Categorías de producto

Dalian jingjian Biotechnology co., Ltd.

Correo electrónico
Teléfono
Dirección
Edificio kechuang, zona de alta tecnología de Dalian 711 - 721

¿¿ qué?Contacto Ahora

Gel de agarosa bromado

NegociableActualización en05/06

modelo

Naturaleza del fabricante: Productores

Categoría de producto

Lugar de origen

Consulta en línea

Descripción general

Cnbr activado sepharose 4b $r $n gel de agarosa bromado 4b $r $n aplicación: relleno de cromatografía de afinidad $r $n embalaje: 15 gramos

Detalles del producto

Sepharose 4B activada por CNBr

Gel de agarosa bromado4B

Aplicación: rellenos de cromatografía de afinidad

Embalaje: 15 gramos, 100 gramos, 250g embalaje sólido

Para garantizar el rendimiento del producto y el funcionamiento sin preocupaciones, lea cuidadosamente este manual antes de usarlo, y si tiene alguna pregunta, consulte el soporte técnico post - venta de la compañía o el personal de ventas local (ver apéndice).

1. introducción del producto

Cnpr focuerose 4ff es un medio de purificación de flujo rápido que contiene grupos de Cianato después de la activación del bromuro de cianuro, que es adecuado para acoplar proteínas, péptidos, ácidos nucleicos y otras biomoléculas que contienen aminoácidos. Después de repetidas verificaciones en el proceso de purificación biomédica, se ha utilizado ampliamente.

Las características son las siguientes:

Amplia gama de aplicaciones,Gel de agarosa bromadoPuede ser adecuado para el acoplamiento de macromoléculas biológicas que contienen aminoácidos.

El acoplamiento multipunto es simple, flexible, rápido y eficaz, y puede mantener eficientemente la actividad biológica y la estabilidad de las biomoléculas.

Velocidad de flujo rápida, alto rendimiento y fácil amplificación.

Cuadro 1: parámetros de rendimiento dieléctrico

Matriz	Agarosa altamente reticulada al 4%
Rango de tamaño de partícula	45-165µm
Tamaño medio de las partículas	90µm
Carga combinada	30 mg (trypsingen) / ML (medio)
Estabilidad del pH	3 - 11 (a largo plazo) 2 - 11 (a corto plazo)
Caudal máximo	700 cm/h
Presión operativa	≤0.3MPa
Solución de almacenamiento	100% cetona
Temperatura de almacenamiento	4-8℃

2. condiciones de acoplamiento

A. limpieza (líquido a)

Tome una cantidad adecuada de pegamento de sedimentación (aproximadamente 1,0 ML después de completar la limpieza de 0,83 g), revuelva el Medio con cinco veces el volumen de líquido a y seque la solución después de 5 minutos. Repita este paso 5 veces.

Nota: este paso se utiliza para activar el medio, para garantizar que el volumen de limpieza del líquido a sea suficiente y que el tiempo de limpieza se fije en aproximadamente 0,5h (los grupos por encima del medio se hidrolizarán durante demasiado tiempo).

Preparación de soluciones de base

Disolver la Biomolécula a acoplarse con una solución B o reemplazarla por una solución b (la concentración de la Biomolécula es de 1 - 10 mg / ml, se recomienda 5 mg / ml).

Nota: asegúrese de que el pH y la concentración de sal al acoplarse sean consistentes con el líquido B.

C. acoplamiento

Mezcle el medio limpiado con la muestra preparada en proporciones iguales (relación de volumen) y mezcle suavemente a temperatura ambiente durante 3 - 4 horas. después de determinar el éxito del acoplamiento (determinar la eficiencia del acoplamiento determinando el contenido biomolecular antes y después del acoplamiento), seque la solución.

Nota: se recomienda acoplar 3 - 4h a temperatura ambiente. para grupos de emparejamiento inestables, se recomienda acoplar a 4 - 8 ° C durante la noche.

D. limpieza (líquido c)

El medio acoplado se vuelve a colgar con un volumen de líquido C de 5 veces antes de secar la solución. Repita este paso 3 veces más.

Nota: este paso se utiliza para limpiar las biomoléculas residuales en el medio, y la limpieza debe ser *.

