Células renales de croaker amarillo grande; PCK

Células renales de croaker amarillo grande; La base PCK está cuidadosamente optimizada por el equipo, y después de pruebas a largo plazo, este producto puede mantener un excelente estado de crecimiento de los macrófagos pulmonares primarios de las ratas.

Este producto ya contiene varios ingredientes necesarios para el crecimiento de los macrófagos pulmonares primarios de las ratas, sin agregar ningún ingrediente, y se puede utilizar directamente para el cultivo de macrófagos pulmonares primarios de las ratas.

Precauciones

Solo para investigación científica.

Algunos de los componentes del sistema de cultivo son sustancias nocivas para la salud humana. no toque el interior del recipiente con el líquido del sistema de cultivo y el líquido residual del sistema de cultivo con la piel expuesta; La concentración y la nocividad de esta parte de las sustancias nocivas son bajas, y en caso de contacto, se puede lavar inmediatamente con agua del grifo.

Recuperación

1) calentar el agua en la olla de baño de agua a temperatura constante a 37 ° c;

2) preparar un tubo centrífuga de 15 ml, añadir 5 ml de medio de cultivo que contenga 10% de FBS y precalentarlo en una olla de baño de agua a 37 ° c;

3) después de ponerse gafas protectoras y guantes de lana gruesa, retire las células que deben recuperarse del tanque de nitrógeno líquido y transfiera a una olla de baño de agua a temperatura constante de 37 ° C lo antes posible.

La recuperación de la temperatura sacude el congelador para aumentar la tasa de recuperación de la temperatura;

4) inhalar las células del criodepósito derretido en un tubo centrífuga preparado de antemano, mezclar bien y centrifugar 1000 RPM durante 5 minutos;

5) preparar un frasco de cultivo T - 25, escribir el nombre y la fecha de la célula, y luego agregar 4 ml de medio de cultivo;

6) desechar el sobrenadante después de completar la centrifugación, suspender las células con un medio de cultivo de 1 ml, transferirlas al cultivo de células T - 25, mezclar bien y transferirlas

Se cultiva en una incubadora de CO2 y se deja reposar.

Transmisión (se recomienda la transmisión celular de una a dos)

1) cuando el grado de confluencia celular alcanza más del 85%, se puede transmitir.

2) en el Gabinete de bioseguridad, abra la boca del frasco de cultivo y recoja el medio de cultivo en el frasco;

3) después de agregar 3 ml de 1 × PBS estéril al frasco de cultivo, coloque el frasco de cultivo horizontalmente para que el PBS pueda infiltrarse en todas las áreas de la superficie inferior del frasco de cultivo y descartar el pbs;

4) añadir 1 ml de líquido digestivo al frasco, infiltrar el Fondo y colocarlo en una incubadora de CO2 a 37 ° C para incubar durante 1 a 2 minutos;

5) después de la incubación, observar si las células se vuelven redondas y flotan bajo un microscopio invertido, y si se digieren todas, añadir directamente 2 ml de medio de cultivo que contiene 10% de FBS al frasco de cultivo, e inhalar la suspensión en un tubo centrífuga de 15 ml;

① preparar un tubo centrífuga estéril de 15 ML y añadir 2 ml de medio de cultivo que contenga 10% fbs;

② neutralizar las células digeridas en el tubo centrífuga en ① (evitar soplar ③); Agregue 1 ML al frasco de cultivo digerido anteriormente para continuar digiriendo durante unos 2 minutos, golpee suavemente el frasco de cultivo y retire alrededor del 95% de las células.

6) centrifugación de 1000 RPM durante 5 min;

7) preparar dos nuevos frascos de cultivo T - 25, cada uno con un medio de cultivo de 4 ML.

8) después de la finalización de la centrifugación, abandone la parte superior, vuelva a colgar las células centrifugadoras con un medio de cultivo de 2 ml, y transfiera las células después de la suspensión pesada a 2 frascos de cultivo T - 25, 1 ML cada uno;

9) coloque el frasco de cultivo horizontalmente, después de mezclar bien la conmoción, coloque el frasco de cultivo a 37 ° C y deje el cultivo en una incubadora de CO2 al 5%.

Criopreservación (criopreservación celular se recomienda congelar una por botella t25)

1) a 6) refiérase a los pasos de transmisión

7) después de la finalización de la centrifugación, se abandona el sobrenadante, se suspenden las células con 1 ml de liofilización para precipitar y luego se transfieren al criodepósito de 1,8 ml;

8) transferir el tubo de almacenamiento congelado a la Caja de enfriamiento del programa llena de alcohol isopropílico, y luego transferirlo al refrigerador de - 80 ℃ para enfriarse durante la noche;

9) al día siguiente, retire el tubo de almacenamiento congelado de la Caja de enfriamiento secuencial completada por el enfriamiento y transfiera al tanque de nitrógeno líquido para su conservación lo antes posible.

