Experimento cuantitativo no estándar (label - free)

Experimento cuantitativo no estándar (label - free)

Cuantificación no estándar (label - free)

Cuantificación no estándar (label - fiee): es una técnica proteómica diferencial no marcada que no requiere el uso de marcadores isotópicos para etiquetar segmentos de péptidos y cuantificar relativamente segmentos o proteínas directamente en función de la intensidad de señal de los picos de espectrometría de masas. Label - free analiza los segmentos de péptidos enzimáticos a través de la combinación de líquidos y masas clasificadas por clar. Ahora hay dos técnicas cuantitativas no estándar basadas en la espectrometría de masas: una es la cuantificación de proteínas basada en la intensidad del pico del segmento del péptido relacionado con la espectrometría de masas de primer nivel y el área del pico, y la otra es la cuantificación basada en el número total de espectrometría de masas de segundo nivel (contes espectrales) del segmento del péptido correspondiente a la proteína.

Pasos experimentales

1. tratamiento previo de la proteína, incluida la eliminación del ácido nucleico, la purificación cuantitativa de la proteína, la gel de Poliacrilamida sds;

2. enzima gelatinosa de proteínas;

3. purificación de péptidos; .

4. análisis de espectrometría de masas de la mezcla de péptidos, incluida la identificación de espectrometría de masas y la comparación de información cuantitativa;

5. análisis de la Carta de estudiante

Presentación de los resultados

Ciclo experimental y criterios de entrega

1. ciclo experimental: 4 - 6 semanas

2. criterios de entrega: resultados cuantitativos de proteínas, resultados de identificación, datos brutos de espectrometría de masas, resultados de análisis de shengxin (análisis g0. Análisis kegg, etc.)

Información a confirmar

1. especies y géneros de la muestra

2. tipo de muestra (tejido o células o sangre)

3. número y agrupación de muestras

4. requisitos de análisis

Referencias

[1] HuS, Qiu N, Liu Y, et al. Identificación y estudio proteómico comparativo de la proteína de la blanca de huevo de codorniz y pato utilizando electroforesis en gel bidimensional y espectrometrianálisis de masa tándem de desorción/ionización láser asistida por matriz. Avicultura Ciencia, 2016:pew033.

[2] Bouvet M, Turkieh A, Acosta-Martin A E, et al. Perfil proteómico de macrofagos por electroforesis 2D [J]. Revista

de Experimentos Visualizados, 2014(93).

Servicios experimentales: