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Medio de cultivo especial para células INS - 1

NegociableActualización en06/11

modelo

Naturaleza del fabricante: Productores

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Descripción general

Productos relacionados con el medio de cultivo especial para células INS - 1: linfocitos esplénicos de rata células de vaina de raíces externas primarias humanas nb4 línea de células promielocíticas agudas células mononucleares de sangre periférica humana células musculares lisas del colon de rata células madre mesenquimales de sangre periférica humana BJ células madre mesenquimales de sangre periférica humana macrófagos de sangre periférica humana células tumorales de Vértebras cervicales primarias humanas

Detalles del producto

Atributos del producto:

nombre del producto	especificación	Forma del producto
Medio de cultivo especial para células INS - 1	125ml × 4	líquido

Detalles del producto:

Cuidadosamente optimizado por el equipo técnico, este producto se puede mantener después de pruebas a largo plazo.El mejor estado de crecimiento de las células INS - 1. Este producto ya contiene varios ingredientes necesarios para el crecimiento de las células INS - 1, sin necesidad de agregar ningún ingrediente, y se puede utilizar directamente en el cultivo in vitro de las células INS - 1. Este producto es solo para investigación científica adicional y no se puede utilizar para diagnóstico, tratamiento, clínica, familia y otros fines.

Descripción del producto

Forma del producto: líquido

Concentración del producto: 1 ×

Especificaciones del producto: 125ml × 4

Componentes del medio de cultivoRPMI-1640 + 10% FBS + 50 μmol / L β-mercaptoetanol + 1% P / S

Detección de bacterias: negativo

Detección de hongos: negativo

Detección de micoplasma: negativo

Experimento de crecimiento celular: las células crecen bien y tienen una morfología normal

Contenido de LPS(UE/ml): ≤3

Condiciones de almacenamiento: 2 a 8 ° c, almacenamiento protegido de la luz

Condiciones de transporte: transporte refrigerado en bolsas de hielo

validez: 3 meses

Informe experimental:

I. aislamiento y cultivo:

2. identificación por inmunofluorescencia:

1. en condiciones estériles, se extrae el tejido auricular de las ratas de SD de 1 - 3 días de edad, luego se limpia este bloque de tejido dos veces con PBS y finalmente se convertirá en aproximadamente 1 mm3;
2. añadir 4 ml de líquido digestivo enzimático (0,1% y 0,1% colagenasa tipo i) al bloque de tejido, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, luego soplar con un gotero para hacer una suspensión unicelular, precipitar y recoger el suero naturalmente, y colocar a 4 ° C después de terminar la digestión con un medio de cultivo FBS que contiene 10%;
3. añadir 3 a 4 ml de líquido digestivo enzimático al tejido restante, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, recoger el suero superior de acuerdo con el método anterior y terminar la digestión y colocarlo a 4 ° c. repetir este paso 2 - 3 veces hasta que el tejido sea digerido;
4. filtrar el líquido digestivo celular con un tamiz de acero inoxidable de 200 mallas, centrifugar 1200r / MIN durante 10 minutos, descartar el sobrenadante, precipitar las células con suspensión de medio de cultivo que contiene 10% FBS dmem / f12, inocular en un frasco de cultivo de 25 cm 2, colocarlas a 37 ° C y cultivarlas en una incubadora de CO2 al 5%;
5. después de pegar la pared a una velocidad diferencial durante 1 hora, se succiona el medio de cultivo y se inocula en una placa de 6 agujeros para continuar el cultivo de acuerdo con las necesidades del experimento;

1. cuando los miocitos auriculares crezcan hasta el 80% de fusión, abandone el medio de cultivo, lave las células 2 veces con PBS cultivados a temperatura ambiente, 10 minutos cada vez, y luego fije las células a temperatura ambiente durante 15 minutos con poliformaldehído al 4%;
2. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego penetra la película con un 0,1% de Tritón X - 100 a 4 ° C durante 15 minutos;
3. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego cierra las células con un 4% de BSA durante 30 minutos a temperatura ambiente;
4. diluir alfa - Acción un anticuerpo en una proporción de 1: 100, y luego colocarlo en un refrigerador a 4 ° C para incubar células durante la noche;
5. el PBS enjuaga las células tres veces, 10 minutos cada vez, diluye la resistencia secundaria a la alfa - Acción en una proporción de 1: 150 y las coloca durante 1 hora a 37 ° c;
6. enjuagar con PBS tres veces, 10 minutos cada vez, y finalmente observar la imagen bajo un microscopio fluorescente invertido y tomar una foto.

Protocolo de operación:
I. preparación de los medios de cultivo y las condiciones de congelación del cultivo:
1) preparar el medio de cultivo rpmi - 1640, 90%; Suero bovino fetal de alta calidad, 10%.
2) condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 ° c, humedad de la incubadora del 70% al 80%.
3) liofilizado: 90% suero, 10% dmso, listo para usar, almacenado en nitrógeno líquido.
II. tratamiento celular:
1) células de reanimación: coloque rápidamente el criostorio que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c (la superficie del agua debe estar por debajo de la tapa del criostorio) para Sacudirlo y descongelarlo, y mueva al tubo centrífuga de 15 ML preparado previamente que contiene un medio de cultivo de 4 ML para mezclar uniformemente. Centrifugar durante 4 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 1 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se trasladan a un frasco de cultivo que contiene un medio de cultivo de 5 ML para el cultivo durante la noche. Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.
2) transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de transmisión.
Para las células suspendidas, la transmisión puede referirse a los siguientes métodos:
Método 1: recoger células,1000RPM， Centrifugar a temperatura ambiente durante 5 minutos, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplarlo bien, y dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 a 1: 5.
Los productos de la compañía solo se utilizan para la investigación científica.

Dscr3 Antibody Blocking Peptide síndrome de Down proteína de región crítica 3 péptido cerrado

Dscr4 Antibody Blocking Peptide síndrome de Down proteína de región crítica 4 péptido cerrado

Dscam Antibody Blocking Peptide síndrome de Down moléculas de adhesión celular bloquean polipéptidos

Dscaml1 Antibody Blocking Peptide síndrome de Down moléculas de adhesión celular 2 bloquean el péptido

Btbd10 Antibody Blocking Peptide proteína relacionada con el metabolismo de la glucosa 1 bloquea el péptido

Gpa33 Antibody Blocking Peptide Glicoproteína 33 bloquea el péptido

Gypc Antibody Blocking Peptide Glicoproteína C péptido cerrado

Mgat5 Antibody Blocking Peptide Glicoproteína gntva péptido cerrado

La Glicoproteína lpp2 Antibody Blocking Peptide gp330 bloquea el péptido

Rbmx Antibody Blocking Peptide Glicoproteína p43 péptidos bloqueados

Gp6 Antibody Blocking Peptide Glicoproteína VI / polipéptidos bloqueados por seis Glicoproteínas

Hpx Antibody Blocking Peptide Glicoproteína beta - 1b péptidos bloqueados

Monkey platelet factor 4, PF - 4 Elisa Kit Monkey Small Board factor 4 (pf - 4 / cxcl4) Elisa kits otros kits 48 t

El receptor del factor de crecimiento celular final de Monkey vascular, vegfr - 3 / FLT - 4 kits Elisa kits receptor del factor de crecimiento de células endoteliales de mono - 3 (vegfr - 3 / FLT - 4) kits Elisa otros kits Elisa 48t

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