Receptores de productos finales de Glicación avanzada(AGER)Proteína recombinanteReceptor específico del producto final de glicosilación avanzada recombinante (AGER)

EPCAM Proteína humanaReorganizadorEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Proteína

PNR 1ReorganizadorNeuropilina-1 / NRP1Proteína(FcetiquetaProteína

Proteína HA H1N1Gripe a recombinanteH1N1 (A/WSN/1933)HemaglutininaHA1 (Hemaglutinina)Proteína

hacerReorganizadorLALBA / Alfa-lactalbuminaProteína(FcetiquetaProteína

Factor estimulante de colonias de macrófagos de neutrófilos de rata(GMCSF/CSF2)Kit , nombre en inglés:Kit de ELISA GMCSF/CSF2

Kit de ELISA de factor aocrino de queratinocitos de ratón (KAF) / Kit de ELISA de anfiregulina (AR)Factor endocrino de células queratinizadas de ratón(KAF)Kit/.Bimodulina(AR)Kit

Proteínas morfogeneticas de ratón, BMPsELISAKitProteína formadora de hueso de ratón(BMP)Kit96T/48TEmbalaje importado

CLIAKit para paxilina humana, PaxELISAKitProteína de la pila humana

Isótopos[γ32P]ATPKit de amplificación de microsatélites marcado por quinasa20vez

ELISAKitPIAb-IgG/IgMRatas0Anticuerpos contra el ácido lisosínicoIgG / IgM

Kit de transferasa de ratón Kit de transferasa de ratón Especificaciones y modelos:96T/48T Kit de enzima de conversión de ratón, modelo de especificación:96T/48TFuente: kit (embalaje importado), alias del producto: kit de enzima de transferencia de ratón, enzima de transferencia de ratóneisaKit Condiciones de conservación:2 - 8℃ Vida útil:6Meses.

Kit de transferasa a base de ratón Kit de transferasa a base de ratón Especificaciones y modelos:96T/48T Kit de enzima de transferencia a base de ratón, especificación y modelo:96T/48TFuente: kit (embalaje importado), alias del producto: kit de transferencia a base de ratón, enzima de transferencia a base de ratóneisaKit Condiciones de conservación:2 - 8℃ Vida útil:6Meses.

Kit de factor de crecimiento epidérmico de ratón Kit de factor de crecimiento epidérmico de ratón Especificaciones y modelos:96T/48T Kit de factor de crecimiento epidérmico de ratón, modelo de especificación:96T/48TFuente: kit (embalaje importado), alias del producto: kit de factor de crecimiento epidérmico del ratón, factor de crecimiento epidérmico del ratóneisaKit Condiciones de conservación:2 - 8℃ Vida útil:6Meses.

Kit de corynebacterium murino Kit de corynebacterium murino Especificaciones y modelos:96T/48T Kit de corynebacterium murino, especificación y modelo:96T/48TFuente: kit (embalaje importado), alias del producto: kit de corynebacterium murino, corynebacterium murinoeisaKit Condiciones de conservación:2 - 8℃ Vida útil:6Meses.

Hexoquinasa de ratónELISA (HK)Kit96T/48T

Kit de ELISA de sorbitol deshidrogenasa humana (SDH)Deshidrogenasa humana(SDH)Kit

Proteína de unión del ADN humano, DBPELISAKitpersonaADNProteína de unión(DBP)Kit96T/48TEmbalaje importado

HumanAi-glucoproteína 210, GP210Kit Glicoproteína de membrana antinuclear humana210Anticuerpos(gp210)Especificaciones del kit:96T/48T

Planta Lai hidroxilasa(lisilhidroxilasa)Kit cuantitativo de colorimetría activa20vez

HumanVitamina A,Tracción vaelisatpersonaA(VA)Especificaciones del kit:96T/48T

PAnticuerpos materiales

Moléculas de adhesión de unión2Anticuerpos

Células renales de croaker amarillo grande; PCKPNR 1ReorganizadorNeuropilina-1 / NRP1Proteína(FcetiquetaProteína

Receptores de productos finales de Glicación avanzada(AGER)Proteína recombinanteReceptor específico del producto final de glicosilación avanzada recombinante (AGER)

hacerReorganizadorLALBA / Alfa-lactalbuminaProteína(FcetiquetaProteína

EPCAM Proteína humanaReorganizadorEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Proteína

Proteína HA H1N1Gripe a recombinanteH1N1 (A/WSN/1933)HemaglutininaHA1 (Hemaglutinina)Proteína

‌ operación estéril:El Cultivo celular debe llevarse a cabo en un ambiente estéril, la Mesa de trabajo ultralimpia debe ser esterilizada con radiación ultravioleta antes de su uso y la Caja de cultivo debe limpiarse regularmente. Los experimentadores deben cambiar su ropa de trabajo, fundas de zapatos y usar máscaras y guantes.

Esterilización de equipos:La cristalería, los instrumentos metálicos, etc. se pueden esterilizar a vapor a alta presión, mientras que los productos plásticos eligen principalmente la esterilización por óxido de etileno o la compra de productos esterilizados.

Selección de reactivos:Los reactivos utilizados, como el medio de cultivo, el suero y el amortiguador, deben ser estériles y libres de contaminación, y las pruebas estériles deben realizarse antes de su uso. Diferentes células tienen diferentes requisitos para la composición del medio de cultivo, y el medio de cultivo adecuado debe seleccionarse de acuerdo con el tipo de célula.

‌ condiciones de cultivo:La temperatura adecuada para el cultivo de la mayoría de las células de mamíferos es de 37 ° c, y la desviación debe controlarse en ± 0,5 ° c. La incubadora debe mantenerse bien sellada, comprobar regularmente la concentración y el flujo de gas, y el Cultivo celular generalmente requiere un 5% de CO2 para mantener el pH estable del medio. La humedad en la incubadora debe mantenerse en torno al 95%.

¿‌ sí?Observación diaria:La morfología celular, el Estado de crecimiento y los cambios de color del medio de cultivo se observaron bajo un microscopio todos los días.

Pruebas periódicas:Las células se someten regularmente a pruebas de contaminación por micoplasma, bacterias, hongos, etc.