Kit de detección de micoplasma

Kit de detección de micoplasma

Especificaciones de embalaje] 25T/.caja & 50T/.caja

[principio de inspección]

Este Kit diseña un primer específico y una sonda de baliza molecular para este gen, que contiene elADNEn el caso de,PCRLa reacción se realiza y se emiten señales fluorescentes. Uso de instrumentos paraPCRLas señales fluorescentes correspondientes en el proceso se monitorean y exportan en tiempo real para realizar el análisis cualitativo de los resultados de las pruebas.

[condiciones de almacenamiento y período de validez]Evitar la luz-20℃Conservar lo siguiente para evitar la congelación y el deshielo repetidos, válido12Meses.

ABISerie,Bio-RadSerie,Agilent Stratagene MXSerie,Roche LightCycler R480,Cepheid SmartCycler,Gen RotorSerie, serie Hangzhou bori y otros canales cuantificación de fluorescencia en tiempo real en tiempo realPCRInstrumento.

[requisitos de la muestra]

1. Si se utiliza el espécimen original para la prueba. Los especímenes (líquido cefalorraquídeo del paciente, sangre venosa, líquido articular; sangre venosa del animal enfermo, leche; colonias, musgo, etc.) deben ser especímenes originales recogidos y suspendidos con agua esterilizada al doble vapor o solución salina esterilizada.

2. Si es necesario hacerlo después de aumentar la bacteriaPCRPara la detección, se debe utilizar un líquido de aumento selectivo de bacterias para aumentar las bacterias en el espécimen original.

3. Si el espécimen no se puede detectar inmediatamente después de la recolección, se puede colocar en2-.8℃Almacenamiento refrigerado durante la noche; Si se necesita conservación a largo plazo, los especímenes deben congelarse en-20℃～-80℃。

[método de inspección]

1. Preparación de reactivos (área de preparación de reactivos)

（1) retire el kit del refrigerador,Extraer el reactivo necesario para el experimento del kit, derretirlo completamente y mezclarlo y centrifugarlo instantáneamente para eliminar el líquido adherido a la pared del tubo.

（2) contabilizar el número de respuestas necesarias para ese experimento..n) y calcular la cantidad de varios reactivos necesarios para ese experimento de acuerdo con el sistema de reacción mostrado en la siguiente tabla.

n =Número de controles negativos..1T(...)- sí.Número de controles positivos..1T(...)- sí.Reserva de error..1T(...)- sí.Número de muestras

（3) añadir los reactivos anteriores en un tubo centrífuga estéril y centrifugar instantáneamente después de mezclar completamente. según20 μL/El volumen de embalaje del tubo empaqueta el reactivo aPCRTubo de reacción.

（4) tapa apretadaPCRDespués de la tapa del tubo de reacción, sePCREl tubo de reacción se trasladó al área de procesamiento de muestras. Devolver el reactivo restante-20℃Los siguientes refrigeradores se congelan y conservan.

2.Preparación de la muestra (área de procesamiento de la muestra)

usarADN / ARNSe puede extraer el kit para extraer el ácido nucleico, y la operación específica se opera de acuerdo con las instrucciones de su kit.

3.Añadir muestra

Preparado en lo anteriorPCRSe añaden muestras procesadas a la prueba en el tubo de muestra de reacción.ADNCada uno5 μl, volumen final25 μl/Tubo, cubiertoPCRDespués de mezclar la tapa de reacción, se centrifuga instantáneamente a baja velocidad y se transfiere aPCREn el instrumento. Los controles negativos y los pares positivos se añaden cada uno.5 μLEl kit viene con un control negativo o un control positivo, con un volumen final de25 μl/Tubo, cubiertoPCRDespués de mezclar la tapa de reacción, se centrifuga instantáneamente a baja velocidad y se transfiere aPCREn el instrumento.

4.PCR()PCRÁrea amplificada)

（1) el área de procesamiento de muestras está listaPCRTubo de reacción, colocado en cuantificación fluorescente en tiempo realPCRLa posición correspondiente de la ranura de muestra del medidor y el orden de colocación se registran.

