Explicación detallada de la tecnología de determinación de peso molecular LC - MS

Explicación detallada de la tecnología de determinación de peso molecular LC - MSIntroducción detallada de los servicios técnicos de detección

En la investigación de Ciencias de la vida y el desarrollo biomédico, la determinación precisa del peso molecular es el eslabón básico de la identificación estructural, el control de calidad, la investigación y el desarrollo de medicamentos y otros enlaces. Ya sea para confirmar si la proteína está completamente expresada o para verificar la pureza de las moléculas pequeñas sintetizadas, la información sobre el peso molecular es uno de los datos de bùkěhuòquē. Entre las muchas técnicas de determinación de peso molecular, la Cromatografía líquida - espectrometría de masas (lc - ms) es ampliamente utilizada para la determinación de peso molecular de dànbáizhì, segmentos de péptidos, medicamentos de moléculas pequeñas e incluso metabolitos debido a su alta sensibilidad, amplia aplicabilidad y capacidad de análisis estructural.

I. una visión general de los principios de la tecnología LC - MS

El LC - MS es un sistema combinado de Cromatografía líquida (lc) con la tecnología de espectrometría de masas (mass spectrometry, ms):

• Parte lc: primero se separan los diferentes componentes de la muestra a través de la cromatografía para reducir la interferencia de la matriz y mejorar la especificidad de la detección.

• Parte ms: a continuación, la relación de carga iónica (m / z) se detecta a través de un analizador de ionización y masa, obteniendo así información sobre el peso molecular de cada componente.

Los métodos comunes de ionización incluyen:

• Esi (ionización por pulverización eléctrica): adecuado para el análisis de compuestos polares como dànbáizhì, polipéptidos, nucleótidos, etc.

• APCI (ionización química a presión atmosférica): adecuado para moléculas pequeñas volátiles.

• MALDI (desorción e ionización láser asistida por matriz): comúnmente utilizado en el escaneo rápido de peso molecular de dànbáizhì.

En la biotecnología de baitaipaike, utilizamos principalmente la espectrometría de masas por nebulización eléctrica de alta resolución (hr - esi - ms), combinada con un sistema de cromatografía optimizado, para lograr la determinación del peso molecular de jàngquè desde moléculas pequeñas hasta productos biológicos poliméricos.

II. ventajas de LC - MS en la determinación del peso molecular

1. coexistencia de alta sensibilidad y alta precisión

El sistema LC - MS puede detectar objetivos de hasta pimol (pmol) o concentraciones más bajas, y el error de masa generalmente se controla en menos de 5 ppm, especialmente adecuado para el análisis de peso molecular de trazas en muestras complejas.

2. compatibilidad de qiángdà con muestras complejas

En comparación con los métodos tradicionales como SDS - page o absorción ultravioleta, el LC - MS es casi inmune a la interferencia de impurezas de la muestra y se puede utilizar directamente en sistemas complejos como lisados celulares, suero y suero fermentado.

3. se puede proporcionar información relacionada con la estructura

Además del peso molecular, los Estados Miembros también pueden proporcionar pistas estructurales como la distribución isotópica, la información de fragmentos y las modificaciones posttraduccionales (como la Fosforilación y la glicosilación), que tienen ventajas naturales para confirmar la estructura molecular.

III. escenarios de aplicación típicos para la determinación del peso molecular de LC - MS

1. verificación del peso molecular de dànbáizhì

Durante el proceso de expresión y purificación de la proteína recombinante, confirmar si la proteína objetivo está completa (por ejemplo, si hay truncación del extremo n, ausencia del extremo c, péptido de señal no cortado) es un enlace de control de calidad convencional. El peso molecular de jàngquè medido por LC - MS puede juzgar rápidamente si la proteína coincide con el peso molecular teórico o si hay pequeñas modificaciones.

2. pureza e identidad de los medicamentos de moléculas pequeñas

LC - MS es uno de los métodos SH yuxu n para la confirmación de la estructura después de la síntesis molecular de medicamentos. Al obtener los picos de plasma [m + h] +y [m + na] + se juzga si el peso molecular del pico principal es consistente con la estructura objetivo, mientras se monitorea la presencia de subproductos sintéticos o productos de degradación.

3. control de calidad de la síntesis de péptidos

Los polipéptidos sintéticos son propensos al fracaso de la extensión del extremo de la cadena o a la ausencia de residuos. LC - MS puede juzgar eficientemente la integridad de la secuencia de péptidos y mejorar la tasa de éxito de la síntesis y la fiabilidad de las pruebas posteriores.

4. etiquetado molecular del metabolismo y el Grupo lipídico

En la metabolómica, el LC - MS no solo se utiliza para la cuantificación, sino que también asume la tarea de cribado preliminar de peso molecular de metabolitos característicos o sustancias diferenciadas, proporcionando una base para el análisis estructural posterior (como MS / ms).

IV. comparación con otras técnicas de determinación del peso molecular

Conclusión: cada método tiene sus escenarios de aplicación, y el LC - ms, con su precisión, aplicabilidad y capacidad de análisis estructural, se está convirtiendo gradualmente en el principal esquema de determinación de peso molecular en el análisis biológico moderno.

