Experimento de detección de etiquetado de tintes fluorescentes celulares

Experimento de detección de etiquetado de tintes fluorescentes celulares

La tecnología de etiquetado Zenon 8 proporciona un método experimental rápido, universal y confiable para la preparación de anticuerpos marcados con fluorescencia, que pueden utilizar varios tintes fluorescentes, y la materia prima inicial puede ser un número muy pequeño de anticuerpos no purificados (como el sobrenadante de cultivo de células hybridoma). Los anticuerpos marcados con la tecnología de etiquetado Zenon @ son adecuados para todas las áreas de aplicación en las que se pueden usar anticuerpos estándar directos. Las ventajas de la tecnología de marcado Zenon @ incluyen:

● 10 minutos para pegar

● 1 - 20 microgramos de anticuerpos por etiqueta

● compatible con la BSA y otras proteínas estables

● no hay pasos de purificación.

● etiquetas de anticuerpos flexibles

Zenon - Cómo funciona la tecnología de marcado

La tecnología de etiquetado Zenon @ proporciona un método multifuncional y fácil de usar para etiquetar anticuerpos igg1, lgg2a y lgg2b en humanos y ratones y anticuerpos IgG en conejos. Los fragmentos Zenon @ especialmente diseñados solo se combinan con fragmentos FC de una resistencia. este método de combinación rápido y no covalente puede marcar rápidamente un pequeño número de fragmentos FC de una resistencia (figura 1) la tecnología de etiquetado Zenon @ es simple y eficiente; Todo el paso de marcado dura solo 10 minutos.

El acoplamiento de anticuerpos Zenon @ se puede almacenar de manera estable para su uso después de la formación; Antes de su uso, es necesario agregar LGG no específico para bloquear los fragmentos zenon¿ sin unión, sin purificación de columna. El complejo Zenon @ se puede aplicar así directamente a la muestra.

Los anticuerpos marcados por la técnica de etiquetado Zenon @ mostraron una intensidad de fluorescencia o actividad enzimática similar a los acoplamientos de anticuerpos marcados directamente observados (figura 2).

Figura 1. cómo funciona la tecnología de marcado Zenon @Los marcadores no covalentes de los anticuerpos Zenon @ se comparan con los marcadores covalentes de los kits de micromarcado, los kits de marcado monoclonal y los kits de marcado de proteínas.

Figura 2. la altura de los anticuerpos marcados producidos por la tecnología de etiquetado Zenon @ es equivalente o superior a los anticuerpos marcados directamente. marque varios anticuerpos de marcadores linfoides con la etiqueta de conjugación de alocianina (apc) o con el complejo de 1 microgramo Zenon - APC sin conjugación. Luego, la resistencia marcada

El cuerpo se utiliza para teñir muestras de linfocitos de sangre periférica humana. Al preparar el complejo de teñido Zenon @ se puede mejorar aún más el brillo del complejo aumentando la proporción del reactivo técnico de marcado Zenon @ con los anticuerpos de primer nivel utilizados.

Zenon @ Marking technology: flexibilidad de la marca final

Cuando necesita cambiar el color del marcador o detectar si una fluorescencia específica es adecuada para su aplicación o anticuerpos, la tecnología de etiquetado Zenon @ puede proporcionar flexibilidad de etiquetado de *. Marcadores de amplia selección, tecnología de marcado universal, le ayudan a obtener fácilmente imágenes de aplicaciones multicolor combinadas por diferentes colores en la medición en flujo (figura 3) y la imagen fluorescente (figura 4 y 5).

Figura 3. uso de la técnica de etiquetado Zenon 8 en la medición en flujo.Los glóbulos blancos de la sangre periférica humana se tiñen con los siguientes tres tipos de anticuerpos: anticuerpos GG1 de ratón anti - CD3 (a2330) marcados previamente con el kit de etiquetado igg1 de ratón Zenon 8 Alexa Flower @ 647 (z25008), anticuerpos ggg1 de ratón anti - CD4 marcados previamente con el kit de etiquetado igg1 de ratón Fucosa zenon¿ R (z25055) y anticuerpos G1 de ratón anti - CD4 (a21334) marcados previamente con el kit de etiquetado igg1 de ratón Zenon 8 Alexa Fluor@488 Anticuerpos anti - CD8 lgg2a de ratón (a21338) marcados por el kit de marcado lgg2a de ratón (z25102). Las figuras a y b muestran que distinguir la señal de fluorescencia naranja de la señal de fluorescencia verde o la señal de fluorescencia Roja de la señal de fluorescencia naranja, respectivamente, puede distinguir las células y demostrar que los anticuerpos marcados con Zenon @ no interfieren entre sí en la misma muestra. Los instrumentos utilizados para analizar la muestra y la configuración son: Colter elite Flow Cell meter, para phuoglobina y Alexa Fluor@488 El tinte utiliza una luminiscencia de 488 nm y una luminiscencia de 633 nm para el tinte alexfluor 8.647.

Figura 4. uso de la tecnología de etiquetado Zenon @ en imágenes fluorescentes.

Se cortó una sección coronaria del hipocampo de ratón con un espesor de 14 micras. El anticuerpo primario anti - A - microtubular (a11126) etiquetado con el kit marcado por el ratón GG1 (z25002) de Zenon 8 Alexa Flower @ 488 fue teñido. Las secciones fueron teñidas con neurotrace¿ 530 / 615 tinte Nissl fluorescente rojo (n21482) para observar el citosoma neuronal y Hoechst 33258 (h1398, h3569, h21491) para observar el núcleo.

Figura 5. uso de la tecnología de etiquetado Zenon @ en imágenes fluorescentes.

La microtubulina y la microtubulina de las células endoteliales de la arteria pulmonar bovina marcada por la sonda mitocondrial se utilizaron con Zenon @ Alexa Fluor@488 Los anticuerpos monoclonales igg2b de ratón anti - A - microtubulina marcados con el kit de marcado lgg2b de ratón (z25202) se detectaron, y las mitocondrias se detectaron con el kit de marcado lgg2b de ratón zenon¿ Alexa Flower @ 555 (z25205) marcando la subunidad V del complejo de fosforilasa antioxidante lgg2b de ratón (a21350). Teñir el ácido nucleico con dapi (d1306, d3571, d21490).

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