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[artículo de aplicación] nanocourt evalúa cinco métodos de aislamiento de vesículas extracelulares: una gran competencia entre eficiencia y pureza
Fecha:2024-10-21Leer:1
¿¿ qué es una cápsula extracelular?
Los evs se refieren a las vesículas nanométricas liberadas de las células y están ampliamente presentes en la sangre, la orina, la saliva y otros fluidos corporales. Estas vesículas son ricas en proteínas funcionales, moléculas pequeñas, ácidos nucleicos y otros metabolitos. El evs está presente en casi todos los tipos de células y fluidos corporales, incluyendo plasma, orina, saliva y leche materna. El tipo y el contenido de proteínas, lípidos y mirnas transportados por el evs pueden reflejar directamente el tipo de su origen. La investigación del evs ayuda a comprender mejor la fisiología celular y la patología, y clínicamente el EV no solo muestra un gran potencial en el diagnóstico de enfermedades, sino que también puede convertirse en una nueva herramienta para la entrega de medicamentos. Por lo tanto, los métodos de separación y caracterización de EV de alta pureza que satisfacen las necesidades experimentales específicas se han vuelto particularmente importantes.
Comparación completa de los cinco métodos de separación
En este estudio, los investigadores realizaron una evaluación detallada de cinco técnicas comunes de separación de ev, entre ellas:
1.Método tradicional de centrifugación de exceso de velocidad diferencial (uc): si la velocidad de rotación es superior a 30000 R / min, se llama centrifugación de exceso de velocidad. La separación de muestras de diferentes tamaños mediante el aumento gradual de la velocidad centrífuga sobre la base de la centrifugación por exceso de velocidad puede separar eficazmente EV de alta pureza, a menudo considerado como el "estándar de oro" para la extracción de nanopartículas.
Resultados del tem de cinco métodos de separación
Tecnología RPS
La tecnología de inducción de pulso de Resistencia (rps) es una nueva tecnología de caracterización de nanopartículas únicas, que también se basa actualmente en la electricidad.Caracterización de partículasMétodo. El tamaño y la concentración de las vesículas extracelulares y el potencial Zeta se evalúan midiendo los cambios de corriente a través de nanoporos diminutos. Este método tiene las ventajas de precisión, rapidez, simplicidad y alta sensibilidad, lo que lo convierte en una herramienta ideal para evaluar la calidad del método de separación de vesículas.
Comparación de datos de tamaño de partícula de cinco métodos de separación
Comparación de datos de concentración de cinco métodos de separación
Comparación de datos del potencial Zeta de cinco métodos de separación
SeparaciónEl secreto detrás: la disputa entre eficiencia y pureza
A través de la tecnología rps, los investigadores analizaron en detalle la distribución del tamaño de las partículas, la concentración de partículas y la pureza de cada método de separación. Los resultados muestran que, aunque el método de ultrafiltración, el método de columna qev y el método exoquick pueden obtener una mayor concentración de partículas, el método tradicional de centrifugación de exceso de velocidad diferencial tiene el mejor rendimiento en pureza.
Distribución del tamaño de las partículas: el tamaño de las partículas EV separadas por uc, uf, exoeasy y qev es más consistente, alrededor de 71 nm, mientras que el tamaño de las partículas EV separadas por exoquick es ligeramente mayor, con un promedio de 77 nm.
Concentración de partículas: ultrafiltración (uc) muestra la concentración máxima de partículas, alcanzando 2,10 × 1012/mL， Por su parte, la concentración de partículas del método UC es relativamente baja, 7,33 × 1010por ml.
Pureza: la pureza EV del método UC es la más alta, con un número de partículas de 7,88 × 10 por miligramo de proteína11.
Comparación de datos de pureza EV de cinco métodos de separación
¿¿ cómo elegir el método de separación adecuado?
Cada método de separación tiene su propioVentaja. Según los resultados del estudio, aunque el método de centrifugación por exceso de velocidad es complejo y más largo, cuando los experimentos requieren evs de mayor pureza, el método de superseparación sigue siendo la primera opción; Sin embargo, para escenarios de aplicación que buscan una producción eficiente y a gran escala, el método de ultrafiltración y el método de cromatografía de columna qev proporcionan una velocidad de separación más rápida y una mayor concentración de partículas.
