Criopreservación celular CP - 1 (criopreservación clínica)
· obtener la certificación de calificación de productos y materiales como la medicina regenerativa en Japón
1. los productos se promueven y aplican desde 1992
2. producción y fabricación en equipos GMP en Japón
3. se han realizado experimentos no clínicos
5. se puede congelar y conservar en un refrigerador a - 80 ° C
6. sin ingredientes de origen animal
7. composición abierta y transparente
8. tener el certificado de registro de materias primas japonesas (mf)

Ejemplo de aplicación
Método de congelación de células en suspensión I y células adherentes

II método de Criopreservación / descongelación de células madre hematopoyéticas con CP - 1hg

III。 Método de Criopreservación / descongelación con células madre mesenquimales CP - 1hg
Preparación de Criopreservación
· 1.cp - 1 de alto nivel, 25% hsa, enfriar el medio a 4 ° c.
· 2. añadir CP - 1 de alto nivel 6,8 ml, 25% HSA 3,2 ML y 10,0 ml de medio de cultivo al tubo centrífuga y mezclar uniformemente.
· 3. antes de usarlo, guarde a 4 ° c.
Criopreservación celular
· 1. recoger las células a congelar y conservar con una solución de desprendimiento y contar el número de células.
· 2. centrifugar para eliminar el sobrenadante.
· 3. añadir por adelantado CP - 1 de alta calidad / 25% HSA / medio de cultivo (preparación de Criopreservación - 2) que se ha enfriado a 4 ° C y suspender uniformemente a 1 × 106 células / ML.
· 4. coloque 1 ML cada uno en un tubo de congelación, en un recipiente de congelación y congele lentamente a - 80 ° c.
· 5. trasladarse al día siguiente al nitrógeno líquido o al congelador profundo de - 150 ° c.
Células descongeladas
· 1. preparar previamente un medio de cultivo de 9 ML en un tubo centrífuga.
· 2. retire el tubo de congelación congelado del nitrógeno líquido y derrita rápidamente en un baño de agua tibia a 37 ° c.
· 3. añadir todas las células descongeladas al medio de cultivo y centrifugarlas.
· 4. retire el sobrenadante y agregue una cantidad adecuada de medio de cultivo.
· 5. cultivo en las mejores condiciones para cada tipo de célula utilizada.
Resultados de la evaluación IV (criopreservación de células madre mesenquimales)
V Criopreservación y evaluación de células IPS / es con CP - 1hg
Ⅰ.Método de congelación de células suspendidas y células adheridas
La CP-1®Alto gradofríoCongelaciónguardar/ soluciónCongelaciónTronco hematopoyéticoDetalleEl método de los compatriotasIII. CP-1®Alto gradoAplicado entreRecargarCalidadsecoDetalleEscalofríos celularesCongelaciónguardar/ soluciónCongelaciónFangLey
Preparación de Criopreservación
· 1.cp - 1 de alto nivel, 25% hsa, enfriar el medio a 4 ° c.
· 2. añadir CP - 1 de alto nivel 6,8 ml, 25% HSA 3,2 ML y 10,0 ml de medio de cultivo al tubo centrífuga y mezclar uniformemente.
· 3. antes de usarlo, guarde a 4 ° c.
Criopreservación celular
· 1. recoger las células a congelar y conservar con una solución de desprendimiento y contar el número de células.
· 2. centrifugar para eliminar el sobrenadante.
· 3. añadir por adelantado CP - 1 de alta calidad / 25% HSA / medio de cultivo que se ha enfriado a 4 ° c (preparación de Criopreservación - 2),
Suspensión uniforme a 1 × 106 células / ML.
· 4. coloque 1 ML cada uno en un tubo de congelación, en un recipiente de congelación y congele lentamente a - 80 ° c.
· 5. trasladarse al día siguiente al nitrógeno líquido o al congelador profundo de - 150 ° c.
Células descongeladas
· 1. preparar previamente un medio de cultivo de 9 ML en un tubo centrífuga.
· 2. retire el tubo de congelación congelado del nitrógeno líquido y derrita rápidamente en un baño de agua tibia a 37 ° c.
· 3. añadir todas las células descongeladas al medio de cultivo y centrifugarlas.
· 4. retire el sobrenadante y agregue una cantidad adecuada de medio de cultivo.
· 5. cultivo en las mejores condiciones para cada tipo de célula utilizada.
Ⅳ.ComentarioprecioNudoFruta..SalaRecargarCalidadsecoDetalleEscalofríos celularesCongelaciónguardar(...)
¿[objetivo] ¿ en cuanto a las células madre mesenquimales humanas (hmscs), que se espera que se utilicen en medicina regenerativa en el futuro, pueden congelarse y conservarse en el alto nivel de CP - 1 y pueden transportarse de manera estable y a largo plazo a través de hielo seco barato y conveniente?
[método] las células madre mesenquimales (msc - at) de origen grasa humana o las células madre mesenquimales (msc - bm) de origen médula ósea humana fueron congeladas en CP - 1high grade o en el control (a en la imagen de abajo) (1 x 106 células) / ml) y almacenadas en tanques de nitrógeno líquido. Después de almacenarse en un tanque de nitrógeno líquido, se debe almacenar para confirmar la tasa de adhesión a los vasos sanguíneos (tasa de adhesión = número de células vivas / número de células vivas vacunadas) en cada condición, suponiendo el transporte de hielo seco (- 80 ° C · 7 días, - 60 ° C · 3 días, 60 ° C · 7 días), supervivencia inmediata después del derretimiento y cultivo al día siguiente.
[resultado] en todas las condiciones, la supervivencia tras el deshielo fue superior al 90% y no se observaron diferencias (figura B a continuación). sin embargo, en el hcms congelado como control se observaron muchas células muertas que no se adhirieron a la incubadora al día siguiente del deshielo cuando se almacenaron a - 60 ° c, pero en el hcms congelado en CP - 1 apenas se observaron células muertas y apenas se observaron todas las células muertas. Conecta las células (b y c en la siguiente imagen).
[conclusión] debido a que la temperatura del hielo seco en sí es de aproximadamente - 80 ° c, creemos que el hcms congelado en CP - 1high grade puede ser transportado de manera estable y a largo plazo con hielo seco.