Introducción

El sulfato de Neomicina es un antibiótico aminoazucarado de varios componentes aislado de los metabolitos de la estreptomicina fradiae. tiene un amplio espectro antibacteriano y un fuerte efecto. debido a su fuerte toxicidad auricular y renal, se utiliza clínicamente para uso externo y oral. La API de sulfato de Neomicina está incluida en la farmacopea nacional y extranjera.[1 - 5].

La edición 2025 de la Farmacopea China se implementará a partir del 1 de octubre de 2025. En esta revisión de la farmacopea, se añadieron nuevas pruebas de sustancias relevantes para regular los límites de la neomicina, la Neomicina a y otras impurezas. El método es la Cromatografía líquida de alto rendimiento, que utiliza una columna C18 para separar los componentes anteriores, la fase móvil es una solución de ácido trifluoroacético / ácido pentafluoropropiónico / hidróxido de sodio, y el detector es un detector de amperios pulsados.[6]. Cuando esta condición de cromatografía funciona en un cromatógrafo líquido, a menudo hay los siguientes problemas:

1. el sistema es inestable, la sensibilidad disminuye gradualmente y la reproducibilidad es pobre;

2. la eficiencia de la columna disminuye rápidamente y la vida útil de la columna cromatográfica es corta;

3. la fase móvil contiene reactivos de alta sal e pares de iones, lo que plantea desafíos para su uso combinado con la espectrometría de masas.

Como proveedor de servicios en el campo de los servicios de análisis científico, semerfei proporciona soluciones de cromatografía iónica para todo el proceso de este método para los problemas anteriores. El esquema incluye el camino de flujo de cromatografía iónica, la fase móvil, la columna, el detector, la espectrometría de masas y el software profesional de procesamiento de datos de todo peek. Desde la preparación de la fase móvil, la reproducción del método, la cuantificación y caracterización de las impurezas, se ofrece un servicio de ventanilla única para ayudar a los clientes a hacer frente fácilmente a los desafíos planteados por el nuevo proyecto de la farmacopea.

Figura 1. estructura de la Neomicina y sus impurezas

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Instrumentación y condiciones cromatográficas

Instrumento: dionex ™ Sistema de cromatografía iónica ICS - 6000, que contiene doble bomba, incubadora de columna y muestreador automático As - AP

色谱柱: Thermo Dionex™ IonPac™ AmG C18 (4 x 150 mm, 3 μm, PN 302693)

Fase móvil: solución de ácido trifluoroacético al 2% (contiene 0,01% de ácido pentafluoropropiónico y 0,6% de hidróxido de sodio al 50%)

Caudal: 0. 8 mL /min

Temperatura de la columna: 25 ℃;

Lejía posterior a la columna: 50% de solución de NaOH diluida 25 veces

Velocidad de flujo de la solución detrás de la columna: 0. 3 mL /min

Cantidad de muestra: 25 μl

Detector: detector de amperios pulsados, potencial de detección de cuatro ondas

Electrodos de trabajo: electrodos de oro de 3 mm (pn 063723)

Electrodos de referencia: electrodos de referencia AG / agcl1 (pn 061879)

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Cromatógrafo

Figura 2. mapa de la separación de sustancias relacionadas con el sulfato de Neomicina por columna cromatográfica AMG C18[7](haga clic para ver la imagen grande)

La columna AMG C18 es una columna desarrollada por semerfei para antibióticos aminoglucósidos. se puede separar mejor la Neomicina b, la Neomicina C y cada impurezas. el pico principal es simétrico y se pueden separar 13 componentes de la Neomicina sulfato.

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El rango lineal de la Neomicina b, la Neomicina C y la Neomicina se muestra en la siguiente tabla [7]

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Repetibilidad [7]

Se tomaron seis muestras de sulfato de Neomicina del mismo número de lote para determinar de acuerdo con el método anterior, con un total de impurezas RSD (n = 6) del 1,10%, y la repetibilidad del método fue buena.

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Identificación estructural de impurezas desconocidas en combinación con ms

Los reactivos de par de iones como el ácido trifluoroacético, el ácido pentafluoropropiónico y el ácido heptafluorobutírico son fases móviles comunes en el análisis de antibióticos aminoglucósidos. Con la ayuda de reactivos de pares de iones, las sustancias antibióticos Aminoglucósidos con estructuras similares pueden separarse satisfactoriamente en la columna c18. Si es necesario realizar un análisis de espectrometría de masas de antibióticos glucosídeos, es necesario desalar la fase móvil. El inhibidor catiónico puede eliminar eficazmente los iones negativos de la fase móvil.

Figura 3. combinación IC - MS / MS para la caracterización de impurezas de antibióticos glucosídeos

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resumen

El sistema de análisis de antibióticos aminoglucosídeos lanzado por semerfei no solo puede satisfacer las necesidades de detección de sulfato de Neomicina y sulfato de etimicina en la Farmacopea china, sino que también es adecuado para antibióticos detectados por el método Clar - PAD en otras Farmacopeas como USP y ep, como sulfato de qingdamicina, sulfato de amikacina, clorhidrato de macromicina, etc. El programa tiene las siguientes ventajas:

La columna AMG C18 tiene una buena separación, puede tolerar la fase móvil convectiva de iones de bajo pH y tiene una vida útil más larga;

El sistema de cromatografía iónica ICS 6000, el material Peek de flujo completo, garantiza la estabilidad del sistema;

El detector de amperios y el electrodo de oro propios del ics6000 tienen una sensibilidad súper alta a los antibióticos amoniacales;

Desalinización fácil para satisfacer las necesidades de espectrometría de masas.

Temas interactivos:

¿¿ cuáles son sus dudas sobre la determinación del sulfato de Neomicina y los antibióticos aminoazucarados? ¿¿ o qué opinas de la tecnología HPP - pad? ¡¡ bienvenido a dejar un mensaje en el área de comentarios para discutir!

Referencias:

1. segunda parte de la edición 2020 de la Farmacopea China

2. European pharmacopeia 9.0: Volume III (farmacopea Europea 9.0: volumen 3) [s]

3. the International pharmacopoeia (quinta edición de la Farmacopea internacional) [s]

4. The United States Pharmacopeial40-The National Formulary 35: volume III( Farmacopea de los Estados Unidos 40 - Colección Nacional de recetas 35: volumen 3 [s]

5. Japanese pharmacopeia XVII (edición 17 de la receta de la farmacia) [s]

6. segunda parte de la edición de 2025 de la Farmacopea China

7. Zhang qian, Huang minwen, FANG Wang, Etc. Determinación del contenido de sulfato de Neomicina y sus sustancias relacionadas por el método Clar - PAD [j] Journal of China Pharmaceutical university, 2019,50 (02): 193 - 199.

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