La cromatografía de contracorriente de alta velocidad (hsccc, por sus siglas en inglés) es una nueva y continua técnica de cromatografía de distribución líquido - líquido desarrollada en 1982 por el doctor Ito de los institutos nacionales de salud de Estados Unidos. a diferencia de otras técnicas de cromatografía, no requiere ningún portador sólido, por lo que puede evitar efectos adversos como la contaminación, inactivación, desnaturalización y adsorción irreversible de muestras debido a la reacción de la superficie del portador sólido con la muestra. Al mismo tiempo, también tiene las ventajas de una amplia gama de aplicaciones, rapidez, gran cantidad de muestras, bajo costo y alta tasa de recuperación. Por lo tanto, se ha utilizado ampliamente en los campos de la biología, la medicina, los alimentos, los materiales, los cosméticos y la protección del medio ambiente, especialmente en el campo de la separación y purificación de los ingredientes activos de los productos naturales.

La cromatografía de contracorriente de alta velocidad es un método de separación de la cromatografía de contracorriente basado en un sistema de equilibrio hidrodinámico unidireccional, que se encuentra accidentalmente al estudiar el equilibrio hidrodinámico de un tubo giratorio. Cuando el tubo espiral gira lentamente, las dos fases del tubo espiral se distribuyen de un extremo al otro. Cuando se eluye una fase móvil de un extremo al otro, la retención de la otra fase en el tubo espiral es de aproximadamente el 50%, pero esta retención disminuirá a medida que aumente el flujo de la fase móvil, lo que reducirá la eficiencia de separación. Sin embargo, cuando la velocidad del tubo espiral se acelera, la distribución de las dos fases cambia. Cuando la velocidad de rotación alcanza el rango crítico, las dos fases se separan a lo largo de la longitud del tubo espiral *, una de las cuales ocupa una sección en el extremo inicial, que llamamos la primera fase y la otra sección en el extremo trasero, que se llama la última fase. Precisamente la cromatografía de contracorriente de alta velocidad aprovecha esta característica de distribución unidireccional de las dos fases, a una alta velocidad de rotación del tubo espiral, si se envía desde el extremo trasero a la fase inicial, pasará por la fase final y se moverá hacia el extremo final del tubo espiral, del mismo modo, si se envía desde el extremo inicial a La fase final, pasará por la fase final y se moverá hacia el extremo final del tubo espiral. Al separarse, una de las fases (fase fija) se inyecta primero en el tubo espiral y luego se bombea la fase móvil desde el extremo adecuado para que lleve la muestra a una distribución infinita en el tubo espiral. Cuanto más rápida sea la velocidad del instrumento, mayor será la retención de la fase fija, mejor será el efecto de separación y mejorará considerablemente la velocidad de separación, por lo que se llama cromatografía de contracorriente de alta velocidad.

Describir brevemente las ventajas del producto del cromatógrafo de contracorriente de alta velocidad:

1. debido a que la composición y la proporción del sistema de disolventes pueden ser infinitas, en teoría se puede aplicar a la separación de muestras dentro de cualquier rango polar, que tiene sus características únicas en la separación de compuestos naturales. Debido a que la fase fija en el tubo de PTFE es un líquido que no requiere un portador sólido, se puede eliminar la pérdida de adsorción causada por el uso de un portador sólido en la cromatografía sólido - líquido, especialmente adecuado para la separación de sustancias polares.

2. fácil de operar y fácil de dominar: el cromatógrafo de contracorriente de alta velocidad es fácil de operar, los requisitos de pretratamiento de las muestras son bajos, y el extracto grueso general se puede preparar, separar o analizar.

3. alta tasa de recuperación: no se necesitan portadores sólidos, lo que elimina las pérdidas causadas por la adsorción y degradación irreversibles de las muestras en portadores sólidos, y en teoría la tasa de recuperación de las muestras puede alcanzar. En el experimento, siempre y cuando se ajusten las condiciones de separación, generalmente hay una alta tasa de recuperación.

4. buena reproducibilidad: si la muestra no tiene una fuerte actividad superficial, la acidez y la alcalinidad no son fuertes, incluso si se inyectan muchas veces, su proceso de separación se mantiene muy estable y la reproducibilidad es bastante buena.