Diagrama esquemático del principio de funcionamiento de la Plataforma de análisis de partículas nanocolter
Comprender las ventajas y desventajas de los diferentes métodos de separación ayudará a los investigadores a llevar a cabo mejor la investigación experimental y el desarrollo de aplicaciones relacionadas con las vesículas extracelulares. Este artículo evalúa exhaustivamente cinco métodos de separación de vesículas extracelulares a través de la tecnología RPS y las propiedades precisas de nanocollter, proporcionando una base científica para que los investigadores elijan técnicas de separación adecuadas.
La selección de métodos de separación adecuados debe tener en cuenta los requisitos específicos de las necesidades experimentales, incluida la eficiencia, pureza y conveniencia de la operación de la separación. Lo mismo ocurre con la selección de métodos adecuados de caracterización de partículas,En el estudio anterior, la caracterización de nanocourt de EV refleja las siguientes ventajas:
Ventaja 1: detección de partículas únicas, precisa y sin interferencia
Con su avanzada tecnología RPS a nivel nanométrico, nanocourt ha logrado una captura y análisis precisos de cada nanopartícula.Imagínese que en fluidos biológicos complejos, cada pequeño evs que pasa por nanoporos no puede escapar de su "examen físico completo".Se rompe el fenómeno de que las señales de partículas grandes bloquean partículas pequeñas en los métodos ópticos tradicionales y, por lo tanto, distorsionan los resultados.Especialmente para el tipo de dispersión múltiple como evsMuestras de fluidos biológicos, ya sea de tamaño, concentración o potencial zeta, cada dato proviene de la medición directa de partículas individuales, lo que garantiza que los resultados sean verdaderos y confiables.¡¡ esta precisión puede llevar el estudio de las vesículas celulares a un nuevo nivel!
Ventaja 2: alta precisión, análisis multiparamétrico
Nanocollter es capaz de realizar un análisis exhaustivo del tamaño de las partículas, la distribución del tamaño de las partículas, la concentración de partículas y el potencial Zeta del evs.El análisis preciso de la distribución del tamaño de las partículas nos ayuda a comprender la distribución real del tamaño de las muestras de evs, mientras que la concentración de partículas refleja la abundancia y la calidad de separación de evs, mientras que el potencial Zeta está estrechamente relacionado con la estabilidad de evs y la Diana de entrega de medicamentos de EV de ingeniería.Estos datos nos proporcionan información completa sobre evs y proporcionan un sólido soporte de datos para la investigación científica y la aplicación clínica de nanofármacos.
Ventaja 3: adaptación a muestras complejas
A diferencia de los métodos ópticos tradicionales, que consiste en el análisis general de partículas en la muestra, nanocollter se destaca en muestras complejas y multidispersas.Es capaz de caracterizar con precisión las nanopartículas en líquidos de bajo índice de refracción, alta concentración de iones o baja movilidad, asegurando que incluso en líquidos biológicos complejos se pueden obtener resultados confiables, especializados y adecuados para la investigación en el campo de la biomedicina.
Ventaja 4: proceso de operación rápido y conveniente
El proceso de operación de nanocourt es simple y rápido, sin necesidad de un complejo preprocesamiento de muestras, así como el motor térmico y los pasos de calibración del equipo.Cada chip nanoporoso ha sido estrictamente calibrado y verificado en el momento de la producción, y no es necesario consumir productos estándar en el lado del usuario.Esto permite a los investigadores obtener resultados más rápido y acelerar el ritmo de los descubrimientos científicos.
Ventaja 5: amplia aplicación
El campo de aplicación de nanocourt es mucho más que la investigación de evs.Ha demostrado un gran potencial y valor en muchos campos, como la biomedicina, la ciencia de los materiales y el monitoreo ambiental.Con su alta precisión, alta estabilidad y amplia aplicación, nanocourt se está convirtiendo gradualmente en la mano derecha que los investigadores científicos necesitan.