E. cierre

Suspensión pesada con 5 veces el volumen de líquido c, mezclar suavemente a temperatura ambiente durante 3 - 4 horas y secar la solución.

Nota: este paso se utiliza para sellar los grupos sobre el medio, mezclándolos suavemente a temperatura ambiente durante 3 - 4 horas.

F. limpieza (líquido D y líquido e)

Suspensión pesada del medio cerrado con 5 veces el volumen de líquido D y extracción de la solución seca después de 5 minutos; Vuelva a suspender el Medio con cinco veces el volumen de líquido e y seque la solución después de 5 minutos. Repita este paso 3 veces.

Nota: este paso se utiliza para limpiar ácidos y álcalis las biomoléculas que no están suficientemente acopladas.

G. conservación

Se extrajo el medio después de la suspensión pesada con cinco veces el volumen de agua purificada, luego se extrajo el medio después de la suspensión pesada con cinco veces el volumen de etanol al 20%, y finalmente se remojó y conservó con etanol al 20%.

Nota: este paso se utiliza para conservar el Medio y evitar el crecimiento microbiano.

Preparación de soluciones

Líquido a: 0001mhcl, 0,5m nacl, ajustar el pH 3,0, conservar a 4 - 8 ° c (el líquido a debe ser preconfriado antes de su uso).

Líquido b: 0,2m nahco3, 0,5 m nacl, ajustar el pH 8,3 (si la biomolecular a acoplar es igg, pH=8.5-9.0）， Conservar a temperatura ambiente.

Líquido c: 0,1m tris - hcl, ajuste el pH 8,3 y conservar a temperatura ambiente.

Líquido d: 0,05m tris - hcl, 0,5m nacl, ajustar el pH 8,5 y conservar a temperatura ambiente.

Líquido e: o.05m Gan amoníaco, 0.5m nacl, ajustar el pH 3.5 y conservarlo a temperatura ambiente.

Líquido f: 1,0m nacl, conservado a temperatura ambiente.

3. limpieza

Después de la limpieza, se pueden eliminar algunas sustancias fuertemente vinculadas (como algunas proteínas fuertemente vinculadas, proteínas desnaturalizadas, lípidos, etc.), logrando así excelentes propiedades de los medios de restauración (como carga, movilidad, eficiencia de columna, etc.).

Se recomienda realizar una limpieza después de cada cinco usos, y la frecuencia específica de limpieza debe ajustarse de acuerdo con la limpieza de la muestra inicial purificada.

Limpieza convencional

Enjuagar con agua purificada de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar con líquido D de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar con líquido e de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar con líquido F de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar con agua purificada de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar y conservar con un 20% de etanol de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

2 limpieza violenta

Enjuagar con un limpiador no iónico del 0,2% en 2 - 5 veces el volumen de la columna y enjuagar inmediatamente con agua purificada de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Después de enjuagar con clorhidrato de guanidina de 2 - 5 veces el volumen de la columna 6m, enjuagar inmediatamente con agua purificada de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Enjuagar y conservar con un 20% de etanol de 5 - 10 veces el volumen de la columna.

Nota: la aplicabilidad de las condiciones de limpieza drástica depende principalmente de la estabilidad de las biomoléculas acopladas. antes de usar esta condición para limpiar, se recomienda hacer un pequeño experimento previo para verificar la estabilidad de las biomoléculas.

