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¿¿ qué?Shanghai langhan Biotechnology co., Ltd.
Pruebas inmunohistoquímicas múltiplesPasos experimentales:
1. las muestras enterradas se cortan en una cortadora de parafina de 3um
2. después de hornear a 60 ° C durante 1 hora
3. desparafinado de xileno I durante 10 minutos
4. desparafinado de xileno II durante 10 minutos
5. rehidratación con alcohol gradiente: 100% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, 95% alcohol durante 5 minutos, 80% alcohol durante 5 minutos, lavado con agua del grifo durante 5 minutos
6. reparación de antígenos: colocar la sección en un líquido de reparación de ácido cítrico de 0,1 MOL / L y pH = 6,0, bañarse en agua hirviendo durante 20 minutos y enfriarse naturalmente durante 20 - 30 minutos después de detener el calentamiento
7. usar PBS 3 minutos y 3 veces, organizar círculos de trazos, gotear peróxido de hidrógeno e incubar durante 20 minutos
8. con PBS 3 minutos y 3 veces, gotear y sellar el suero durante 1 hora
9. secar, gotear con una concentración adecuada de una caja húmeda resistente a la humedad e incubar a 4 ° C durante la noche
10. lavar una resistencia con PBS 3 minutos x 5 veces
11. secar, dejar caer dos resistencias a temperatura ambiente y incubar en una caja de incubación durante 1 hora (preste atención a dos resistencias, 30 minutos en verano, 1 H en invierno)
12. lavar la resistencia secundaria con PBS 3 minutos x 5 veces
13. secar, gotear DAB para mostrar color, lavado de agua
14. sumulina teñida de núcleo durante 5 min (la sumulina recién configurada depende de la situación)
15. enjuague el exceso de suculenta con agua corriente y diferencie en el líquido de diferenciación durante 1 segundo.
16. enjuagar con agua corriente durante 5 min
17. rehidratación con alcohol gradiente: 80% alcohol durante 5 minutos, 95% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, xileno II transparente durante 5 minutos, xileno I transparente durante 5 minutos (si es completamente transparente, se puede prolongar adecuadamente el tiempo)
18. sello con Goma neutra
19. Microscopía