Medio de cultivo especial para células c57bl / 6

Medio de cultivo especial para células c57bl / 6

El C57BL/6El medio de cultivo celular está cuidadosamente optimizado por el equipo, y después de pruebas a largo plazo, este producto se puede mantener.El C57BL/6Excelente estado de crecimiento celular.

Este producto ya está incluidoEl C57BL/6Los diversos ingredientes necesarios para el crecimiento celular, sin necesidad de añadir ningún ingrediente, se pueden utilizar directamenteEl C57BL/6Cultivo celular.

Ingredientes principales del producto:

DMEMMedio básico 400 ml

Suero bovino fetal especial 75 ml

GlutaMAX-1 de 5 ml

MEM NEAAAminoácidos no esenciales de 5 ml

Piruvato de sodioPiruvato de sodio de 5 ml

P/S de 5 ml

β-Mercaptoetanol 0,5 ml()1000X)

LIF 5μg()10ng / ml(...)

Transporte y conservación

Transporte: transporte a temperatura media y baja en cajas térmicas que contienen bolsas de hielo biológicas

保存方法： 2℃～8℃， 保存2Meses;

1) recuperaciónEl C57BL/6Células: contendrá1 mlEl criotubo de la suspensión celular está en 37Sacudir rápidamente en un baño de agua para descongelar y agregar4 mlEl medio de cultivo se mezcla uniformemente. En1000RPMCentrifugación en condiciones 4 Minutos, abandona el líquido superior y repone1-2 mlSopla bien después del medio de cultivo. A continuación, añadir todas las suspensiones celulares al frasco de cultivo para cultivar durante la noche (o añadir las suspensiones celulares)10 cmEn la placa de petri, agregue aproximadamente8 mlMedio de cultivo, cultivo durante la noche). Cambio de líquido e Inspección al día siguienteEl C57BL/6CélulasDensidad.

2) Transmisión celular: siEl C57BL/6CélulasLa densidad alcanza80% - 90%Se puede llevar a cabo el cultivo de generación en generación.

1. Abandonar el sobrenadante de cultivo y usar iones de calcio y magnesio libresPBSRunningEl C57BL/6Células1 - 2Veces.

2. más1 mlLíquido digestivo..0,25% tripsina-0,53 mM EDTA) en el frasco de cultivo, colocado 37Digestión en incubadora1 - 2Minutos y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, siEl C57BL/6CélulasLa mayoría de ellos se redondean y se caen, se recuperan rápidamente de la Mesa de operaciones, se golpean ligeramente varios frascos de cultivo y se agrega una pequeña cantidad de medio de cultivo para terminar la digestión.

3. Presionar6-8 ml/Añadir el medio de cultivo al frasco, batirlo suavemente y aspirarlo, y1000RPMCentrifugación en condiciones 4 Minutos, abandona el líquido superior y repone1-2 mlSoplar bien después del medio de cultivo.

4. Presione la suspensión celular 1:2 La proporción se divide en nuevos contenidos8 mlEn la nueva placa de Petri o en la botella del medio de cultivo.

3) Criopreservación celular: pendienteEl C57BL/6CélulasCuando el Estado de crecimiento es bueno, se puede congelar la célula. AbajoT25Las botellas son de la categoría;

1. Cuando las células se congelan, después de abandonar el medio de cultivo,PBSAñadir después de lavarlo de nuevo1 mlDespués de que la célula se redondea y se cae, se agrega1 mlEl medio de cultivo que contiene suero termina la digestión y se puede contar con una placa de recuento de sangre.

2. 4 minutos 1000rpmCentrifugar para eliminar el sobrenadante. más1 mlEl suero suspende las células y añade el suero yDMSOMezclar suavemente,DMSOLa concentración final es10%La densidad celular no es inferior1x106/ml, cada tubo de almacenamiento congelado se congela1 mlSuspensión celular, preste atención al criodepósito para hacer un buen trabajo de identificación.

3. Coloque el criodepósito en la Caja de enfriamiento del programa y póngalo en-80 Refrigerador de grado,2 Después de una hora, se transfirió al riego de nitrógeno líquido para su almacenamiento. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez.

1.usarEl C57BL/6CélulasSe debe prestar atención a la operación aséptica para evitar la contaminación.

2.Este producto contiene suero y doble anticuerpo, si no hay necesidad especial, no hay necesidad de agregar suero adicional y doble anticuerpo, se puede usar directamente.

3.Para mantener esteEl C57BL/6CélulasEl excelente efecto de uso no debe colocarse a temperatura ambiente o a una temperatura más alta durante mucho tiempo.

4.Todos los productos deben utilizarse durante la vida útil, más allá de la vida útil, deben abandonarse.

5.Este producto solo está disponible para futuras investigaciones científicas y no se puede aplicar a otros aspectos clínicos.

6.Después de la congelación y descongelación del medio de cultivo, puede haber una pequeña cantidad de floculación que se precipita sin afectar.El C57BL/6CélulasUso normal.