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IMR - 90 Fibroblasto pulmonar embrionario humano

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Descripción general

¡IMR - 90 células de Fibroblasto pulmonar embrionario humano IMR - 90, células primarias de Fibroblasto pulmonar embrionario humano | líneas celulares | líneas celulares | cepas celulares | bacterias, manejo estandarizado del Banco celular, antecedentes claros de líneas celulares proporcionados, ¡ referencias y condiciones de cultivo!

Detalles del producto

Células IMR - 90 (fibroblasto pulmonar embrionario humano IMR - 90) atcc ® CCL-186 ™ Detalles

información básica

  • Número atccEl modelo CCL-186™
  • ​ designaciónEl IMR-90
  • ​ depositantes: ww Nichols (w.w. nichols)
  • Nivel de bioseguridad: nivel 1 (bsl - 1)
  • Modo de transporte: congelado (hielo seco)
  • Características de crecimiento: crecimiento pegado a la pared (adherent)
  • Especies y géneros: personas..Homo sapiens(...)
  • Morfología: Fibroblast
  • Fuentes organizativas: pulmón (lung)
  • Estado de la enfermedad: normal (normal)
  • Tipo de célula: Fibroblast

Licencias y regulaciones

Además del Acuerdo de transferencia de materiales (mta) mencionado anteriormente, la transferencia de este material atcc puede requerir otras licencias atcc y / o regulatorias. Los usuarios que compran materiales atcc son finalmente responsables de obtener tales licencias. Para conocer los requisitos específicos para el envío a su región, haga clic aquí para consultar.

aplicación

  • Anfitrión de transfección (tecnología nucleofección para la empresa lonza).

Susceptibilidad al virus

La célula es sensible a los siguientes virus:
  • Poliovirus tipo 1 (hombre politiovirus 1)
  • Poliovirus tipo 2 (hombre politiovirus 2)
  • Varicela - virus del herpes zóster (varicella - zoster)
  • Virus del herpes simple tipo 1 (herpes simplex virus 1)
  • Virus del herpes simple tipo 2 (herpes simplex virus 2)
  • Poliovirus tipo 3 (hombre politiovirus 3)
  • Virus de la Vaccinia (vaccinia virus)
  • Citomegalovirus (humano Herpesvirus 5, cmv)
  • Virus de la estomatitis vesical (virus vesicular stamatitis)

Características moleculares

  • Inversión de la actividad de la enzima de grabación: negativo (reverse transcript: negativo)
  • Tipo de espectro de ADN Str(secuencia repetida en serie corta):
    • Amelogenina (sitio de género): X
    • CSF1PO: 11,13
    • D13S317:11,13
    • D16S539:10,13
    • D5S818:12,13
    • D7S820:9,12
    • THO1: 8,9,3
    • Tpox: 8,9
    • vWA: 16,19
  • Análisis citogenético: diploides femeninos normales (46, xx), cromosomas estables (normal Human female; diploid; estable)
  • Isozyme: glucosa - 6 - fosfato deshidrogenasa (g6pd) tipo B (iseenzymes: g6pd, b)

Fuentes y antecedentes

La línea celular IMR - 90 fue iniciada por W. W. Nichols y sus colegas.Feto femenino de 16 semanasAislado del tejido pulmonar normal, es un Fibroblasto diploide humano.
El potencial de división, la susceptibilidad al virus y otras características de esta célula se han estudiado en profundidad y pueden servir como alternativas al Wi - 38 (otra línea común de fibroblastos pulmonares humanos) y otras líneas celulares pulmonares humanas estándar.
Según los informes, las células IMR - 90 aparecieron antes del Envejecimiento.El número de multiplicaciones grupales (pdl) es de aproximadamente 58.

