Medio de cultivo especial para células E14

‌ operación estéril:El Cultivo celular debe llevarse a cabo en un ambiente estéril, la Mesa de trabajo ultralimpia debe ser esterilizada con radiación ultravioleta antes de su uso y la Caja de cultivo debe limpiarse regularmente. Los experimentadores deben cambiar su ropa de trabajo, fundas de zapatos y usar máscaras y guantes.

Esterilización de equipos:La cristalería, los instrumentos metálicos, etc. se pueden esterilizar a vapor a alta presión, mientras que los productos plásticos eligen principalmente la esterilización por óxido de etileno o la compra de productos esterilizados.

Selección de reactivos:Los reactivos utilizados, como el medio de cultivo, el suero y el amortiguador, deben ser estériles y libres de contaminación, y las pruebas estériles deben realizarse antes de su uso. Diferentes células tienen diferentes requisitos para la composición del medio de cultivo, y el medio de cultivo adecuado debe seleccionarse de acuerdo con el tipo de célula.

‌ condiciones de cultivo:La temperatura adecuada para el cultivo de la mayoría de las células de mamíferos es de 37 ° c, y la desviación debe controlarse en ± 0,5 ° c. La incubadora debe mantenerse bien sellada, comprobar regularmente la concentración y el flujo de gas, y el Cultivo celular generalmente requiere un 5% de CO2 para mantener el pH estable del medio. La humedad en la incubadora debe mantenerse en torno al 95%.

¿‌ sí?Observación diaria:La morfología celular, el Estado de crecimiento y los cambios de color del medio de cultivo se observaron bajo un microscopio todos los días.

Pruebas periódicas:Las células se someten regularmente a pruebas de contaminación por micoplasma, bacterias, hongos, etc.

E14Medio de cultivo específico para células

Presentación del producto

E14El medio de cultivo celular está compuesto porEl equipo está cuidadosamente optimizado y después de pruebas a largo plazo, este producto se puede mantener.Las células E14 tienen un excelente estado de crecimiento.

Este producto ya está incluido Los diversos ingredientes necesarios para el crecimiento de las células e14, sin necesidad de añadir ningún ingrediente, se pueden utilizar directamente en el cultivo de células e14.

Los principales ingredientes del producto

Medio básico dmem 405 ml

Suero bovino fetal especial 75 ml

Transporte y conservación

Transporte: transporte a temperatura media y baja en cajas térmicas que contienen bolsas de hielo biológicas

Método de conservación: 2 ℃ ~ 8 ℃, evitar la luz, conservar durante 2 meses; ׏

Tenga en cuenta que solo se utiliza para la investigación científica.

Algunos de los componentes del sistema de cultivo son sustancias nocivas para la salud humana. no toque el interior del recipiente con el líquido del sistema de cultivo y el líquido residual del sistema de cultivo con la piel expuesta; La concentración y la nocividad de esta parte de las sustancias nocivas son bajas, y en caso de contacto, se puede lavar inmediatamente con agua del grifo.

Recuperación

1) calentar el agua en la olla de baño de agua a temperatura constante a 37 ° c;

2) preparar un tubo centrífuga de 15 ml, añadir 5 ml de medio de cultivo que contenga 10% de FBS y precalentarlo en una olla de baño de agua a 37 ° c;

3) después de ponerse gafas protectoras y guantes de lana gruesa, retire las células que deben recuperarse del tanque de nitrógeno líquido y transfiera a una olla de baño de agua a temperatura constante de 37 ° C lo antes posible.

La recuperación de la temperatura sacude el congelador para aumentar la tasa de recuperación de la temperatura;

4) inhalar las células del criodepósito derretido en un tubo centrífuga preparado de antemano, mezclar bien y centrifugar 1000 RPM durante 5 minutos;

5) preparar un frasco de cultivo T - 25, escribir el nombre y la fecha de la célula, y luego agregar 4 ml de medio de cultivo;

6) desechar el sobrenadante después de completar la centrifugación, suspender las células con un medio de cultivo de 1 ml, transferirlas al cultivo de células T - 25, mezclar bien y transferirlas

Se cultiva en una incubadora de CO2 y se deja reposar.

Transmisión (se recomienda la transmisión celular de una a dos)

1) cuando el grado de confluencia celular alcanza más del 85%, se puede transmitir.