4. casos de aplicación

Caso 1

Caso 2

5. preguntas frecuentes

Cuadro 2: problemas y soluciones comunes

problema	Posibles causas	solución
Baja eficiencia de acoplamiento	1. la concentración de sal líquida B o el pH no son correctos	Detectar si la preparación de la solución B es correcta
	2. tiempo de acoplamiento insuficiente	Prolongar el tiempo de acoplamiento
	3. relleno preactivo inadecuado	Pruebe otros tipos de rellenos preactivos
El objetivo no se une al medio durante la purificación O menor cantidad de unión	1. sobrecarga de la muestra anterior	Reducir la cantidad de muestra
	2. la velocidad de la muestra es demasiado rápida	Reducir la velocidad de flujo de la muestra superior
	3. acumulación de proteínas o lípidos en medios	Limpiar el medio de manera oportuna y efectiva
	4. inactivación de la muestra durante el almacenamiento o la Alimentación	Almacenar correctamente las muestras a purificar para mantener la actividad de las muestras
	5. la proporción de combinación de base y objeto objetivo es relativamente baja.	Tratar de aumentar la concentración de coordinación durante el acoplamiento
	6. la base de emparejamiento se degrada durante el proceso de acoplamiento o limpieza	Detectar la estabilidad de la base de emparejamiento en el acoplamiento o limpieza
No se recogió el objetivo durante la elución O solo se recogen pequeñas cantidades de objetos objetivo	1. el objeto objetivo no se combina con el medio o se combina menos	Reducir la velocidad de flujo de la muestra y comprobar la capacidad de Unión del Medio
	2. condiciones de elución inadecuadas	Cambiar las condiciones de elución correspondientes o mejorar la capacidad de elución del eluido
	3. los objetos objetivo se acumulan y precipitan en condiciones de elución	Detectar la estabilidad del objetivo en condiciones de elución (concentración de sal y ph, etc.).
Baja pureza del objetivo	1. las muestras no han sido pretratadas	Las muestras deben ser centrifugadas o filtradas antes de subir a la columna.
	2. la viscosidad de la muestra es demasiado alta	Diluir la muestra adecuadamente con una solución de equilibrio para reducir la viscosidad.
	3. no lavar las impurezas	Aumentar el volumen de limpieza hasta que la línea de base sea estable y consistente con la solución de equilibrio
	4. proteínas de impurezas o lípidos se agregan y precipitan en medios	Limpiar el medio de manera oportuna y efectiva
	5. las condiciones de elución no son buenas, la velocidad de elución es demasiado rápida y el gradiente es demasiado empinado.	Ajustar las condiciones de elución
	6. degradación del objetivo	Estabilidad del objeto objetivo de detección
	7. el efecto de llenado de la columna no es bueno	Rellenar o comprar
	8. adsorción no específica de impurezas	Selección adecuada de aditivos para reducir la adsorción no específica
	9. hay un gran volumen de almacenamiento de muestras en la parte superior de la columna de separación.	Reinstalar la columna o reducir el volumen de almacenamiento de la muestra
	10. hay crecimiento microbiano en el Medio	Después de usar el medio, guarde el medio a tiempo y correctamente.
Disminución de la carga media	1. la velocidad de la muestra es demasiado rápida	Reducir la velocidad de flujo de la muestra superior
	2. las proteínas o lípidos se acumulan en los medios, lo que resulta en una disminución de la carga.	Limpiar el medio a tiempo
	3. uso excesivo, desprendimiento de la base de emparejamiento	Reconectar nuevos medios
	4. las muestras se inactivan durante el almacenamiento o la alimentación y no se pueden combinar mejor con el Grupo de emparejamiento.	Almacenar correctamente las muestras a purificar para mantener la actividad de las muestras
El Pico de cromatografía sube lentamente	El Medio está lleno y apretado.	Reinstalación de columnas
El Pico de la cromatografía arrastra la cola	El Medio está demasiado suelto.	Reinstalación de columnas
Grietas o secado en el lecho de la columna	Fugas o introducción de burbujas masivas	Comprobar si hay fugas o burbujas en la línea y reinstalar la columna
El flujo de líquido es lento	1. acumulación de proteínas o lípidos	Limpiar el medio o la película filtrante a tiempo
	2. la proteína se precipita en el Medio	Ajustar los componentes de la solución de equilibrio y la solución de elución para mantener la estabilidad del objetivo y la eficiencia de Unión del medio.
	3. crecimiento microbiano en columnas separadas	Los reactivos utilizados deben ser filtrados y desgasificados; Las muestras deben ser centrifugadas o filtradas antes de la columna superior.

6. información sobre pedidos

Cuadro 3: formulario de información de pedidos

producto	Especificaciones (ml)	Número de artículo
CNBr Focurosa 4FF	25	HZ1001-2
CNBr Focurosa 4FF	100	HZ1001-2
CNBr Focurosa 4FF	500	HZ1001-2
CNBr Focurosa 4FF	1000	HZ1001-2

Nota: para comprar productos de embalaje de gran especificación u otros productos, consulte el soporte técnico local de ventas o preventa de la compañía.

Producto similar Recomendar