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Categorías de producto
Shanghai langhan Biotechnology co., Ltd.
Tinción inmunohistoquímica múltiple
NegociableActualización en05/06
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Descripción general
Principio de Tinción inmunohistoquímica múltiple: utilizar el principio de unión específica de antígenos y anticuerpos para que un anticuerpo se una a un antígeno objetivo en tejidos o células; A la que se une el díptico marcado por hrp, que es capaz de unirse a una antigenicidad para formar un complejo de "antígeno - uno - uno - hrp marcado por el díptico", se añade el tinte fluorescente de tiramina, que en presencia de HRP y * se activa y se une covalentes a los residuos proteicos cercanos al antígeno, y se deposita Una gran cantidad de Luciferina en la parte de unión antígeno - anticuerpo, amplificando la señal, repitiendo los pasos anteriores varias veces, utilizando un anticuerpo diferente y el tinte fluorescente de Tiramina correspondiente cada vez para lograr múltiples dianas.
Detalles del producto
Tinción inmunohistoquímica múltiplePasos experimentales
Preparación de la muestra: incluye el tratamiento de secciones de parafina, secciones congeladas o tabletas de escalada celular, como fijación, reparación de antígenos, bloqueo de la peroxidasa endógena, etc.
Una resistencia a la incubación: una resistencia diluida con una dilución de anticuerpos, incubada en una caja húmeda para evitar la luz durante un cierto tiempo.
Incubación de dos resistencias: después del lavado, agregue HRP marcado con una resistencia a las especies correspondientes para incubar a temperatura ambiente sin luz.
Teñido con tintes fluorescentes tsa: añadir tintes fluorescentes de Tiramina en gotas y lavarlos después de un período de reacción a temperatura ambiente.
Elución de anticuerpos: elución de anticuerpos de la ronda anterior mediante reparación térmica o elución de anticuerpos para realizar la siguiente ronda de etiquetado.
Marcas repetidas: repita los pasos anteriores y use diferentes tintes resistentes y fluorescentes para lograr múltiples marcas.
Núcleo de recolocación y sello: volver a teñir el núcleo con tintes nucleares como dapi, gotear y endurecer el sello con un agente de bloqueo antifluoro.
Fotografía de microscopía: observar y recoger imágenes bajo microscopía fluorescente y otros equipos.
Tinción inmunohistoquímica múltiplePrecauciones
Selección y optimización de anticuerpos: se deben seleccionar anticuerpos altamente específicos y verificados, y optimizar la concentración de anticuerpos y el tiempo de incubación.
Problema de ocultación de epítopos: preste atención al orden de teñido de los anticuerpos y evite el fenómeno de ocultación de epítopos, que se puede resolver ajustando el orden de los anticuerpos o utilizando otros métodos.
Configuración de control experimental: se establecen controles positivos y negativos para garantizar la precisión y fiabilidad de los resultados experimentales.
Control del aumento de la señal: de acuerdo con las necesidades experimentales específicas y la intensidad de la señal fluorescente, elija razonablemente si agregar potenciador TSA y otros medios para controlar el aumento de la señal.
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