El dispositivo de lavado manual de placas Elisa es una tecnología de inmunodeterminación de fase sólida de alta sensibilidad ampliamente utilizada en investigación biomédica, diagnóstico clínico y pruebas ambientales. Se utiliza principalmente para detectar proteínas específicas (como anticuerpos, antígenos), hormonas, medicamentos y otras sustancias trazables en la sangre, otros fluidos corporales o el sobrenadante de cultivo celular.
El dispositivo de lavado manual de placas Elisa es una tecnología de inmunodeterminación de fase sólida de alta sensibilidad ampliamente utilizada en investigación biomédica, diagnóstico clínico y pruebas ambientales. Se utiliza principalmente para detectar proteínas específicas (como anticuerpos, antígenos), hormonas, medicamentos y otras sustancias trazables en la sangre, otros fluidos corporales o el sobrenadante de cultivo celular.
Durante los experimentos de elisa, el dispositivo manual de lavado de placas fue una de las herramientas importantes para eliminar los reactivos no combinados para reducir las señales de fondo y mejorar la especificidad y precisión de la detección. A continuación, se detallará el papel del dispositivo de lavado manual de placas Elisa y su proceso de operación:
El papel del dispositivo de lavado manual de placas Elisa
Eliminación de sustancias no unidas: durante el proceso de elisa, los componentes no Unidos deben ser eliminados cuando la muestra es incubada con anticuerpos o antígenos envueltos en microporos. El dispositivo de lavado manual de placas asegura que todas las moléculas no Unidas se eliminan añadiendo una cierta cantidad de tampón de lavado a cada microporos y luego succionando, repitiendo el proceso varias veces.
Reducir las combinaciones no específicas: además de eliminar los reactivos no combinados, el lavado manual de placas también ayuda a reducir las posibles combinaciones no específicas. La Unión no específica se refiere a aquellos eventos de unión que ocurren sin depender de la interacción específica antígeno - anticuerpo, que aumentan el ruido de fondo y afectan la precisión del resultado final.
Mantener los microporos húmedos: en algunos casos, un lavado adecuado también puede ayudar a mantener el estado húmedo de la superficie de los microporos, que es esencial para la distribución efectiva de los reactivos y la eficiencia de respuesta en los pasos posteriores.
Proceso de operación de lavado manual de placas
Preparación de detergente: preparar un tampón de lavado adecuado de acuerdo con los requisitos específicos del laboratorio, generalmente que contenga un tampón de fosfato (pbs) o agua salada tampón tris (tbs), así como una cantidad adecuada de detergente (por ejemplo, tween 20) para mejorar el efecto de lavado.
Preprocesamiento: a veces, antes de que comience oficialmente el lavado, puede haber un paso de preprocesamiento en el que se enjuaga suavemente la placa microporosa con una pequeña cantidad de detergente, lo que ayuda a limpiar inicialmente las impurezas en el agujero.
Añadir detergente: añadir amortiguador de lavado a cada microporos de acuerdo con el volumen utilizando un pipeta multicanal o un equipo especial de lavado manual. Tenga cuidado de no dejar que el líquido se derrame en los agujeros adyacentes para evitar la contaminación cruzada.
Reposo: después de agregar el detergente, deje que permanezca en el microporos durante un período de tiempo (generalmente de 30 segundos a unos minutos) para disolver y transportar completamente las moléculas no Unidas.
Succión seca: utilice papel absorbente de agua o aspirador especial para secar el detergente en los microporos. Este proceso debe ser suave y rápido para evitar el secado de los microporos debido a la succión excesiva, pero también para garantizar que no haya líquido residual en el Fondo del agujero.
Lavado repetido: el proceso de adición de líquido y secado anterior generalmente necesita repetirse de 3 a 5 veces, dependiendo del número de veces requerido por el programa experimental. Entre cada lavado se debe garantizar el secado microporoso para evitar que el efecto de dilución afecte el efecto del siguiente lavado.
Lavado final y secado: después del último lavado, se pueden realizar pasos de secado adicionales, como invertir los microporos y golpear la espalda, o secarlos naturalmente en un papel filtrante limpio para asegurarse de que no hay líquido residual en el interior de los microporos.
Inspección: una vez completados todos los pasos de lavado, se deben revisar cuidadosamente los microporos para confirmar que no hay manchas obvias ni líquidos residuales presentes, y prepararse para los próximos experimentos.
Conclusiones
En resumen, aunque el dispositivo de lavado manual de placas de Elisa parece simple, desempeña un papel vital para garantizar el éxito de los experimentos de elisa. La ejecución correcta de los pasos de lavado de placas no solo mejorará la calidad de los datos experimentales, sino que también ahorrará tiempo y recursos, por lo que dominar esta habilidad es muy importante para las personas que trabajan en áreas relacionadas. Con el desarrollo de la tecnología, los instrumentos automatizados de lavado de placas también se han popularizado gradualmente, y pueden completar trabajos de lavado más precisos en menos tiempo, lo que mejora aún más la eficiencia y fiabilidad de los experimentos de elisa. Sin embargo, sigue siendo muy necesario comprender y dominar los métodos de lavado manual de placas, especialmente cuando no hay equipos de automatización.