Kit de purificación limpia de ARN rnaclean

PCR¿¿ qué reactivos y equipos se necesitan para la reacción?

Reactivos:
plantillaADN:PCRLa respuesta requiere una plantillaADNComo la extracción de células, tejidos, sangreADNEtc.; Primer:PCRLos dos primeros de la reacción, respectivamente, con la plantillaADNLos Primers también se pueden sintetizar en regiones específicas necesarias para la amplificación emparejada en ambos extremos.TALos primeros utilizados en el proceso de clonación, etc.;dNTP:PCRSe necesitan cuatro tipos de reaccionesdNTP, incluido el ácido DesoxiadenilatodATP), ácido desoxitimidinadCTP), ácido desoxiguanídicodGTP), desoxiciclinadTTP), para la División celular,ADNProcesos biológicos como la síntesis paraPCRPlantilla amplificadaADNExtensión y amplificación de la cadena;ADN de TaqPolimerasa:PCRPolimerasa necesaria para la reacción, uso generalTaqPolimerasa, y algunos otros tipos de polimerasa comoPFU,FusiónEtc., para amplificaciónADNCadena;Tampón de PCRSolución: síPCRLa reacción tiene un efecto amortiguador y regula la reacción.El pH, tiosulfato de hidrógenoSDSLos compuestos orgánicos de moléculas pequeñas, como el formaldehído, pueden aumentarPCREspecificidad de la respuesta, mejorando así la eficiencia de la respuesta; Sistema de enzima:PCRLa amplificación a menudo implica pasos experimentales como recombinación, construcción y secuenciación, y a menudo requiere operaciones de enzima.MARCA:Un estándar de peso molecular para distinguirADNUna herramienta del tamaño de un fragmento.ADNKit de purificación: para purificaciónPCRProductos de reacción;
Equipo:
PCRMedidor: para controlar la temperatura de reacción, garantizarPCRControl estricto de los diferentes enlaces de temperatura durante la reacción; Tanque de electrolisis: para la SeparaciónPCRProductos amplificados; Extractor de ácido nucleico: extracción totalmente automática de ácido nucleico de muestras de tejido. Estos reactivos y equipos estánPCREn la tecnología de biología molecular, solo se puede llevar a cabo sobre una base ordenada y completa.PCRReaccionar y obtener resultados precisos.

¡¡ los productos de la compañía son solo para investigación científica y no se pueden utilizar para diagnóstico clínico!

PCRExperimentos básicos relacionados:

PCRLos pasos básicos de la reacción, la reacción en cadena de la polimerasa en general, consiste en20a35Cada ciclo consta de los siguientes ciclos:3Pasos:

I. transexualidad:

Aprovechar las altas temperaturas..93-98℃) hacer doble cadenaADNSeparación. Las altas temperaturas conectarán dosADNEl enlace de hidrógeno de la cadena se rompe. Antes del primer ciclo, por lo general se calienta durante más tiempo para garantizar la separación de la plantilla y el primer, y solo existe en forma de cadena única. Tiempo del paso1 - 2Min, siguientePCREl medidor controla la temperatura y entra en la etapa de ciclo.

II. recocido o unión,Reproducción:

EnADNDespués de la separación de la doble cadena, la temperatura se reduce para que el primer pueda unirse a la única cadena.ADNArriba. La temperatura en esta etapa suele estar por debajo del punto de fusión del primer5℃. La temperatura de recocido incorrecta puede hacer que el primer no se adhiera a la plantilla o se adhiera erróneamente. Tiempo del paso1 - 2Min.

3. extensión:

ADNLa polimerasa comienza por los Primers Unidos al enfriarseADNLa cadena sintetiza cadenas complementarias. La temperatura en esta etapa depende deADNPolimerasa. El tiempo de paso depende de la polimerasa y de la necesidad de sintetizarADNLongitud del fragmento. TradicionalTaqSíntesis estimada1000bp / min, más nuevoTbr(de bacterias termofílicasBrucelosis) aproximadamente40Segundos, la polimerasa de fusión producida por empresas comerciales solo necesita aproximadamente10 - 15Segundos.

