Kit de inmunoanálisis enzimático de la sintasa de dimanadiol vegetal (ds)

Kit de inmunoanálisis enzimático de la sintasa de dimanadiol vegetal (ds)Este Kit es solo para investigación.

Alcance de la prueba: 96T

4.5U / L -180U / L

Propósito de uso:

Este kit se utiliza para la determinación de la gamma - glicol sintasa en tejidos vegetales, sobrenadantes celulares y muestras líquidas relacionadas.DS(...)Actividad.

BS - 258251 - a planta dama diol sintasa (ds) kit de prueba Elisa 96t

Kit de prueba Elisa BS - 258251 - B para la enzima dimanadiol sintasa vegetal (ds) 48t

Principios experimentales

Este kit se determina mediante el método de sándwich de doble anticuerpo.EspécimencentroPlanta dama diol sintasaDS(...)Nivel. Con purificadoPlanta dama diol sintasaDS(...)El paquete de anticuerpos se envuelve en microporos para hacer anticuerpos sólidos, que se añaden a los microporos del paquete de anticuerpos monoclonales a su vez.Dimaladiol sintasa..DS(...)，Reencuentro conHRPMarcadoDimaladiol sintasa..DS(...)Unión de anticuerpos, formación de anticuerpos-Antígenos-Complejo de anticuerpos marcado por enzimasDespués del lavadomásSustratoTMBColor.TMBEnHRPSe convierte en azul bajo la catálisis de la enzima y en amarillo final bajo la acción del ácido. Color claro y en la muestraDimaladiol sintasa..DS(...)Correlación positiva. Con un medidor de enzima450nmDeterminación de la absorción a la longitud de ondaODValor,A través de la curva estándarCalcular la muestraPlanta media dama diol sintasaDS) ActividadConcentración.

Composición del kit

Requisitos para especímenes

1. después de la recolección de los especímenes, la extracción se realiza lo antes posible, la extracción se realiza de acuerdo con la literatura relevante, y después de la extracción, el experimento debe llevarse a cabo lo antes posible. Si no se puede realizar la prueba de inmediato, se puedeColocar el espécimen en-20Grados Celsius conservados, peroDeberíaEvitar la congelación y descongelación repetidas

2. no se pueden detectar muestras que contengan nan3, debidoNaN3Inhibición de la peroxidasa de rábano picante..HRP) actividad.

pasos de operación

1. Dilución del estándar: este Kit proporciona un estándar original, y el usuario puede diluirlo en un tubo de ensayo pequeño de acuerdo con el siguiente gráfico.

2. Añadir muestras: se establecen agujeros en blanco (los agujeros de control en blanco no agregan muestras y reactivos estándar enzimáticos, y el resto de los pasos se operan de la misma manera), agujeros estándar,Agujeros de muestra a medir. añadir muestras precisas de los productos estándar en la placa de cubierta del paquete enzimático50μl，Añadir diluyente de muestra al agujero de la muestra a medir40μlY luego agregue la muestra a medir10μl(la dilución final de la muestra es5Veces).Añadir la muestra a la parte inferior del agujero de la placa estándar de la enzima y tratar de no tocar la pared del agujero,SuaveTemblarMezclar bien.

3. Wen yu: detrás de la placa de sellado con película de placa de sellado37Temperatura Celsius 30minuto.

4. Distribución de líquidos: se30Agua destilada para lavado concentrado de doble30Doble diluido para repuesto

5. Lavado: retire cuidadosamente la película de sellado y abandone el líquido,Tirar seco, llene cada agujero con detergente y deje reposar30Abandona después de segundos, repite así5Dos veces, palmaditas secas.

6. Adición de enzimas: añadir reactivos estándar de enzimas a cada agujero50μlExcepto agujeros en blanco.

7. Wen yu: la misma operación3.

8. Lavado: la misma operación5.

9. Color: añadir el agente de color primero a cada agujeroA50μl, y luego agregue el agente de colorB50μl, agitar suavemente y mezclar bien,37Grados Celsius para evitar la luz y el color durante 10 minutos.

10. Terminación: cada agujero más terminaciónLíquido50 μl, terminar la reacción(en este momento, el azul se pone de pie y se vuelve amarillo).

11. Determinación: ajustar a cero con agujeros en blanco,450nmLa longitud de onda se mide secuencialmente en cada agujero.Absorción de luzGradosODValor). La determinación debe hacerse después de agregar el líquido de terminación.15Se llevará a cabo en menos de minutos.

Kit de inmunoanálisis enzimático de la sintasa de dimanadiol vegetal (ds)Resumen del procedimiento operativo:

calcular

Tomando la concentración del estándar como coordenadas horizontales,ODEl valor es una coordenada vertical, dibujando la curva estándar en el papel de coordenada, de acuerdo con laODEl valor es detectado por la curva estándar para la concentración correspondiente; Multiplicar de nuevoMúltiplo de dilución; o la concentración con el estándar yODValor para calcular la ecuación de regresión lineal de la curva estándar, la muestraODEl valor se sustituye por la ecuación, se calcula la concentración de la muestra y se multiplica porMúltiplo de diluciónEs decir, la concentración real de la muestra.

Precauciones

1. El kit se extrae del ambiente refrigerado y debe equilibrarse a temperatura ambiente15 - 30Se puede usar después de unos minutos. si el paquete estándar enzimático no se agota después de la apertura de la placa, la placa debe cargarse en una bolsa sellada para su conservación.

2.Detergente concentradoposiblehabráCristalizaciónPrecipitación, que se puede calentar y ayudar a la disolución en un baño de agua cuando se diluye, no afecta el resultado al lavarse.

3. El muestreador debe usarse en cada paso de la muestra y su precisión debe corregirse con frecuencia para evitar errores de prueba. Es mejor controlar el tiempo de muestra a la vez.5En minutos, si hay un gran número de especímenes, se recomienda usar pistolas de pelotón para agregar muestras.

4. Por favor, haga la curva estándar al mismo tiempo cada vez que se mida, lo mejor es hacer agujeros compuestos. Si el contenido de la sustancia a medir en la muestra es demasiado alto (muestraODEl valor es mayor que el primer agujero del agujero estándar.ODValor), diluya primero un cierto múltiplo con una dilución de muestra..n(veces) antes de determinar, por favor, último en el cálculoMultiplicar porMúltiplo de dilución total..×n×5).

5. La película de sellado se limita al uso único para evitar la contaminación cruzada.

6. El sustrato debe conservarse protegido de la luz.

7. siga estrictamente el funcionamiento de las instrucciones, y los resultados de la prueba deben basarse en la lectura del medidor de enzima..

8Todas las muestras, detergentes y diversos residuos deben tratarse como contagios.

9. los diferentes componentes del número de lote de este reactivo no se pueden mezclar.

Condiciones de conservación y período de validez

1.Conservación del kit:V;2 - 8℃.

2. período de validez:6Mes