El sistema de gestión de disolventes del sistema de Cromatografía líquida es responsable de proporcionar una fase móvil adecuada, y la comunicación de flujo a menudo se mezcla con una variedad de disolventes, como metanol, nitrilo, agua, etc. Diferentes muestras y necesidades de separación requieren diferentes composiciones y fases móviles. Por ejemplo, en la Cromatografía líquida de fase inversa, la fase móvil puede afectar el orden de elución de los componentes, y cuanto más débil sea la capacidad de elución de los componentes. La bomba desempeña un papel clave en el sistema de gestión de disolventes, que puede transportar fases móviles de manera continua y estable para garantizar el buen desarrollo del proceso de cromatografía. Las bombas comunes son bombas binarias y cuádruple, que pueden mezclar y transportar cuatro disolventes, lo que puede ajustar la composición de la fase móvil con más flexibilidad.
El sistema de inyección de muestras es responsable de introducir las muestras a analizar en la columna cromatográfica. Necesita controlar con precisión la cantidad de muestras inyectadas para garantizar la precisión y repetibilidad de los resultados del análisis. Los sistemas modernos de Cromatografía líquida generalmente utilizan muestreadores automáticos, que pueden extraer e inyectar muestras con precisión de acuerdo con procedimientos preestablecidos para mejorar la eficiencia del análisis.
El núcleo del sistema de separación es la columna cromatográfica, que está llena de fases fijas específicas. Hay varios tipos de fases fijas, como silicona y unión, y diferentes tipos de fases fijas son adecuados para el análisis de muestras de diferentes propiedades. Durante el proceso de cromatografía, la muestra se distribuye constantemente entre la fase fija y la fase móvil, y los componentes se separan gradualmente debido a las diferentes fuerzas con las dos fases.
El sistema de detección se utiliza para monitorear y determinar los componentes después de la separación. Los detectores comunes son detectores ultravioleta, detectores de fluorescencia, etc. Los detectores ultravioleta analizan cuantitativamente los componentes midiendo la absorción de rayos ultravioleta de una longitud de onda específica por las muestras, y son ampliamente utilizados; El detector de fluorescencia se basa en las características de fluorescencia de la muestra y tiene una alta sensibilidad.
El sistema de procesamiento de datos se encarga de recoger, procesar y analizar las señales emitidas por el detector. Puede registrar el tiempo de retención del pico, la altura del pico, el área del pico y otra información, y determinar el contenido y la pureza de los componentes de la muestra comparando con el estándar o utilizando el software relevante para calcular.
Método de verificación del sistema de cromatografía líquida:
1. inspección de apariencia e integridad:
Comprobar si todos los componentes están completos, incluyendo bombas de infusión, muestreadores, columnas cromatográficas, detectores, etc., y si la apariencia está dañada, deformada, corroída, etc.
Comprobar si cada tubería de conexión está intacta, sin daños, envejecimiento, fugas y otros problemas, y asegurarse de que la tubería esté estrechamente conectada.
2. inspección funcional:
- bomba de infusión: abra la bomba de infusión para comprobar si funciona correctamente, si hay ruido o vibraciones anormales. Compruebe si la pantalla de presión de la bomba es normal y si puede funcionar de manera estable dentro del rango de presión establecido. Al mismo tiempo, verifique la función de ajuste de velocidad de la bomba para ver si se pueden establecer y estabilizar con precisión diferentes velocidades de flujo de salida.
- muestreador: para el muestreador manual, verifique si funciona sin problemas, si la aguja de inyección está bloqueada o dañada y si la precisión de la inyección cumple con los requisitos. Para el muestreador automático, además de comprobar el Estado de la aguja de inyección, también debe comprobar si su orden de inyección, precisión y repetibilidad de la cantidad de inyección son normales.
Detector: los diferentes tipos de métodos de verificación de detectores son diferentes. Por ejemplo, el detector ultravioleta, compruebe si su fuente de luz brilla normalmente y si el ajuste de la longitud de onda es preciso; El detector de fluorescencia debe comprobar si la configuración de la longitud de onda de excitación y la longitud de onda de emisión es precisa, si la sensibilidad es normal, etc. Al mismo tiempo, se verifica si la línea de base del detector es estable, si hay ruido anormal o deriva.
- columna: compruebe si la apariencia de la columna está dañada y si la conexión de la columna está intacta. Compruebe si la identificación de la columna es clara, incluyendo la longitud de la columna, el diámetro interior, el tipo de relleno y otra información.
3. prueba de adaptabilidad del sistema:
- determinación teórica del número de placas de torre: selección de sustancias de referencia adecuadas, como el naftaleno, etc., para preparar una solución de cierta concentración y análisis de muestras en las condiciones cromatográficas prescritas. De acuerdo con el tiempo de retención y la mitad de la altura y el ancho del pico cromatográfico, se calcula el número teórico de placas de torre para evaluar la eficiencia de separación de la columna.
- determinación de la separación: análisis de separación en condiciones cromatográficas seleccionadas utilizando una solución estándar mixta que contenga múltiples componentes. Al medir el tiempo de retención, el ancho del pico y otros parámetros de los dos componentes adyacentes, se calcula el grado de separación y se verifica si la capacidad de separación del sistema de los diferentes componentes cumple con los requisitos.
- prueba de repetibilidad: inyección sucesiva de la solución estándar de la misma concentración, observando la consistencia de los parámetros de tiempo de retención, área de pico o altura de pico de cada inyección para evaluar la repetibilidad del sistema.