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El vector de principios del kit de ligación rápida de ADN T4 y otros

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Descripción general

Este kit puede completar rápidamente la respuesta de conexión pegajosa o plana del fragmento de ADN a temperatura ambiente (22 ¿ 176; c) durante 10 minutos. Los productos de conexión se pueden transformar directamente. Se puede utilizar para la clonación de fragmentos de adn, la construcción de bibliotecas, la clonación ta, la conexión linker, etc. Portador de principios $r $ndna Quick Ligation Kit T4 y otros

Detalles del producto

Kit de Ligación Rápida de ADN

El vector de principios del kit de ligación rápida de ADN T4 y otros

Número de catálogo:42110

Número de catálogo

Unidad de embalaje

42110 - 20

20 veces

42110 - 60

60 veces


Componentes

42110 - 20

42110 - 60

2 x Tampón de Ligación Rápida

100 ml

300 ml

Q4 DNA ligase, 5 uml

100 U

300 U

Almacenamiento del producto:-20GradosC conservar y evitar el exceso de congelación y deshielo repetidos.

Descripción del producto:Este Kit está disponible a temperatura ambiente (22GradosC) en 10 minutos, se completa rápidamente la respuesta de conexión pegajosa o plana del fragmento de adn. Los productos de conexión se pueden transformar directamente. Se puede utilizar para la clonación de fragmentos de adn, la construcción de bibliotecas, la clonación ta, la conexión linker, etc.

característica:Los extremos planos rápidos, simples y pegajosos pueden completar la reacción de conexión en 10 minutos.

Pasos de operación:

1. La reacción se llevó a cabo de acuerdo con el siguiente sistema:

5 ml

2 x Tampón de Ligación Rápida

ml

ADN vectorial (30-60ng)

ml

Insert DNA (3 veces el número de moles del vector, la relación entre la inserción y el vector es de 3: 1)

ml

Agua estéril

1 m(5 unidades Weiss)ml)

Q4 DNA ligase

Volumen final

10ml

Por lo general, finalmente se agrega la ligase de ADN t4, que se mezcla completamente y puede centrifugar instantáneamente para recoger el líquido hasta el Fondo del tubo.

2. 22GradosConexión C durante 10 minutos (generalmente se puede completar en un instrumento pcr).

Recomendación habitual 22GradosConexión C durante 5 - 10 minutos, la conexión de segmento largo > 3kb se puede extender a 30 minutos. No se recomiendan más de 30 minutos, más de lo que puede reducir el número de transformadores.

3. Se enfría sobre hielo y luego se transforma o almacena directamente en - 20GradosCSi se almacena en - 20GradosC, Antes de la transformación, se debe volver a disolver en hielo y mezclar bien para la transformación.

Explicación:

1. No inactivar la ligase de ADN T4 por calor antes de la transformación, de lo contrario reducirá la eficiencia de la transformación.

2. El volumen de fragmentos de ADN es superior a 4mL, se puede agregar 2 xquick Ligation buffer, y el volumen total de reacción se puede aumentar a 20 en consecuencia.ml, De esta manera, se puede agregar un mayor volumen de fragmentos de ADN al sistema de conexión.

El vector de principios del kit de ligación rápida de ADN T4 y otros