Instrucciones del método de trazabilidad de la actividad de la Lactato deshidrogenasa (método wst - 8)

- Lactato deshidrogenasaLDHPrincipio de determinación de las instrucciones del método de trazabilidad activa‌ pasa la pruebaLDHEn el proceso de reducción catalítica del piruvato al ácido lácticoNADHGeneración para la determinación indirectaLDHActividad.

El proceso específico es el siguiente:

‌ principios de reacción:EnLDHBajo la acción de,NAD+Ser restaurado y generadoNADH.NADHyWST-8La interacción produce el color, lo que permite la determinación colorimétrica (lambda)máx=450 nm).

‌ condiciones de reacción:LDHPonerNADRestaurar aNADH,NADHyWST-8La interacción produce colores. Esta reacción se lleva a cabo en hielo para evitar la luz, y los componentes (por ejemploTampón de ensayo,Lactato,NAD,WST-8,Mejorador) es necesario sacarlo del refrigerador y equilibrarlo a temperatura ambiente antes del experimento, y todo el proceso debe ser operado para evitar la luz.

Medición de la absorbancia:En450 nmMedición de la absorción a la longitud de onda, la absorción yLDHLa actividad es proporcional y se puede determinar por colorimetría.LDHActividad.

‌ pasos experimentales y equipos necesarios:

‌ pasos experimentales:Líquido de trabajo preparatorio..1×Tampón de ensayo,NAD,WST-8,MejoradoryLactatoMezclar uniformemente) añadir el líquido de trabajo96En una placa de Petri de vidrio poroso o traza, se añaden las muestras a medir,37Medir la absorción después de un cierto tiempo de incubación a temperatura constante.

‌ equipo necesario:Medidor estándar enzimático o espectrómetro visible (se puede medir)450 nmAbsorción en el lugar), incubadora, máquina de hielo, centrífuga de baja temperatura,96Placa de Petri de vidrio poroso o traza, pistola de transferencia de líquido ajustable y cabeza de pistola, agua desionizada, homogeneizador (si se trata de muestra de tejido).

Precauciones experimentales¿‌ qué?

Conservación de reactivos:Componentes (por ejemploTampón de ensayo,Lactato,NAD,WST-8,Mejorador) es necesario conservarlo protegido de la luz en el hielo y evitar la congelación y descongelación repetidas.

- Lactato deshidrogenasaLDH) instrucciones del método de trazabilidad activa‌ precauciones de operación:Todo el proceso experimental debe llevarse a cabo evitando la luz sobre el hielo para evitar que la luz afecte los resultados.¿‌ sí?

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