%.

Criopreservación (criopreservación celular se recomienda congelar una por botella t25)

1) a 6) refiérase a los pasos de transmisión

7) después de la finalización de la centrifugación, se abandona el sobrenadante, se suspenden las células con 1 ml de liofilización para precipitar y luego se transfieren al criodepósito de 1,8 ml;

8) transferir el tubo de almacenamiento congelado a la Caja de enfriamiento del programa llena de alcohol isopropílico, y luego transferirlo al refrigerador de - 80 ℃ para enfriarse durante la noche;

9) al día siguiente, retire el tubo de almacenamiento congelado de la Caja de enfriamiento secuencial completada por el enfriamiento y transfiera al tanque de nitrógeno líquido para su conservación lo antes posible.

Il de cobaya8 (IL8)Kit, nombre en inglés:Kit ELISA IL8

Kit de ELISA de proteína inducible de ierféron humano 10 (IP-10/CXCL10)Proteína inducida por Interferón humano10 (ip - 10 / cxcl 10)Kit

conejo factor de crecimiento nervioso, NGFELISAKitFactor de crecimiento nervioso de conejo(NGF) pcrEmbalaje de kits de prueba

Haga clic en aztelisakitRatas

Nematodos(ENU)Kit de mutación inducida10vez

Conejo Apolipoproteína E, Apo-EELISAKitApolipoproteína de conejoE(Apo-E)Especificaciones del kit:96T/48T

Integrina humanaAlfa Theta 8548; beta3(Iegrin)Alfa Theta 8548; beta3) ELISAKit

Kit de ELISA del factor alfa de necrosis tumoral humana (TNF-alfa)Factor de necrosis tumoral humana alfa(TNF-α(...)Kit

Humanalfa-L-fucosidasa, AFUELISAKitAlfa humanoLFucosidasa(AFU) pcrEmbalaje de kits de prueba

Cadena de unión de inmunoglobulina humana, Ig-jKitjCadena(Ig-j)Especificaciones del kit:96T/48T

Matriz tisular proteasa metálica(MMP-13)Kit cuantitativo de fluorescencia activa20vez(10Muestra(...)

LeucocitagenoC humano, HLA-CELISAKitAntígeno leucocitario humanoC(HLA-C)Especificaciones del kit:96T/48T

Factor positivo y auxiliar humano4 (PC4)Kit de inmunoabsorción enzimáticaKit de ELISA de PC4 humano (Cofactor 4 positivo)

Asociación de apolipoproteínas humanas0LipasaA2 (lppla 2)Kit de inmunoabsorción enzimáticaKit de ELISA de LpPLA2 humana (fosfolipasa A2, lipoproteína asociada)

LPL humana(LPL)Kit de inmunoabsorción enzimáticaKit de ELISA de LPL humana (lipoproteína lipasa)

Proteína de unión a LPS humana(LBP)Kit de inmunoabsorción enzimáticaKit de ELISA de LBP humana (proteína de unión a lipopolisacáridos)

Anticuerpos homólogas específicos de la hipófisis

Proteína de tubo lineal de desplazamiento visceralCFC1Anticuerpos proteicos

IL18R1Ratas recombinantesIL18R1Proteína(FcetiquetaProteína

GSK-3 Alfa (Glicogeno Sintasa Kinasa-3 alfa 0,5mgGSK-3 Alfa (Glicogeno Sintasa Kinasa-3 alfa)Quinasa de síntesis de glucosa-3Antígeno alfa(Antígeno polipéptidos(...)

CAMKVReorganizadorCAMKVProteína(Su & GSTetiquetaProteína

ING5 Proteína humanaReorganizadorING5Proteína(GST)etiqueta(...)

Ratón Proteína EREGpesadode

SV-HUC-1Medio de cultivo específico para célulasGSK-3 Alfa (Glicogeno Sintasa Kinasa-3 alfa 0,5mgGSK-3 Alfa (Glicogeno Sintasa Kinasa-3 alfa)Quinasa de síntesis de glucosa-3Antígeno alfa(Antígeno polipéptidos(...)

ING5 Proteína humanaReorganizadorING5Proteína(GST)etiqueta(...)

IL18R1Ratas recombinantesIL18R1Proteína(FcetiquetaProteína

Ratón Proteína EREGRatones recombinantesEpiregulina / EREGProteína(Fcetiqueta(...)

CAMKVReorganizadorCAMKVProteína(Su & GSTetiquetaProteína

‌ operación estéril:El Cultivo celular debe llevarse a cabo en un ambiente estéril, la Mesa de trabajo ultralimpia debe ser esterilizada con radiación ultravioleta antes de su uso y la Caja de cultivo debe limpiarse regularmente. Los experimentadores deben cambiar su ropa de trabajo, fundas de zapatos y usar máscaras y guantes.

Esterilización de equipos:La cristalería, los instrumentos metálicos, etc. se pueden esterilizar a vapor a alta presión, mientras que los productos plásticos eligen principalmente la esterilización por óxido de etileno o la compra de productos esterilizados.

Selección de reactivos:Los reactivos utilizados, como el medio de cultivo, el suero y el amortiguador, deben ser estériles y libres de contaminación, y las pruebas estériles deben realizarse antes de su uso. Diferentes células tienen diferentes requisitos para la composición del medio de cultivo, y el medio de cultivo adecuado debe seleccionarse de acuerdo con el tipo de célula.

‌ condiciones de cultivo:La temperatura adecuada para el cultivo de la mayoría de las células de mamíferos es de 37 ° c, y la desviación debe controlarse en ± 0,5 ° c. La incubadora debe mantenerse bien sellada, comprobar regularmente la concentración y el flujo de gas, y el Cultivo celular generalmente requiere un 5% de CO2 para mantener el pH estable del medio. La humedad en la incubadora debe mantenerse en torno al 95%.

¿‌ sí?Observación diaria:La morfología celular, el Estado de crecimiento y los cambios de color del medio de cultivo se observaron bajo un microscopio todos los días.

Pruebas periódicas:Las células se someten regularmente a pruebas de contaminación por micoplasma, bacterias, hongos, etc.