Kit de prueba ELISA para la Proteína quinasa activada por el mitógeno humano (mapk)

I. parámetros del kit de prueba Elisa de la Proteína quinasa activada por el mitógeno humano (mapk)

Nombre chino:Kit de detección Elisa de la Proteína quinasa activada por el mitógeno humano (mapk)

Especificaciones: 48t 96t

Género: humano

marcaZhenke Biology

Longitud de onda de detección: 450 nm

Volumen de muestra requerido: volumen asegurado 50 ul

ámbito de aplicación: solo para la investigación científica, no para el diagnóstico clínico, los especímenes clínicos son útiles como temas.

Propósito de la prueba: se utiliza para determinar el contenido de Proteína quinasa activada por mitógeno (mapk) en muestras de suero humano, plasma y líquidos relacionados.

Tipos de muestras detectadas: suero, plasma, orina, homogeneización de tejidos, líquido sobrenadante celular, líquido cefalorraquídeo, líquido de lavado, heces y otras muestras.

Los géneros de suministro de Zhenke son: humanos, ratas, ratones, cobayas, hijos humanos, cerdos y perros, ganado vacuno y ovino, pollos y patos, plantas, peces, insectos kits elisa, etc.

II. composición del kit de Elisa

3. tratamiento y requisitos de las muestras:

1. Suero: la sangre a temperatura ambiente se solidifica naturalmente durante 10 - 20 minutos y se centrifuga durante unos 20 minutos (2000 - 3000 rpm). Recoger cuidadosamente

Limpiar, si se produce precipitación durante el proceso de conservación, se debe centrifugar nuevamente.

2. Plasma: se debe seleccionar EDTA o Citrato de sodio como anticoagulante de acuerdo con los requisitos del espécimen, y después de mezclar durante 10 - 20 minutos, centrifugar

20 Unos minutos (2000 - 3000 RPM / min). Recoger y limpiar cuidadosamente, si se forma precipitación durante el proceso de conservación, debe volver a

Centrífuga.

3. Orina: recoger con un tubo estéril y centrifugar durante unos 20 minutos (2000 - 3000 rpm). Recoger y limpiar cuidadosamente, proceso de conservación

Si se forma precipitación en el medio, se debe centrifugar nuevamente. La ascitis torácica y el líquido cefalorraquídeo se implementan con referencia.

4. Sobrenadante de cultivo celular: al detectar ingredientes secretores, se recogen con tubos estériles. Centrifugación durante unos 20 minutos (2000 - 3000 rpm)

Puntos). Recoger cuidadosamente y limpiar. Al detectar componentes dentro de la célula, diluir la suspensión celular con PBS (ph7.2 - 7.4), la célula

La concentración alcanzó alrededor de 1 millón / ML. A través de la congelación y descongelación repetidas, las células se destruyen y liberan componentes celulares. 20 puntos de centrifugación

Alrededor del reloj (2000 - 3000 RPM / min). Recoger cuidadosamente y limpiar. Si se forma precipitación durante el proceso de conservación, se debe centrifugar nuevamente.

5. Especímenes de tejido: después de cortar el espécimen, pesar el peso. Añadir una cierta cantidad de pbs, ph7.4. Preparación para congelación rápida y conservación con nitrógeno líquido

Usa. Los especímenes se mantienen a una temperatura de 2 - 8 ° C después de derretirse. Añadir una cierta cantidad de PBS (ph7.4) con un homogeneizador manual o

Homogeneizar completamente el espécimen. Centrifugar durante unos 20 minutos (2000 - 3000 rpm). Recoger cuidadosamente y limpiar. Después del embalaje, se espera una copia.

Prueba, el resto congelado en espera.

6. La extracción de los especímenes se realiza lo antes posible después de la recolección, la extracción se realiza de acuerdo con la literatura relevante, y el experimento debe llevarse a cabo lo antes posible después de la extracción. Si no se puede ir de inmediato

Para el ensayo, las muestras se pueden conservar a - 20 ° c, pero se debe evitar la congelación y descongelación repetidas.

7. No se pueden detectar muestras que contengan nan3, ya que nan3 inhibe la actividad de la superóxidasa de rábano picante (hrp).

4. precauciones:

1. El kit debe extraerse del ambiente refrigerado y debe equilibrarse a temperatura ambiente durante 15 - 30 minutos antes de que pueda usarse. si el paquete enzimático no está abierto después de la apertura de la placa.