Condiciones de cultivo

1. medio de crecimiento completo
El medio básico es el medio esencial de Eagle (medio esencial de Eagle 's), preparado por atcc, número de artículo 30 - 2003.
Al preparar un medio completo, es necesario agregar al medio básico.10% suero bovino fetal (fbs).
2. entorno de formación
  • Atmósfera de gas: aire (95%) + dióxido de carbono (co2, 5%)
  • temperatura:37.0°C
3. subrogación
Pasos de operación:
  1. Retire y deseche el medio de cultivo antiguo.
  2. Enjuagar brevemente la capa celular con una solución de Tripsina - 0,53 mm EDTA del 0,25% (w / v) para eliminar los residuos séricos que contienen inhibidores de la tripsina.
  3. Añadir 2,0 - 3,0 ml de solución Tripsina - EDTA al frasco de cultivo y observarlo bajo un microscopio invertido hasta que la capa celular se disperse (generalmente tarda 5 - 15 minutos).
    Nota: evite sacudir o golpear el frasco de cultivo para evitar que las células se aglomeren. Las células difíciles de dispersar pueden colocarse en una incubadora a 37 ° C para acelerar la disociación.
  4. Añadir 6,0 - 8,0 ml de medio de crecimiento completo y soplar suavemente la célula para detener la digestión de la tripsina.
  5. Empaquetar la suspensión celular en un nuevo recipiente de cultivo (como una botella o placa de petri).
  6. Se cultivó en una incubadora de CO2 al 37 ° C y al 5%.
Proporción de generaciones: recomendado de 1: 2 a 1: 8 (es decir, 1 suspensión celular dividida en 2 - 8 nuevos contenedores).
Frecuencia de cambio del medio de cultivo: cambiar el medio de cultivo fresco y completo cada 3 - 4 días.
4. almacenamiento congelado (reserva)
  • Criopreservación: medio de crecimiento completo (95%) + Dimetilsulfóxido (dmso, 5%).
  • Temperatura de almacenamiento: fase de vapor de nitrógeno líquido (fase de vapor de nitrógeno líquido).

productos relacionados

  • Recomendar medios básicos de cultivo(sin suplementos adicionales ni suero): atcc 30 - 2003 (eagle 's minimum essential media).
  • Suero recomendado: atcc 30 - 2020 (suero bovino fetal).

Referencias

  1. Nichols WW, et al. Caracterización de una nueva cepa celular diploide humana, IMR-90.Ciencia196: 60-63, 1977.(PubMed: 841339)
  2. Dolganov GM, et al. Rad50 humana está físicamente asociada con Mre11 humana: identificación de un complejo multiproteico conservado implicado en la reparación de ADN recombinacional.Mol Célula Biol16: 4832-4841, 1996.(PubMed: 8756642)
  3. Ostlund RE Jr., et al. Un transportador estereoespecífico de mioinositol/D-quiroinositol en células hepáticas HepG2.J Biol Química271: 10073-10078, 1996.(PubMed: 8626564)

Otras informaciones

  • Información del Banco de células: el Banco celular del Comité de conservación de cultivos típicos de la Academia China de Ciencias (gnhu32) proporcionó la célula, que fue negativa por micoplasma, bacterias y hongos, y fue identificada como correcta por Str.
  • Restricciones de suministro: solo para uso de investigación (solo para uso de investigación).

Células IMR - 90, Fibroblasto pulmonar embrionario humano

Número ATCC®: CCL-186™

Denominaciones: IMR-90

Depósitos: WW Nichols

Nivel de bioseguridad: 1

Enviado: congelado

Medio y suero: Ver Propagación

Propiedades de crecimiento: adherente

Organismo: Homo sapiens (humano)

Morfología: fibroblasto

Fuente: Órgano: pulmón

Enfermedad: normal

Tipo de célula: fibroblasto

Permisos/Formularios: Además del MTA mencionado anteriormente, pueden requerirse otros permisos ATCC y/o reguladores para la transferencia de este material ATCC. Cualquier persona que adquiera material ATCC es la última responsable de obtener los permisos. Haga clic aquí para obtener información sobre los requisitos específicos para el envío a su ubicación.

