Cómo se usa la espectrometría de masas para el análisis de proteínas - Biotecnología betepec

Cómo se usa la espectrometría de masas para el análisis de proteínas - Biotecnología betepecIntroducción detallada de los servicios técnicos de detección

La espectrometría de masas es un método de separación y detección basado en la relación masa - carga (m / z) de moléculas ionizadas, que es ampliamente utilizado en el análisis de dànbáizhì. Al ionizar las moléculas de la muestra y acelerarlas y desviarlas en un campo eléctrico o magnético, la separación se realiza de acuerdo con las diferencias en la masa y la carga eléctrica de los iones, y luego la intensidad y la relación masa - carga de los iones se registran a través del detector para obtener el espectrómetro de masas de la muestra. Esta tecnología hace que el análisis de dànbáizhì sea más eficiente y jàngquè, capaz de estudiar en profundidad la estructura, función e interacción de dànbáizhì.

I. pasos clave en la espectrometría de masas para el análisis de dànbáizhì

1. preparación de la muestra de dànbáizhì: la muestra de dànbáizhì puede ser una simple dànbáizhì (como una solución purificada de dànbáizhì con una pureza superior al 90%) o una mezcla compleja (como lisado celular, extracto de tejido). En el proceso de preparación, a menudo se utilizan métodos como la página de gel SDS - page, la cromatografía de afinidad y la filtración de gel para separar y purificar dànbáizhì, lo que garantiza que el análisis posterior de dànbáizhì sea más jàngzhàn.

2. proteasa: la proteasa es un paso importante en el análisis de dànbáizhì. Debido al gran peso molecular de dànbáizhì completo, el análisis directo es difícil, por lo general es necesario resolver la enzima dànbáizhì en un segmento de péptido más pequeño antes del análisis de espectrometría de masas. Entre las enzimas de uso común se encuentran yydànbáiméi (trypsin), capaz de cortar en Lisina (lysine) y jàngànsuàn (arginina) en dànbáizhì, produciendo segmentos polipéptidos compuestos por 6 - 40 residuos de aminoácidos.

3. análisis de espectrometría de masas: los segmentos de péptidos enzimáticos se analizan a través de un espectrómetro de masas. El espectrómetro de masas generalmente consta de tres partes: fuente de iones, analizador de masa y detector. La fuente de iones es responsable de la ionización del segmento del péptido, y los métodos comunes son la ionización por pulverización eléctrica (esi) y la desorción / ionización láser asistida por matriz (maldi). El analizador de masa, por su parte, se separa de acuerdo con la relación masa - carga de los iones, con trampas de iones (ion trap), tiempo de vuelo (tof), cuadrupolo (quadrupole) y orbitrap, entre otros. El detector registra la intensidad y la relación masa - carga de los iones, genera un espectrómetro de masas y proporciona datos para los análisis posteriores de dànbáizhì.

4. recuperación de la base de datos con la caracterización de dànbáizhì: los datos de espectrometría de masas obtenidos deben compararse con la base de datos de dànbáizhì. este paso suele utilizar un software especial para emparejar la espectrometría de masas real con la espectrometría de masas teórica a través de un algoritmo (es decir, la espectrometría de masas del segmento de péptido predicha Después de la enzima dànbáizhì) y juzgar la fiabilidad de los resultados de la identificación en forma de puntuación.

II. aplicación de la espectrometría de masas en el análisis de dànbáizhì

1. secuenciación de dànbáizhì: a través de la técnica de espectrometría de masas, se puede determinar la secuencia de aminoácidos de dànbáizhì. Por lo general, después de la enzima dànbáizhì, el peso molecular de cada segmento de péptidos se detecta mediante espectrometría de masas y la secuencia de dànbáizhì se deduce en combinación con la búsqueda de la base de datos.

2. análisis de modificaciones posttraduccionales de dànbáizhì: la tecnología de espectrometría de masas puede detectar modificaciones posttraduccionales de dànbáizhì, como fosforilación, acetilación, ubiquitinización, etc. Al analizar la espectrometría de masas del segmento péptido cerca del sitio de modificación, se pueden determinar los tipos y sitios de modificación, revelando el efecto de la modificación en la función de dànbáizhì.

3. análisis cuantitativo de dànbáizhì: la técnica de espectrometría de masas también se puede utilizar en el análisis cuantitativo de dànbáizhì. La intensidad de la señal de espectrometría de masas de dànbáizhì o de un segmento de péptido específico se mide mediante el método de etiquetado isotópico (como itraq, tmt) o la cantidad sin biāojì dìng (como Label - Free quantum, lfq), determinando así la abundancia relativa o de jué duì de dànbáizhì. Esto permite al análisis de dànbáizhì realizar un estudio en profundidad de los cambios en la expresión de dànbáizhì en diferentes condiciones.

