Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)

Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)Precauciones

1. educar estrictamente de acuerdo con el tiempo y la temperatura prescritos para garantizar resultados precisos. Todos los reactivos deben alcanzar una temperatura ambiente de 20 - 25 grados Celsius antes de su uso. Refrigerar y conservar el reactivo inmediatamente después de su uso.

2. el lavado incorrecto de la placa puede conducir a resultados inexactos. Asegúrese de secar el líquido en el agujero tanto como sea posible antes de agregar el sustrato. No deje que los microporos se sequen durante el proceso de calentamiento.

3. eliminar el líquido residual en el Fondo de la placa y las huellas dactilares, de lo contrario afectará el valor de od.

4. la solución de color del sustrato debe ser incolora o de color muy claro, y la solución del sustrato que se ha vuelto azul no se puede usar.

5. evitar la contaminación cruzada de reactivos y especímenes para evitar resultados erróneos.

6. evite la exposición directa a la luz fuerte durante el almacenamiento y el calentamiento.

7. después de equilibrar a temperatura ambiente, abra la bolsa de sellado para condensar las gotas de agua en la placa fría.

8. ningún reactivo de reacción puede entrar en contacto con el disolvente de blanqueamiento o el gas fuerte emitido por el disolvente de blanqueamiento. Cualquier ingrediente blanqueador destruye la actividad biológica de los reactivos de reacción en el kit.

9. no se pueden usar productos caducados.

10. si es posible transmitir la enfermedad, todas las muestras deben manejarse bien y las muestras y los dispositivos de detección deben procesarse de acuerdo con los procedimientos prescritos.

Preparación del reactivo

El kit debe extraerse del ambiente refrigerado y debe equilibrarse a temperatura ambiente antes de que pueda usarse.

Dilución de 20 × amortiguador de lavado: el agua destilada se diluye a 1: 20, es decir, 1 porción de 20 × amortiguador de lavado más 19 partes de agua destilada.

Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)Pasos de operación

1. retire las tiras necesarias de la bolsa de papel de aluminio después de equilibrar la temperatura ambiente durante 20 minutos, y las tiras restantes se sellen y devuelvan a 4 ° c con una bolsa selfie.

2. establecer agujeros estándar y agujeros de muestra, cada uno de los cuales agrega 50 μl de estándares de diferentes concentraciones;

3. añadir 50 μl de muestra a probar en el agujero de la muestra; No se agregan agujeros en blanco.

4. además de los agujeros en blanco, se añaden 100 μl de anticuerpos de detección marcados con superóxidasa de rábano picante (hrp) a cada agujero en el agujero estándar y el agujero de reacción sellado con una película de placa de sellado, y se cultiva en una olla de baño de agua a 37 ° c o en una incubadora durante 60 minutos.

5. descartar el líquido, secar el papel absorbente de agua, llenar el detergente (350 μl) con cada agujero, Dejar reposar durante 1 minuto, eliminar el detergente, secar el papel absorbente de agua, lavar la placa cinco veces así (también se puede lavar la placa con una lavadora).

6. añadir 50 μl de sustratos a y B a cada agujero e incubar a 37 ° C para evitar la luz durante 15 minutos.

7. añadir 50 μl de líquido de terminación a cada agujero y determinar el valor de od de cada agujero a una longitud de onda de 450 nm en 15 minutos.

Cálculo de los resultados experimentales

Con el estándar medidoEl valor de od es una coordenada horizontal y el valor de concentración del producto estándar es una coordenada vertical. en el papel de coordenadas o con el software relevante, se dibuja la curva estándar y se obtiene la ecuación de regresión lineal. el valor de od de la muestra se sustituye por la ecuación y se calcula la concentración de la muestra.