Aplicaciones: huésped de transfección (tecnología de Nucleofección de Lonza)

Susceptibilidad al virus: Poliovirus humano 1

Poliovirus humano 2

Varicela-Zoster

Virus del herpes simple 1

Virus del herpes simple 2

Poliovirus humano 3

El virus de la vacuna

Herpesvirus humano 5

Virus de la estomatitis vesicular

Transcripción inversa: negativa

Perfil de ADN (STR): Amelogenina: X

CSF1PO: 11,13

D13S317: 11,13

D16S539: 10,13

D5S818: 12,13

D7S820: 9,12

THO1: 8,9.3

Tpox: 8,9

vWA: 16,19

Análisis citogenético: hembra humana normal; diploide; estable

Isoenzimas: G6PD, B

Edad: 16 semanas de gestación

Género: mujer

Etnicidad: Caucásico

Comentarios: La cepa de fibroblasto diploide humano IMR-90 fue derivada por W.W. Nichols y asociados de los pulmones de un feto femenino de 16 semanas. [22381]

El potencial de división, las susceptibilidades virales y otras propiedades se han estudiado a fondo de manera que la línea puede considerarse como una alternativa para WI-38 y otras cepas de células pulmonares humanas estándar.

Se ha informado de que las células son capaces de alcanzar 58 duplicaciones de población antes del inicio de la senescencia. [22381]

Propagación: medio de crecimiento completo ATCC: El medio base para esta línea celular es el medio mínimo esencial de Eagle formulado con ATCC, Catálogo n.º 30-2003. Para obtener el medio de crecimiento completo, se añaden los siguientes componentes al medio base: suero bovino fetal a una concentración final del 10%.

Atmósfera: aire, 95%; dióxido de carbono (CO2), 5%

Temperatura: 37.0°C

Subcultivo: Protocolo:

Eliminar y desechar el medio de cultivo.

Enjuagar brevemente la capa celular con solución de EDTA 0,53 mM de tripsina al 0,25% (p/v) para eliminar todas las trazas de suero que contiene inhibidor de tripsina.

Añadir de 2,0 a 3,0 ml de solución de tripsina-EDTA al matraz y observar las células bajo un microscopio invertido hasta que la capa celular se dispersa (usualmente dentro de 5 a 15 minutos).

Nota: Para evitar el agrupamiento, no agite las células golpeando o agitando el matraz mientras espera que las células se desprendan. Las células que son difíciles de separar se pueden colocar a 37°C para facilitar la dispersión.

Añadir de 6,0 a 8,0 ml de medio de crecimiento completo y aspirar las células pipetando suavemente.

Añadir alícuotas apropiadas de la suspensión celular a nuevos recipientes de cultivo.

Incubar los cultivos a 37°C.

Proporción de subdivisión: Se recomienda una relación de subdivisión de 1:2 a 1:8

Renovación media: cada 3 a 4 días

Preservación: medio de congelación: medio de crecimiento completo 95%; DMSO, 5%

Temperatura de almacenamiento: fase de vapor de nitrógeno líquido

Productos relacionados: Medio recomendado (sin los suplementos adicionales o suero descritos en Medio ATCC):ATCC 30-2003

suero recomendado: ATCC 30-2020

Referencias: 22381: Nichols WW, et al. Caracterización de una nueva cepa de células diploides humanas, IMR-90. Science 196: 60-63, 1977. PubMed: 841339

32932: Dolganov GM, et al. Rad50 humana está físicamente asociada con Mre11 humana: identificación de un complejo multiproteico conservado implicado en la reparación de ADN recombinacional. Mol. Célula. Biol. 16: 4832-4841, 1996. PubMed: 8756642

33041: Ostlund RE Jr., et al. Un transportador esteroespecífico de mioinositol/D-quiroinositol en células hepáticas HepG2. J. Biol. Química. 271: 10073-10078, 1996. PubMed: 8626564

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