（2(la siguiente tabla establece los parámetros relacionados con la amplificación de ácido nucleico del instrumento.PCRAmplificación.

Nota:ABIFluorescencia de la seriePCREl instrumento no se selecciona al configurarROXCorrección, configuración de la selección del Grupo de enfriamientoNinguno.

[valor de referencia (rango de referencia)]

1.Determinación de la validez del kit:

（1Control positivo: típicoSCurva de amplificación de tipo oCtvalor≤ 35.

（2Control negativo:CtValor >.38O ningunoCtValor, la línea es recta o ligeramente diagonal, sin período de crecimiento exponencial.

2.Los resultados de la muestra se juzgan:

（1) positivo: resultado de la prueba de la muestraCtvalor≤ 35O hay un período de crecimiento exponencial obvio.

（2) sospechoso: resultados de las pruebas de especímenesCtValor en35-.38Dentro del alcance. En este momento, los especímenes deben ser probados repetidamente, como repetir los resultados del experimento.CtEl valor sigue siendo35-.38Dentro del rango, si hay un período de crecimiento exponencial obvio, se determina que es positivo, de lo contrario es negativo.

（3) negativo: resultado de la prueba de la muestraCtValor >.38O ningunoCtValor.

[explicación de los resultados de la inspección]

[limitaciones del método de inspección]

1. cuando la concentración de ácido nucleico detectado en la muestra detectada es inferior a la detección de este kit, puede ocurrir un resultado falso negativo.

2. el modo de operación inadecuado de las muestras inspeccionadas durante la recolección, transporte, almacenamiento y procesamiento es fácil de causar.DNALa degradación produce resultados falsos negativos.

3. la contaminación cruzada de las muestras durante la recolección, el transporte, el almacenamiento y el tratamiento es fácil de obtener resultados falsos positivos.

[indicadores de rendimiento del producto] El límite de detección del producto es10³Copias/ml, productoCVvalor≤3Porcentaje.

[precauciones]

1. los laboratorios que utilicen este Kit deben gestionarse estrictamente de conformidad con las normas de gestión de los laboratorios de pruebas de amplificación genética pertinentes promulgadas por las partes pertinentes del estado;

2. para evitarARNDegradación, el proceso de tratamiento de la muestra debe ser0-4℃Operar en condiciones y subir a la máquina para detectar inmediatamente después de completar el experimento; Los consumibles de los utensilios utilizados en el proceso de tratamiento de la muestra deben ser tratados sin ribozima;

3. los artículos de cada área son especiales y no deben cruzarse para evitar la contaminación; Inmediatamente después de la prueba, la Mesa de trabajo debe limpiarse;

4. al absorber el líquido de reacción, se deben tratar de evitar burbujas de aire; arribaPCR Antes del medidor, se debe prestar atención a comprobar si cada tubo de reacción está bien cubierto para evitar resultados inexactos causados por la evaporación del líquido;

5. todos los reactivos del kit deben derretirse y mezclarse completamente a temperatura ambiente antes de su uso, y deben centrifugarse instantáneamente;

6. todos los controles negativos y positivos en el kit deben transferirse a la zona de preparación de la muestra antes de su primer uso y almacenarse por separado;

7. para evitar interferencias fluorescentes, se debe evitar el contacto directo con las manos desnudas.PCRTubo de reacción y se debe evitar enPCRCualquier marca en el tubo de reacción;

8. la cabeza de succión utilizada durante la prueba debe golpearse directamente en shengyou.10%En el tanque de residuos de ácido hipocloroso, la prueba ha terminadoPCR Tubo de reacción, no abra la tapa y desinfecte con otros artículos desechados después de la esterilización; Las mesas de trabajo y todo tipo de suministros experimentales deben utilizarse regularmente. 10%ácido hipocloroso,75%Desinfección con alcohol o lámparas ultravioleta;

Los parámetros relacionados con la amplificación del instrumento deben establecerse de acuerdo con los requisitos pertinentes de este manual; Los reactivos de diferentes lotes no se pueden mezclar; Y se utiliza durante el período de validez.Los productos solo se utilizan para la investigación científica.