Pruebas inmunohistoquímicas

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Descripción general

Las pruebas inmunohistoquímicas utilizan el principio de la Unión específica de antígenos a anticuerpos para determinar los antígenos intracelulares (polipéptidos y proteínas) de los tejidos mediante reacciones químicas que hacen que los agentes de color de los anticuerpos marcados (luciferina, enzima, iones metálicos, isótopos) se coloreen, y su localización, caracterización y cuantificación se denominan inmunohistoquímica.

Detalles del producto

Pruebas inmunohistoquímicasPasos experimentales:

1. las muestras enterradas se cortan en una cortadora de parafina de 3um

2. después de hornear a 60 ° C durante 1 hora

3. desparafinado de xileno I durante 10 minutos

4. desparafinado de xileno II durante 10 minutos

5. rehidratación con alcohol gradiente: 100% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, 95% alcohol durante 5 minutos, 80% alcohol durante 5 minutos, lavado con agua del grifo durante 5 minutos

6. reparación de antígenos: colocar la sección en un líquido de reparación de ácido cítrico de 0,1 MOL / L y pH = 6,0, bañarse en agua hirviendo durante 20 minutos y enfriarse naturalmente durante 20 - 30 minutos después de detener el calentamiento

7. usar PBS 3 minutos y 3 veces, organizar círculos de trazos, gotear peróxido de hidrógeno e incubar durante 20 minutos

8. con PBS 3 minutos y 3 veces, gotear y sellar el suero durante 1 hora

9. secar, gotear con una concentración adecuada de una caja húmeda resistente a la humedad e incubar a 4 ° C durante la noche

10. lavar una resistencia con PBS 3 minutos x 5 veces

11. secar, dejar caer dos resistencias a temperatura ambiente y incubar en una caja de incubación durante 1 hora (preste atención a dos resistencias, 30 minutos en verano, 1 H en invierno)

12. lavar la resistencia secundaria con PBS 3 minutos x 5 veces

13. secar, gotear DAB para mostrar color, lavado de agua

14. sumulina teñida de núcleo durante 5 min (la sumulina recién configurada depende de la situación)

15. enjuague el exceso de suculenta con agua corriente y diferencie en el líquido de diferenciación durante 1 segundo.

16. enjuagar con agua corriente durante 5 min

17. rehidratación con alcohol gradiente: 80% alcohol durante 5 minutos, 95% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, 100% alcohol durante 5 minutos, xileno II transparente durante 5 minutos, xileno I transparente durante 5 minutos (si es completamente transparente, se puede prolongar adecuadamente el tiempo)

18. sello con Goma neutra

19. Microscopía

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