V. ventajas del Servicio de determinación de peso molecular de baitaipaike Biotechnology LC - MS

En baitaipaike biotechnology, hemos construido un sistema de análisis LC - MS basado en plataformas gàoduān como Thermo orbitrap y bruker qtof, y hemos apoyado procesos exclusivos de preprocesamiento de muestras y análisis de datos, con las siguientes ventajas básicas:

• Capacidad de detección de ventanilla única de moléculas pequeñas a dànbáizhì.

• Entrega de 3 - 5 días hábiles, adecuada para varios tipos de muestras.

• Apoyar la expansión de servicios como el análisis de modificación posttraducción y el reconocimiento de isómeros.

• Proporcionar datos brutos + informe zhuānyè para facilitar el archivo y publicación del proyecto.

Con la profundización de la investigación biológica y la aceleración de la investigación y el desarrollo de medicamentos, se presta cada vez más atención a la precisión y la profundidad de la información de la determinación del peso molecular. Con sus capacidades analíticas de qiángdà, el LC - MS está ayudando a los científicos a pasar de "tener" a "tener", de "cantidad" a "calidad". Si se encuentra en proceso de identificación de dànbáizhì, verificación de moléculas pequeñas o control de calidad de péptidos, Póngase en contacto con betepec biotechnology, y le proporcionaremos un fuerte soporte de datos para su proyecto de investigación con la plataforma tecnológica LC - ms de zhuānyè.

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Proyecto característico de biotecnología de baitaipaike

I. secuenciación de proteínas

La biotecnología de baitepec utiliza el recién lanzado espectrómetro de masas obitrap Fusion Lumos de la compañía Thermo y el sistema de secuenciación de degradación Edelman de la compañía Shimadzu para analizar la secuencia de dànbáizhì, proporcionando servicios de análisis de secuenciación de proteínas basados es en espectrometría de masas, incluyendo análisis de la composición de aminoácidos de dànbáizhì, análisis de secuencia completa de nduàncès, cduàncès y servicio de análisis de secuencia final de dànbáizhìn basado en la degradación de edelman. Para las secuencias teóricas desconocidas de dànbáizhì, se ofrece un servicio de secuenciación de dànbáizhì basado en el método de secuenciación de novo para analizar las secuencias de proteínas.

※ ventajas de servicio:

1. adoptar el instrumento de espectrometría de masas avanzado actual en el mundo, obitrap Fusion lumos;

2. se puede lograr una cobertura del 100% de la secuencia de proteínas Diana determinada;

3. se pueden determinar hasta 70 secuencias de aminoácidos en el extremo n de la proteína;

4. se pueden determinar diversas formas de muestras: soluciones proteicas, bandas proteicas pvdf;

5. baja cantidad de muestra: la muestra de proteína solo necesita 5 - 10ug para completar la prueba;

6. la secuenciación no se ve afectada por modificaciones del extremo n, como el cierre del extremo n, la Pec y la glicosilación.

II. Grupo dànbáizhì

La biotecnología de baitepec utiliza la Plataforma de espectrometría de masas orbitrap Fusion Lumos de Thermo Fisher combinada con Nano - LC para proporcionar una variedad de servicios de análisis de histología dànbáizhì cuantitativos, histología dànbáizhì dirigida, histología polipéptida, proteómica modificada posttraduccional y así sucesivamente. Además, baitaipaike Biotechnology ha lanzado recientemente un servicio de histología 4dànbáizhì basado en timstof pro para ayudar en la investigación de la proteómica de muestras trazas, la medicina de grupos de muestras grandes y la histología modificada de alto rendimiento.

※ ventajas de servicio:

1. Análisis cuantitativo de proteínas de alto rendimiento: Análisis experimental a gran escala en grupos de control múltiple, se encontraron nuevos biomarcadores;

2. una variedad de métodos de marcado dànbáizhì in vivo e in vitro, adecuados para analizar tejidos, células, sangre y otras muestras;

3. la sensibilidad del análisis de espectrometría de masas es alta y la repetición de los resultados experimentales es alta;

4. se pueden detectar proteínas de baja abundancia con un amplio rango lineal;

5. análisis bioinformático de zhuānyè, el análisis es más sistemático y preciso.

3. análisis de la tecnología de flujo de espectrometría de masas unicelular

La biotecnología de baitepec utiliza el sistema de flujo de espectrometría de masas fluidigm para el análisis de la tecnología de flujo de espectrometría de masas unicelular, marcadores de elementos metálicos (generalmente anticuerpos específicos marcados con elementos metálicos) para etiquetar moléculas en la superficie y el interior de las células, luego separa las células individuales con principios de células de flujo, y luego analiza El espectro de masa atómica de las células individuales con espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (icp - ms), después de lo cual zuì convierte los datos del espectro de masa atómica en expresiones moleculares de señal en la superficie y el interior de las células.