Después de usarlo, las tiras deben conservarse en bolsas selladas.

2. el detergente concentrado puede tener precipitación cristalina, que se puede calentar y ayudar a la disolución en un baño de agua cuando se diluye, sin afectar el resultado cuando se lava.

3. El muestreador debe usarse en cada paso de la muestra y su precisión debe corregirse con frecuencia para evitar errores de prueba. El tiempo de una muestra es bueno.

Controlado en 5 minutos, si el número de especímenes es grande, se recomienda usar pistolas de drenaje para agregar muestras.

4. por favor, haga la curva estándar al mismo tiempo cada vez que se mida, Zui es fácil de hacer agujeros compuestos. Si el contenido de la sustancia a medir en la muestra es demasiado alto (valor de od de la muestra)

Si es mayor que el valor de od del primer agujero del agujero estándar, diluya un cierto múltiplo (n veces) con una dilución de muestra antes de medirlo.

Al calcular, por favor, Zui y multiplicarlo por el múltiplo de dilución total (× n × 5).

5. La película de sellado se limita al uso único para evitar la contaminación cruzada.

6. El sustrato debe conservarse protegido de la luz.

7. siga estrictamente el funcionamiento de las instrucciones, y los resultados de la prueba deben basarse en la lectura del medidor de enzima.

8Todas las muestras, detergentes y diversos residuos deben tratarse como contagios.

9. los diferentes componentes del número de lote de este reactivo no se pueden mezclar.

10. Si hay diferencias con las instrucciones en inglés, prevalecerán las instrucciones en inglés.

V,ELISACálculo del kit

Tomando la concentración del estándar como Coordenadas horizontales y el valor de od como coordenadas longitudinales,

Dibuja la curva estándar en el papel de coordenadas, de acuerdo con el od de la muestra

El valor es detectado por la curva estándar para la concentración correspondiente; Multiplicar por dilución

Múltiplos; O calcular el estándar con la concentración y el valor de od del estándar

La ecuación de regresión lineal de la cuasi - curva, que convierte el valor de od de la muestra

Sustituir por la ecuación, calcular la concentración de la muestra y multiplicarla por la dilución

Múltiplo, es decir, la concentración real de la muestra.

VI. rendimiento del kit de Elisa

1.El valor R del coeficiente de correlación entre la regresión lineal de la muestra y la concentración esperada es superior a 0990.

2.Dentro y fuera del lote deben ser inferiores al 9% y al 11%, respectivamente.

3.Condiciones de conservación y vida útil: refrigeración a 2 - 8 ° c, vida útil del kit de 6 meses.

VII. recordatorios especiales

Debido a que las condiciones existentes y el nivel científico y tecnológico aún no pueden identificar y analizar completamente todas las materias primas proporcionadas por todos los proveedores, este producto puede tener ciertos riesgos técnicos de calidad.

1. Los resultados finales del experimento de Zui están estrechamente relacionados con la efectividad del reactivo, el funcionamiento relevante del experimentador y el entorno experimental en ese momento. asegúrese de preparar suficientes copias de Seguridad de especímenes.
2. Puede haber algunas diferencias en el mismo producto en diferentes lotes, como: límite de detección, sensibilidad y tiempo de desarrollo de color, por favor, realice la operación experimental de acuerdo con las instrucciones en el kit, y las instrucciones electrónicas solo se utilizan como referencia.
3. Solo el uso total de los reactivos de apoyo de este kit puede garantizar el efecto de la prueba y no se puede mezclar con los productos de otros fabricantes. Los resultados de la prueba de * solo se obtendrán siguiendo estrictamente las instrucciones experimentales de este kit.
4. La compañía solo es responsable del propio kit y no del consumo de muestras causado por el uso del kit. se pide a los usuarios que reserven muestras suficientes teniendo plenamente en cuenta el posible uso de las muestras antes de usarlos.
5. Los homogeneizados de tejidos o extractos celulares preparados con lisados químicos pueden desviar los resultados de los experimentos de Elisa debido a la introducción de ciertos productos químicos.
6. Si la muestra es el sobrenadante del cultivo celular, puede haber situaciones que no se pueden detectar porque hay muchos factores de interferencia en este tipo de muestras, como: Estado celular, número de células, tiempo de muestreo, etc.
7. Ciertas proteínas naturales o recombinantes, incluidas las proteínas recombinantes procarióticas y eucariotas, pueden no ser detectadas porque no coinciden con los anticuerpos de detección y captura utilizados en este producto.