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¿¿ qué?Shanghai ruifan Biotechnology co., Ltd.
Distrito de jinshan, Shanghai
Kit Elisa de osteoprotegerina de rata (opg)Detalles:
[especificaciones]:48T/96T
marcaRuifan
[longitud de onda de detección]:450 nm
[condiciones de conservación]:2 - 8 °, seis meses
[uso del producto]:Solo para investigación científica
[propósito de la prueba]:Se utiliza para determinar muestras líquidas relacionadas con suero, plasma, ascitis torácica, etc.
[Características]:Alta sensibilidad, fuerte especificidad, buena repetibilidad, reactivos estables, fáciles de conservar y fácil de operar.
Las especies suministradas por ruifan son: personas, pollos, patos, peces, caballos, cerdos de conejo, plantas y otros kits elisa, etc.
[tratamiento de especímenes]:
1. la compañía solo es responsable del propio kit y no del consumo de muestras causado por el uso del kit. se pide a los usuarios que tengan plenamente en cuenta el posible uso de la muestra antes de usarlo y reserven muestras suficientes.
2. antes del experimento se debe predecir el contenido de la muestra, y si la concentración de la muestra es demasiado alta, la muestra debe diluirse para que la muestra diluida se ajuste al rango de detección del kit, y luego multiplicarse por el múltiplo de dilución correspondiente al cálculo. El espécimen se diluyó con PBS de 0,01 MOL / L (ph = 7,0 - 7,2).
3. si las muestras detectadas no están incluidas en las muestras enumeradas en las instrucciones, se recomienda realizar experimentos previos para verificar su efectividad y prestar atención a conservar las muestras.
4. los homogeneizados de tejidos o los extractos celulares preparados con lisados químicos pueden desviar los resultados de los experimentos de Elisa debido a la introducción de ciertos productos químicos.
5. si la muestra es un sobrenadante de cultivo celular, puede haber situaciones que no se pueden detectar porque hay muchos factores de interferencia en este tipo de muestras, como: Estado celular, número de células, tiempo de muestreo, etc.
6. ciertas proteínas naturales o recombinantes, incluidas las proteínas recombinantes procarióticas y eucariotas, pueden no ser detectadas porque no coinciden con los anticuerpos de detección y captura utilizados en este producto.
7. se recomienda el uso de muestras frescas, que pueden producirse desviaciones de los resultados experimentales debido a la degradación o desnaturalización de proteínas durante demasiado tiempo de conservación.
[Pasos de operación]:
1, añadir muestras: se establecen agujeros en blanco (los agujeros de control en blanco no agregan muestras y reactivos estándar enzimáticos, el resto de los pasos funcionan de la misma manera), agujeros estándar y agujeros de muestra a medir. Se añade 50 μl de muestra estándar a la placa de cubierta del paquete estándar de la enzima, 40 μl de dilución de muestra se agrega primero al agujero de la muestra a medir, y luego 10 μl de muestra a medir (la dilución final de la muestra es 5 veces). Añadir la muestra a la parte inferior del agujero de la placa estándar de la enzima, tratar de no tocar la pared del agujero, sacudir suavemente y mezclar bien.
2, wenyu: sellar la placa con película de sellado y colocarla a 37 ° C durante 30 minutos.
3, dispensación: diluir 30 veces el detergente concentrado con agua destilada 30 veces y reservarlo
4Lavado: quitar cuidadosamente la película de sellado, descartar el líquido, secar, llenar cada agujero con detergente, Dejar reposar durante 30 segundos y descartarlo, de esta manera
Repite 5 veces y dispara seco.
5, enzima añadida: 50 μl de reactivo estándar de enzima se agrega a cada agujero, excepto el agujero en blanco.
6, color: primero agregue el agente de color A50 μl por agujero, luego agregue el agente de color b50 μl, agite suavemente y mezcle bien, evite la luz y el color a 37 ℃.
10 Min.
7, terminación: 50 μl de líquido de terminación por agujero para detener la reacción (en este momento, el azul se convierte en amarillo).
8Determinación: la Absorbancia (valor de od) de cada agujero se mide secuencialmente con una longitud de onda de 450 nm de aire acondicionado en blanco cero. La determinación debe realizarse dentro de los 15 minutos posteriores a la adición del líquido de terminación.
[Kit Elisa de osteoprotegerina de rata (opg)Preguntas y respuestas]:
Si el efecto del experimento no es bueno, tome una foto de los resultados de color a tiempo, mantenga las tiras utilizadas y los reactivos no utilizados, y guarde adecuadamente, y luego Póngase en contacto con el soporte técnico de nuestra empresa para resolver el problema para usted. Al mismo tiempo, también puede referirse a los siguientes materiales:
Las preguntas son las siguientes: |
Posibles causas |
solución |
¿1: ¿ diferencia de curva estándar? |
1 absorción y lavado inadecuados 2 pipeta inexacta
|
1 absorción y lavado adecuados 2 revisar y corregir el Pipeta |
¿2: ¿ baja precisión? |
1 lavado insuficiente 2 mezcla insuficiente y absorción insuficiente de reactivos 3 reutilizar la cabeza de succión, el recipiente y el recubrimiento La adición de muestras no es precisa |
1 mezcla completa y absorción de reactivos 2 reemplazar la nueva cabeza de succión, usar un nuevo recipiente y recubrimiento con un muestreador 3 revisar y corregir el Pipeta
|
¿3: ¿ bajo valor de od? |
1 el tiempo de calentamiento no es correcto 2 temperatura de educación de temperatura incorrecta 3 falla del marcador o sustrato de la enzima 4 sin añadir líquido de terminación 5 lectura por encima del tiempo de lectura |
1 garantizar un tiempo adecuado de educación cálida 2 el reactivo debe equilibrarse a temperatura ambiente y garantizar la temperatura de incubación. 3 a través de marcadores y sustratos de enzimas mixtas, el color debe aparecer rápidamente para comprobar 4 siga los pasos de la operación experimental de las instrucciones para agregar el líquido de terminación. 5 lectura dentro del tiempo de lectura recomendado por las instrucciones |
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