Servicios de tecnología de síntesis y modificación de péptidos

Introducción a la tecnología experimental: la síntesis de péptidos es una síntesis de estado sólido que generalmente se sintetiza desde el extremo c (extremo descarboxilo) hasta el extremo N (extremo amoniacal). En el pasado, la síntesis de péptidos se realizaba en soluciones llamadas síntesis de fase líquida. Desde que Merrifield desarrolló con éxito el método de síntesis de péptidos de fase sólida en 1963, después de mejoras y *, hasta hoy, el método de fase sólida se ha convertido en una tecnología común en la síntesis de péptidos y proteínas, mostrando las ventajas del método clásico de síntesis de fase líquida *, lo que reduce en gran medida la dificultad de purificación de cada paso del producto. En general, la síntesis de péptidos se divide en dos tipos: síntesis de fase sólida y síntesis de péptidos de fase líquida.

Principios de la tecnología experimental:

El sintético de péptidos se basa en la combinación de sólidos como principio de reacción, en un reactor cerrado de vidrio a prueba de explosiones, los aminoácidos se añaden, reaccionan y sintetizan constantemente de acuerdo con el orden conocido (secuencia, generalmente del extremo C - carboxílico al extremo n - aminoácidos), y la operación finalmente obtiene el portador de péptidos. El método de síntesis de fase sólida reduce en gran medida la dificultad de purificar cada paso del producto. Para evitar la aparición de efectos secundarios, las cadenas laterales de los aminoácidos que participan en la reacción están protegidas. El extremo carboxílico está libre y debe activarse antes de la reacción.

Proceso de operación experimental:

1. desprotección: las columnas y monómeros protegidos por fmoc deben eliminar los grupos protectores de los grupos aminérgicos con - disolvente alcalino (piperidina).

2. activación y enlace cruzado: el Grupo carboxílico del siguiente aminoácido es activado por un activado. Los monómeros activados se entrecruzan con reacciones Aminas libres para formar péptidos

Clave. Este paso utiliza una gran cantidad de reactivos de superconcentración para impulsar la reacción a completarse. Ciclo: estas dos reacciones circulan repetidamente hasta que se completa la síntesis.

3. elución y protección de elución: los polipéptidos se eluden de la columna y sus grupos protectores son eluidos y protegidos por un agente de protección de elución (tfa).

Tipo de modificación del péptido:

1. tecnología de marcado del extremo c:

Amidación C - Terminal

Aldehides, alcohols, PNA (p - nitroanilide)

AMC、AFC、 Cisteamida, éster (ester), n - Alquilación (n - alkyi amide), etc.

2. tecnología de marcado del extremo n:

Acetilado acetylate (acetylate), palmytolyl, hynic, Etiquetado de biotina (biotinilated), acetilado Bru (bromoacetato)

Reacción de chelación (dota, DTPa jugada), formalización, catorce alquilo, succinilación de dieciocho alquilos (myristollate), palmitación, malación, acidificación de grasas, etc. (succinillated)

3. modificación del etiquetado fluorescente:

Modificación del extremo c: afc, amc, DAP (dnp), Lys (dye), pna, rh110

N端修饰: Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-odoacetamido fluoresceína Rodamina 110 y Rodamina B Luciferina, EDANS

FAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamina 101, 5-TAMRA

4. reacción de ciclización:

Anillo de cabeza a cola, anillo de centro, anillo especial (n - > C o cabeza a tail)

2 pares de enlaces de disulfide, 3 pares de enlaces de disulfide (forma S - S bond) péptidos activos de productos naturales en anillos (forma triulida)

5. modificación metilada:

Metilación de la Cadena lateral Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N Metilación terminal (n - Me arg, n - Me - asp, n - Me - glu, n - Me - leu, n - Me - nle, n - Me - nva, n - Me - phe, n - Me - S n -

Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

6. varias modificaciones especiales:

Diversos acoplamientos (bsa, KL H reunidos pepides para la producción antiepidémica), Fosforilación (phosphoserine, phosphotrionine, phosphotrosina), sulfonación (sulfated Tyrosine o serine), Maps (multipelantitatic pepide), modificación Peg (glicopeptides)

Precauciones del experimento:

El cliente ofrece:

1. secuencia, cantidad, pureza y requisitos especiales del Péptido

2. los péptidos liofilizados se pueden conservar a - 20 grados o a temperatura ambiente.

3. el péptido de la solución es mucho más inestable que la forma liofilizada, y la solución debe conservarse a pH neutro (5 - 7) - 20 grados.

4. para evitar la congelación y descongelación repetidas de las muestras,HaoSe divide en pequeñas muestras para almacenarlas.

Criterios de entrega:

Péptidos y datos de taicheng.

Otros:

El primero de la mayoría de los polipéptidosXuanEl disolvente es agua de extracción de gas ultrapura, y el ácido Z delgado o el amoníaco también ayudan a disolver polipéptidos alcalinos o ácidos, respectivamente. Si estos métodos usan polipéptidos que no se han disuelto después, se recomienda disolverlos con dmf, urea, guanidiniam, cloro, acetonitnle

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