4. estudio de interacción dànbáizhì: la técnica de espectrometría de masas combinada con experimentos de interacción dànbáizhì (como la IP de coprecipitación inmune) permite identificar y analizar redes de interacción entre dànbáizhì. Esto ayuda a revelar la función y el mecanismo regulador de dànbáizhì en las vías de señalización celular.

La tecnología de espectrometría de masas continuará ampliando su gama de aplicaciones en el campo de las ciencias de la vida y la biomedicina, especialmente en el análisis de dànbáizhì, proporcionando métodos de análisis más jàngzhàn y eficientes, proporcionando un fuerte apoyo para revelar los misterios de dànbáizhì y resolver problemas científicos importantes.

Proyecto característico de biotecnología de baitaipaike

I. secuenciación de proteínas

La biotecnología de baitepec utiliza el recién lanzado espectrómetro de masas obitrap Fusion Lumos de la compañía Thermo y el sistema de secuenciación de degradación Edelman de la compañía Shimadzu para analizar la secuencia de dànbáizhì, proporcionando servicios de análisis de secuenciación de proteínas basados es en espectrometría de masas, incluyendo análisis de la composición de aminoácidos de dànbáizhì, análisis de secuencia completa de nduàncès, cduàncès y servicio de análisis de secuencia final de dànbáizhìn basado en la degradación de edelman. Para las secuencias teóricas desconocidas de dànbáizhì, se ofrece un servicio de secuenciación de dànbáizhì basado en el método de secuenciación de novo para analizar las secuencias de proteínas.

※ ventajas de servicio:

1. adoptar el instrumento de espectrometría de masas avanzado actual en el mundo, obitrap Fusion lumos;

2. se puede lograr una cobertura del 100% de la secuencia de proteínas Diana determinada;

3. se pueden determinar hasta 70 secuencias de aminoácidos en el extremo n de la proteína;

4. se pueden determinar diversas formas de muestras: soluciones proteicas, bandas proteicas pvdf;

5. baja cantidad de muestra: la muestra de proteína solo necesita 5 - 10ug para completar la prueba;

6. la secuenciación no se ve afectada por modificaciones del extremo n, como el cierre del extremo n, la Pec y la glicosilación.

II. Grupo dànbáizhì

La biotecnología de baitepec utiliza la Plataforma de espectrometría de masas orbitrap Fusion Lumos de Thermo Fisher combinada con Nano - LC para proporcionar una variedad de servicios de análisis de histología dànbáizhì cuantitativos, histología dànbáizhì dirigida, histología polipéptida, proteómica modificada posttraduccional y así sucesivamente. Además, baitaipaike Biotechnology ha lanzado recientemente un servicio de histología 4dànbáizhì basado en timstof pro para ayudar en la investigación de la proteómica de muestras trazas, la medicina de grupos de muestras grandes y la histología modificada de alto rendimiento.

※ ventajas de servicio:

1. Análisis cuantitativo de proteínas de alto rendimiento: Análisis experimental a gran escala en grupos de control múltiple, se encontraron nuevos biomarcadores;

2. una variedad de métodos de marcado dànbáizhì in vivo e in vitro, adecuados para analizar tejidos, células, sangre y otras muestras;

3. la sensibilidad del análisis de espectrometría de masas es alta y la repetición de los resultados experimentales es alta;

4. se pueden detectar proteínas de baja abundancia con un amplio rango lineal;

5. análisis bioinformático de zhuānyè, el análisis es más sistemático y preciso.

3. análisis de la tecnología de flujo de espectrometría de masas unicelular

La biotecnología de baitepec utiliza el sistema de flujo de espectrometría de masas fluidigm para el análisis de la tecnología de flujo de espectrometría de masas unicelular, marcadores de elementos metálicos (generalmente anticuerpos específicos marcados con elementos metálicos) para etiquetar moléculas en la superficie y el interior de las células, luego separa las células individuales con principios de células de flujo, y luego analiza El espectro de masa atómica de las células individuales con espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (icp - ms), después de lo cual zuì convierte los datos del espectro de masa atómica en expresiones moleculares de señal en la superficie y el interior de las células.

※ ventajas de servicio:

1. tecnología avanzada para llenar las lagunas tecnológicas

La tecnología de anticuerpos marcados con Metal evita el problema de que los canales de fluorescencia de flujo tradicionales son pequeños y fáciles de interactuar. Se pueden caracterizar varios indicadores simultáneamente a nivel unicelular, y la biotecnología baitaipaike puede detectar 51 proteínas objetivo al mismo tiempo.