Productos que la compañía está vendiendo:Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el virus de la hepatitis del pato mediante sonda universalVirus de la hepatitis del pato (DHV)

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda del virus de la peste del patoVirus de la peste del pato (DPV)

Kit de PCR cuantitativo fluorescente del método de sonda universal de E. coli (incluyendo patogenicidad y no patogenicidad)E. coli

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de echinococcus de grano finoEchinococcus granulosus

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda universal de echinococcusEchinococcus spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de edouardia bagreEdwardsiella ictaluri

Kit de PCR cuantitativo fluorescente por sonda universal de EdwardEdwardsiella spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda Edward lentoEdwardsiella tarda

RT - 1976 (rt - 76) kit de PCR cuantitativo fluorescente para el virus del síndrome de gallinas ponedoras RT - 1976Virus del síndrome de la gota de huevo-1976(EDSV-76)-1976

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de Ericsson canino (ericsson canino)Ehrlichia canis

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de la sonda de chaffellicinia (chaffellicinia)Ehrlichia chaffeensis

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda Ferguson Ericsson (ferguson ericsson)Ehrlichia fergusonii

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la detección de aguja de EricssonEhrlichia risticii

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de Ericsson (ericsson rumiant)Ehrlichia ruminantium

Kit de PCR cuantitativo fluorescente de sonda universal para el género Ericsson (ericsson)Ai.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de eikonia roedoraEikenella corrodens

Kit de PCR cuantitativo fluorescente por sonda universal del género eimeriaEimeria spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de nematodos del aceite de SchneiderElaeophora schneideri

Kit de PCR cuantitativo fluorescente por método de sonda de micromicron imonEmmonsia parva

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para protozoos intracelulares del cerebroEncephalitozoon spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de Entamoeba histolíticaEntamoeba histolytica

Kit de PCR cuantitativo fluorescente de la sonda universal de EntamoebaEntamoeba spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para Adenovirus intestinal tipo 41Adenovirus entérico41

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de E. coli invasiva intestinalE.coli invasivo (EIEC)

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de E. coli de adhesión intestinalE.Coli enteroadhesivo (EAEC)

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de Enterobacter aerogénicoAerogenes de enterobacterias

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de Enterobacter cloacaeEnterobacter cloacae

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de Enterobacter SakazakiEnterobacter sakazaki

Kit de PCR cuantitativo fluorescente de sonda universal de EnterobacterEnterobacter spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de enterococcus flavus de plomoEl Enterococcus casseliflavus

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de enterococos duraderosEnterococcus durans

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de enterococos fecalesEnterococcus faecalis

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para la sonda de enterococcus faeciumEnterococcus faecium

Kit de PCR cuantitativo fluorescente de sonda universal de enterococcusEnterococcus spp.

Kit de PCR cuantitativo fluorescente por método de sonda de microsporia intestinal de biestrellaEnterocytozoon bieneusi

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda de microsocitos hepatointestinales de camaronesEnterocitozoon hepatopenei (EHP)

Kit de PCR cuantitativo fluorescente para el método de sonda serotipo o104: H4 de E. coli hemorrágica intestinalE. coli enterohemorrágica (EHEC)

PCROptimización de las condiciones de reacción:

1, temperatura y tiempo de desnaturalización:

Plantilla de garantíaADNResolver la cadena es garantizar todoPCRLa clave del éxito de la amplificación. calentar90~95°C, 30~60sNo importa lo complicado que seaADNLas moléculas también pueden transformarse en cadenas únicas. La temperatura es demasiado alta o la duración de la alta temperatura es demasiado larga, lo que puedeTaqActividad enzimática ydNTPLas moléculas causan daños.

2, temperatura y tiempo de renacer:

PCRLa especificidad de la amplificación depende de la Unión del primer a la plantilla durante el proceso de renaturalización. Cuanto mayor sea la temperatura de renaturación, mayor será la especificidad del producto. Cuanto menor sea la temperatura de renaturación, menor será la especificidad del producto. Debe basarse en el primerTmEl valor se establece específicamente.

3, temperatura y tiempo de extensión:

Por lo general, se encuentra enTaqTemperatura de acción óptima de la enzima70~75°CEntre. El primer es menor que16Cuando se trata de nucleótidos, la temperatura de extensión demasiado alta no es propicia para la Unión de los primeros con la plantilla y se puede calentar lentamente hasta70~75°C. El tiempo de reacción extendido, que puede depender de la longitud del fragmento a amplificar, es menor que1kb, 1minSuficiente; Mayor que1 KbSe necesita una extensión más larga.TaqLa enzima puede basarse en1 kb/minAumentar el tiempo. Aquí hay que tener en cuenta que la extensión excesiva puede producir amplificación no específica. Por lo tanto, es necesario establecer el tiempo de extensión adecuado.

4, número de ciclos:

Después de seleccionar otros parámetros,PCREl número de ciclos depende principalmente de la plantillaADNConcentración. En teoría20¿¿ qué?25Después del segundo ciclo,PCRLa acumulación de productos puede alcanzar el valor máximo, y en la práctica, debido a la tasa de producción de cada paso de reacción, es imposible alcanzar.100%Por lo tanto, independientemente de la concentración de la plantilla,20 a 30El segundo es un número razonable de ciclos. Cuanto mayor sea el número de ciclos, mayor será la amplificación no específica.