※ ventajas de servicio:

1. tecnología avanzada para llenar las lagunas tecnológicas

La tecnología de anticuerpos marcados con Metal evita el problema de que los canales de fluorescencia de flujo tradicionales son pequeños y fáciles de interactuar. Se pueden caracterizar varios indicadores simultáneamente a nivel unicelular, y la biotecnología baitaipaike puede detectar 51 proteínas objetivo al mismo tiempo.

2. gran cantidad de análisis y bajo costo

El rnaseq unicelular está limitado por factores como el costo, y el número de análisis agregados por todas las células de la muestra es generalmente de unos 2x10,4, mientras que la espectrometría de masas de flujo (muestra única) puede analizar al menos 10,5 células a la vez, logrando un aumento de magnitud y el costo no es superior al rnaseq unicelular.

3. grandes perspectivas de aplicación

① los resultados de la espectrometría de masas de flujo pueden dar cambios en los subgrupos celulares y tienen grandes perspectivas de investigación en el diagnóstico clínico y la investigación del mecanismo de la enfermedad;

② la combinación de la tecnología de etiquetas metálicas con otras tecnologías tendrá nuevas direcciones de aplicación. Además de las proteínas convencionales, la tecnología de células de flujo de espectrometría de masas también se puede utilizar para modificar las proteínas después de la traducción;

③ se puede detectar la tasa de supervivencia celular, el tamaño celular, la expresión del transcriptor de arnm, la tasa de síntesis de ADN y la actividad de la proteasa.

IV. análisis de la histología de los péptidos inmunológicos y descubrimiento de nuevos antígenos basados en espectrometría de masas de alta precisión

Las soluciones de ventanilla única para el análisis de la histología de péptidos inmunológicos y el descubrimiento de nuevos antígenos basadas en espectrometría de masas de alta precisión de baitaipaike Biotechnology incluyen nuestro programa exclusivo y altamente sensible de enriquecimiento e identificación de péptidos inmunológicos. Podemos ayudarle a lograr la identificación y reconocimiento de más de 10000 polipéptidos de tipo I y más de 10000 polipéptidos de tipo II. A través de nuestra plataforma de análisis de inmunopéptidos de alto rendimiento optimizada para el análisis de inmunopéptidos, se puede realizar un reconocimiento repetible y cuantificación a partir de materiales de muestra pequeños de zuì. El Servicio se puede aplicar a la investigación a gran escala y tiene como objetivo ayudar a los investigadores científicos a encontrar soluciones para el cáncer, las enfermedades inmunológicas y las enfermedades infecciosas, profundizando en objetivos desconocidos.

V. caracterización de los medicamentos biológicos

Basado en la tecnología de espectrometría de masas de alta resolución, baitaipaike, MALDI TOF， Tecnología de separación por cromatografía de alto rendimiento, que ofrece una serie de programas de análisis biofarmacéutico de vánshàn, desde el análisis de la composición de aminoácidos y la estructura primaria de productos biológicos como dànbáizhì, polipéptidos, anticuerpos y vacunas, hasta el análisis de la variabilidad y pureza del producto. El objetivo es proporcionar servicios de análisis de medicamentos biológicos de alta calidad para ayudar a los productores de medicamentos biológicos a mejorar la calidad de los medicamentos biológicos.

Siete plataformas de detección de biotecnología de baitaipaike

Baitaipaike biotechnology - caracterización de productos biológicos, espectrometría de masas biológica multigrupo proveedor de servicios de alta calidad

Beijing baitaipaike Biotechnology co., Ltd. se compromete a proporcionar servicios de zhuānyè, como pruebas de control de calidad y verificación de proyectos para la industria biológica / farmacéutica y de dispositivos médicos. Siguiendo las regulaciones y principios rectores de nmpa, ich, FDA y ema, el laboratorio de la compañía ha establecido un sistema de calidad completo a través de la certificación del sistema de doble calidad CNAS / iso9001, copias de Seguridad de datos fríos y calientes / en diferentes lugares, medición regular / verificación de período de equipos, seguimiento de auditoría de software, soluciones integradas y servicios técnicos para clientes, apoyando el desarrollo de nuevos medicamentos, registro de declaraciones de medicamentos y liberación de producción.

1. la compañía adopta el sistema de control de calidad iso9001, y zhuānyè ofrece servicios de detección y análisis de Cro basados es es en espectrometría de masas;

2. ser reconocido por el Laboratorio Nacional CNAS para proporcionar a los clientes servicios de investigación de calidad de medicamentos que cumplan con las regulaciones farmacéuticas globales;

3. el ámbito de negocio abarca la histología dànbáizhì, la histología polipéptida, la metabolómica, la caracterización biofarmacéutica, el análisis unicelular, el flujo de espectrometría de masas unicelular, el análisis en la nube de shengxin y el análisis integrado de espectrometría de masas biológica multigenómica;

4. siete plataformas de inspección de control de calidad para satisfacer sus necesidades de servicio de ventanilla única;

5. servir a más de 3.000 empresas y la elección de más de 10.000 clientes;

¡6. ¡ comprometido a proporcionarle servicios de análisis de espectrometría de masas biológica de alta calidad!

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