2. gran cantidad de análisis y bajo costo

El rnaseq unicelular está limitado por factores como el costo, y el número de análisis agregados por todas las células de la muestra es generalmente de unos 2x10,4, mientras que la espectrometría de masas de flujo (muestra única) puede analizar al menos 10,5 células a la vez, logrando un aumento de magnitud y el costo no es superior al rnaseq unicelular.

3. grandes perspectivas de aplicación

① los resultados de la espectrometría de masas de flujo pueden dar cambios en los subgrupos celulares y tienen grandes perspectivas de investigación en el diagnóstico clínico y la investigación del mecanismo de la enfermedad;

② la combinación de la tecnología de etiquetas metálicas con otras tecnologías tendrá nuevas direcciones de aplicación. Además de las proteínas convencionales, la tecnología de células de flujo de espectrometría de masas también se puede utilizar para modificar las proteínas después de la traducción;

③ se puede detectar la tasa de supervivencia celular, el tamaño celular, la expresión del transcriptor de arnm, la tasa de síntesis de ADN y la actividad de la proteasa.

IV. análisis de la histología de los péptidos inmunológicos y descubrimiento de nuevos antígenos basados en espectrometría de masas de alta precisión

Las soluciones de ventanilla única para el análisis de la histología de péptidos inmunológicos y el descubrimiento de nuevos antígenos basadas en espectrometría de masas de alta precisión de baitaipaike Biotechnology incluyen nuestro programa exclusivo y altamente sensible de enriquecimiento e identificación de péptidos inmunológicos. Podemos ayudarle a lograr la identificación y reconocimiento de más de 10000 polipéptidos de tipo I y más de 10000 polipéptidos de tipo II. A través de nuestra plataforma de análisis de inmunopéptidos de alto rendimiento optimizada para el análisis de inmunopéptidos, se puede realizar un reconocimiento repetible y cuantificación a partir de materiales de muestra pequeños de zuì. El Servicio se puede aplicar a la investigación a gran escala y tiene como objetivo ayudar a los investigadores científicos a encontrar soluciones para el cáncer, las enfermedades inmunológicas y las enfermedades infecciosas, profundizando en objetivos desconocidos.

V. caracterización de los medicamentos biológicos

Basado en la tecnología de espectrometría de masas de alta resolución, baitaipaike, MALDI TOF， Tecnología de separación por cromatografía de alto rendimiento, que ofrece una serie de programas de análisis biofarmacéutico de vánshàn, desde el análisis de la composición de aminoácidos y la estructura primaria de productos biológicos como dànbáizhì, polipéptidos, anticuerpos y vacunas, hasta el análisis de la variabilidad y pureza del producto. El objetivo es proporcionar servicios de análisis de medicamentos biológicos de alta calidad para ayudar a los productores de medicamentos biológicos a mejorar la calidad de los medicamentos biológicos.

Siete plataformas de detección de biotecnología de baitaipaike

Baitaipaike biotechnology - caracterización de productos biológicos, espectrometría de masas biológica multigrupo proveedor de servicios de alta calidad

Beijing baitaipaike Biotechnology co., Ltd. se compromete a proporcionar servicios de zhuānyè, como pruebas de control de calidad y verificación de proyectos para la industria biológica / farmacéutica y de dispositivos médicos. Siguiendo las regulaciones y principios rectores de nmpa, ich, FDA y ema, el laboratorio de la compañía ha establecido un sistema de calidad completo a través de la certificación del sistema de doble calidad CNAS / iso9001, copias de Seguridad de datos fríos y calientes / en diferentes lugares, medición regular / verificación de período de equipos, seguimiento de auditoría de software, soluciones integradas y servicios técnicos para clientes, apoyando el desarrollo de nuevos medicamentos, registro de declaraciones de medicamentos y liberación de producción.

1. la compañía adopta el sistema de control de calidad iso9001, y zhuānyè ofrece servicios de detección y análisis de Cro basados es es en espectrometría de masas;

2. ser reconocido por el Laboratorio Nacional CNAS para proporcionar a los clientes servicios de investigación de calidad de medicamentos que cumplan con las regulaciones farmacéuticas globales;

3. el ámbito de negocio abarca la histología dànbáizhì, la histología polipéptida, la metabolómica, la caracterización biofarmacéutica, el análisis unicelular, el flujo de espectrometría de masas unicelular, el análisis en la nube de shengxin y el análisis integrado de espectrometría de masas biológica multigenómica;

4. siete plataformas de inspección de control de calidad para satisfacer sus necesidades de servicio de ventanilla única;

5. servir a más de 3.000 empresas y la elección de más de 10.000 clientes;

¡6. ¡ comprometido a proporcionarle servicios de análisis de espectrometría de masas biológica de alta calidad!

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