Detección de proliferación celular y toxicidad en el kit cck - 8 de solebao

Solarbio/Solebao CA1210 CCK-8Kit(Kit de detección de proliferación celular y toxicidad(...)

Detección de proliferación celular y toxicidad en el kit cck - 8 de solebao

Número del producto:CA1210

Nombre del producto:CCK-8Kit(Kit de detección de proliferación celular y toxicidad(...)

Especificaciones del producto:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

Perfil del producto:

CCK-8Kit(Kit de detección de proliferación celular y toxicidad(...)

Los parámetros del producto específico se basan en los parámetros recibidos de las instrucciones del producto.

Especificaciones:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T

Condiciones de almacenamiento:4℃ sellado para evitar la luz

Kit de conteo de células-8AbreviaturaCCK-8Kit, paraMTTLa alternativa a la ley es unaWST(sal de tetrazol soluble en agua, nombre químico:2 - - (2 -Grupo metoxi- 4 -Nitrobenceno) - 3 - (4 -Nitrobenceno) - 5 - (2,4 -Disulfonbenceno)-2H-La sal monosódica de tetrazol (thz) es ampliamente utilizada en kits de detección rápidos y de alta sensibilidad para la proliferación celular y la citotoxicidad. Se puede utilizar en la detección de medicamentos, la determinación de la proliferación celular, la determinación de la citotoxicidad, la sensibilidad a los medicamentos oncológicos y otros ensayos.

Instrucciones de uso:
I. hacer una curva estándar (al determinar el número específico de células (al determinar el número específico de células)
1Primero se cuenta el número de células en la suspensión celular preparada con una placa de recuento celular, y luego se inoculan las células.
2, diluir proporcionalmente en un gradiente de concentración celular con la misma proporción del medio de cultivo, generalmente se debe hacer3 - 5Gradiente de concentración de células individuales, por grupo3 - 6Un agujero complejo.
3Después de la vacunación, se cultiva hasta que la célula se adhiere a la pared y luego se agregaCCK-8Determinación después de un cierto tiempo de cultivo del reactivoODValor, haciendo una barra con el número de células como coordenadas horizontales..XEje,ODEl valor es una coordenada vertical..YLa curva estándar del eje). De acuerdo con esta curva estándar, se puede determinar el número de células de muestras desconocidas (la premisa para probar esta curva estándar es que las condiciones del experimento sean consistentes, lo que facilita la determinación del número de células vacunadas y la adición.CCK-8Tiempo de cultivo posterior. (...)

II. detección de la actividad celular

1, en 96 Inoculación de suspensión celular en la placa de foramen100µL/Kong). Precultivar la placa de cultivo en una incubadora (en37℃, 5% de CO2En condiciones).

2, añadir a cada agujero10µL CCK-8Solución (tenga cuidado de no generar burbujas en el agujero, pueden afectarODLectura del valor).

3Incubar la placa de cultivo en la incubadora1 - 4Horas.

4, determinado con un medidor de estándar enzimático en450 nmAbsorción en.

5, si no se determina por el momentoODEl valor, si se planea determinar más tarde, se puede agregar a cada agujero.10µL 0.1MdeHClo1% SDS (W/V)Solución y cubrir la placa de cultivo para evitar la luz y conservarla a temperatura ambiente. En 24 La absorción no cambiará durante las horas.

III. valor añadido celular-Detección de toxicidad

1, en 96 Configuración en la placa de agujero100 µLSuspensión celular. Precultivar la placa de cultivo en la incubadora 24 Horas (en37 ℃,5% de CO2En condiciones).

2, añadir a la placa de cultivo10µLDiferentes concentraciones de sustancias a medir. Incubar en una incubadora durante un tiempo adecuado (por ejemplo:6、12、24 O 48 Horas).

3, añadir a cada agujero10 uL de CCK-8Solución (tenga cuidado de no generar burbujas en el agujero, pueden afectarODLectura del valor). Si la sustancia a medir es oxidable o reductora, se puede agregarCCK-8Anteriormente, se cambió el medio fresco (se eliminó el Medio y se lavó la célula dos veces con el medio, y luego se agregó el nuevo medio) para eliminar los efectos del medicamento.

4Incubar la placa de cultivo en la incubadora1 - 4Horas.

5, determinado con un medidor de estándar enzimático en450 nmAbsorción en.

6, si no se determina por el momentoODEl valor, si se planea determinar más tarde, se puede agregar a cada agujero.10µL 0.1MdeHClo1% SDS (W/V)Solución y cubrir la placa de cultivo para evitar la luz y conservarla a temperatura ambiente. En 24 La absorción no cambiará durante las horas.

Cálculo de la vitalidad:.

Vitalidad celular (%)=[A(Añadir medicamentos(...)- -A(vacío))/.[ A(0Añadir medicamentos(...)- -A(vacío)] x 100

A(medicamentos añadidos): con células,CCK-8Absorción de poros de soluciones y soluciones farmacéuticas

A(en blanco): con medios de cultivo yCCK-8Absorción de una solución sin poros celulares

A（0 Medicamentos añadidos): con células,CCK-8Absorción del agujero de la solución sin solución farmacéutica

Vitalidad celular: vitalidad proliferativa celular o vitalidad citotóxica

Precauciones:

①Se recomienda hacer varios agujeros primero para explorar el número y la adición de células vacunadas.CCK-8Tiempo de cultivo después del reactivo.

②Los glóbulos blancos pueden necesitar ser cultivados durante mucho tiempo.

③Cuando se utilizan los estándares 96 En el foramen, la cantidad mínima de inoculación de las células adheridas es de al menos1, 000un/.agujero(100 µLMedio de cultivo(...). la sensibilidad al detectar glóbulos blancos es relativamente baja, por lo que la dosis recomendada no es inferior2.500un/.agujero( 100 µLMedio de cultivo(...). Si se quiere usar 24 Placa de agujero o 6 Para el experimento de la placa de agujero, primero calcule la cantidad de vacunación correspondiente a cada agujero y de acuerdo con el volumen total del medio de cultivo de cada agujero.10%unirseCCK-8Solución.

④Si no450 nmFiltro, se puede utilizar la absorción en430-490 nmFiltro entre, pero450 nmLa sensibilidad de detección es la más alta.

⑤La absorción del rojo fenol en el medio de cultivo se puede eliminar al calcular deduciendo la absorción del Fondo en el agujero en blanco, por lo que no afectará a la detección.

Detección de proliferación celular y toxicidad en el kit cck - 8 de solebao

Información sobre pedidos de productos:

CA1210 CCK-8Kit(Kit de detección de proliferación celular y toxicidad(...) 100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T