2) en el Gabinete de bioseguridad, abra la boca del frasco de cultivo y recoja el medio de cultivo en el frasco;

3) después de agregar 3 ml de 1 × PBS estéril al frasco de cultivo, coloque el frasco de cultivo horizontalmente para que el PBS pueda infiltrarse en todas las áreas de la superficie inferior del frasco de cultivo y descartar el pbs;

4) añadir 1 ml de líquido digestivo al frasco, infiltrar el Fondo y colocarlo en una incubadora de CO2 a 37 ° C para incubar durante 1 a 2 minutos;

5) después de la incubación, observar si las células se vuelven redondas y flotan bajo un microscopio invertido, y si se digieren todas, añadir directamente 2 ml de medio de cultivo que contiene 10% de FBS al frasco de cultivo, e inhalar la suspensión en un tubo centrífuga de 15 ml;

① preparar un tubo centrífuga estéril de 15 ML y añadir 2 ml de medio de cultivo que contenga 10% fbs;

② neutralizar las células digeridas en el tubo centrífuga en ① (evitar soplar ③); Agregue 1 ML al frasco de cultivo digerido anteriormente para continuar digiriendo durante unos 2 minutos, golpee suavemente el frasco de cultivo y retire alrededor del 95% de las células.

6) centrifugación de 1000 RPM durante 5 min;

7) preparar dos nuevos frascos de cultivo T - 25, cada uno con un medio de cultivo de 4 ML.

8) después de la finalización de la centrifugación, abandone la parte superior, vuelva a colgar las células centrifugadoras con un medio de cultivo de 2 ml, y transfiera las células después de la suspensión pesada a 2 frascos de cultivo T - 25, 1 ML cada uno;

9) coloque el frasco de cultivo horizontalmente, después de mezclar bien la conmoción, coloque el frasco de cultivo a 37 ° C y deje el cultivo en una incubadora de CO2 al 5%.

Criopreservación (criopreservación celular se recomienda congelar una por botella t25)

1) a 6) refiérase a los pasos de transmisión

7) después de la finalización de la centrifugación, se abandona el sobrenadante, se suspenden las células con 1 ml de liofilización para precipitar y luego se transfieren al criodepósito de 1,8 ml;

8) transferir el tubo de almacenamiento congelado a la Caja de enfriamiento del programa llena de alcohol isopropílico, y luego transferirlo al refrigerador de - 80 ℃ para enfriarse durante la noche;

9) al día siguiente, retire el tubo de almacenamiento congelado de la Caja de enfriamiento secuencial completada por el enfriamiento y transfiera al tanque de nitrógeno líquido para su conservación lo antes posible.

Proteína reguladora de la trombosis porcinaELISA (TM)Kit

Kit de ELISA de miosina humana (Myosin)Miosina humana(Miosina)Kit

Conejo protrombinfragme1+2, F1+2ELISAKitFragmento original de conejoF1+2(F1+2)Embalaje del kit

CLIAKitforAi-TMAnticuerpos de Microsoma tiroideo(TM)Anticuerpos(...)

血小板因子4 (Factor de PlaquetasIV)Kit cuantitativo de fluorescencia activa20vez

Molécula de adhesión celular porcina2, ICAM-2ELISAKitMoléculas de adhesión intercellular porcina2 (ICAM-2/CD102)Kit

Glutamina sintasa de rata(GLUL)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA GLUL

Kit de ELISA de ierleucina de conejo 8 (IL-8/CXCL8)Conejo il8 (IL-8/CXCL8)Kit

Escherichia coli(O157:H7)Kit de ácido nucleico(PCR-Método de sonda fluorescente) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(Macrófago HumanoProteína Inflamatoria-1Beta)ELISAkitProteína macrófaga humana1β

Virus cosaki humoralB(Coxsackievirus B)CuantificaciónPCRKit amplificado20vez

Elizabeth 5 nochesPerros5Serotonina

Apolipoproteína porcinaB()Apo-B) montaje de kits/.Original

Apolipoproteína porcinaA1 (apo-A1)Montaje de kits/.Original

Embarazo porcino..PROG) montaje de kits/.Original

Progesterona porcina..P) montaje de kits/.Original

5 -Receptor de Inositol trifosfato1Anticuerpos

CiclamatoD2Anticuerpos

IL1R2Ratas recombinantesIL1R2 / IL1RB / CD121bProteína(SuetiquetaProteína

GRP94 (gp96) 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProteína reguladora del azúcar(Antígenos(...)

ANP32AReorganizadorANP32A / PHAP1Proteína(Su & GSTetiquetaProteína

BLOC1S2 Proteína humanaReorganizadorBLOC1S2 / BLOS2Proteína(GST)etiqueta(...)

Ratón de proteína PGLYRP1Ratones recombinantesPGLYRP1 / PGRP-SProteína(Sude

E14Medio de cultivo específico para célulasGRP94 (gp96) 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProteína reguladora del azúcar(Antígenos(...)

BLOC1S2 Proteína humanaReorganizadorBLOC1S2 / BLOS2Proteína(GST)etiqueta(...)

IL1R2Ratas recombinantesIL1R2 / IL1RB / CD121bProteína(SuetiquetaProteína

Ratón de proteína PGLYRP1Ratones recombinantesPGLYRP1 / PGRP-SProteína(Suetiqueta(...)

ANP32AReorganizadorANP32A / PHAP1Proteína(Su & GSTetiquetaProteína