1. varios conceptos en la cromatografía de gases:

Cromatografía de gases:

Una técnica de separación que utiliza gas como fase móvil para lograr la separación de muestras complejas en función de las diferencias en la distribución de fuerzas como la adsorción entre los componentes y la fase fija. El objeto de separación es una muestra volátil, térmica y estable, con un punto de ebullición generalmente no superior a 500 grados.

Gas:

Gas portador - Gas utilizado para transportar muestras a través de todo el sistema.

Gas Detector - el gas de apoyo necesario para algunos detectores, como, FID。

Introducción de la muestra:

El proceso de introducir el vapor de la muestra en el gas portador. El proceso debe tener un impacto menor en el vapor de la muestra.

Columna cromatográfica:

Lograr la separación de los componentes de la muestra.

Detector:

Los componentes de la muestra de la columna de salida convectiva se identifican y responden.

Adquisición de datos:

Convertir la señal del detector en un gráfico de espectro para análisis cualitativos y cuantitativos manuales o automáticos.

¿2. ¿ por qué se utilizan trampas de gas en el camino del gas? ¿¿ qué tipo de trampas hay en el gc?

Los contaminantes comunes en el gas portador de GC son el agua, el oxígeno, los compuestos de hidrocarburos y los halógenos, que tienen un gran impacto en la vida útil de la columna y en la detección del analizado, y los efectos adversos incluyen:

水分：

Es una causa común de degradación de la fase fija de la columna cromatográfica; Puede dañar el instrumento;

Oxígeno:

Contaminantes comunes; Es una causa común de la degradación de la fase fija de la columna cromatográfica y la disminución del rendimiento del revestimiento de la entrada de la muestra; Puede causar inestabilidad y descomposición del objeto analizado;

Compuestos de hidrocarburos y halógenos:

Reducir la sensibilidad del detector aumentando el ruido de fondo del detector; También puede causar deriva o fluctuación de la línea de base, picos de cromatografía de contaminantes, ruido o alta compensación de la línea de base.

Las trampas de captura de agua, oxígeno e hidrocarburos son trampas utilizadas en el GC.

¿3. ¿ qué tipo de trampas deben equiparse a diferentes detectores?

Fid, npd, FpD - aire, soplado de cola, hidrógeno → trampa de captura de hidrocarburos (por ejemplo, 5060 - 9096)

Fid, npd, fpd, TCD - gas portador → trampa de agua y oxígeno (por ejemplo, ot3 - 2)

ECD - soplado de cola → trampa de captura de agua y oxígeno (por ejemplo, ot3 - 2)

TCD - gas de referencia → trampa de captura de hidrocarburos (por ejemplo, 5060 - 9096)

MSD - helio, metano → trampas combinadas para la eliminación de agua, oxígeno e hidrocarburos (por ejemplo, rmsh - 2) y trampas indicadoras de oxígeno (por ejemplo, IOT - 2 - hp)

Se recomienda cambiar las trampas anteriores de 6 a 12 meses, dependiendo de la frecuencia de uso de los clientes.

¿4. ¿ cuáles son los consumibles involucrados en la entrada de la muestra de gc?

Jeringa, almohadilla de entrada de muestra, anillo o 5188 - 5365, tubo de revestimiento, placa plana plana plana (junta dorada), Junta metálica 5061 - 5869, Junta de grafito, tuerca de columna.

¿5. ¿ por qué reemplazar la almohadilla de separación de muestras? ¿¿ cuáles son los tipos de almohadillas? ¿¿ cómo elegir la almohadilla de muestreo de acuerdo con las necesidades del cliente?

Las almohadillas deben reemplazarse regularmente para evitar: fugas de aire, descomposición, pérdida de muestras, disminución del flujo de columna o desviación, pico fantasma y disminución de la eficiencia de la columna. Las diferentes almohadillas de aislamiento tienen diferentes propiedades:

Aislamiento de optimización de pérdidas y temperatura (bot): 5183 - 4757

Amplio rango de temperatura, baja pérdida → adecuado para la espectrometría de masas, la temperatura alta de la entrada de la muestra es de 400 grados, lo que reduce la adherencia en la entrada de la muestra.

Almohadilla de larga vida 5183 - 4761

Preperforación, prolongación de la vida útil y reducción de la formación de núcleos; Se prefiere una almohadilla de separación para la inyección automática de muestras, que es adecuada para funcionar toda la noche; Las muestras se inyectan 400 veces y a alta temperatura de 350 grados.

Almohadilla verde 5183 - 4759

Los tres tipos de almohadillas de aislamiento anteriores son almohadillas de aislamiento avanzadas, tratadas con plasma, sin almohadillas de aislamiento pegajosas.

Espaciador universal:

Temperatura de 350 grados, 200 veces, ahorro económico;

¿6. ¿ cómo elegir la almohadilla de grafito y la tuerca de la columna?

Primero conozca los dos materiales de la almohadilla de grafito:

Grafito → el material es suave y el límite superior de temperatura es alto.

Vespel → hecho de poliimida resistente a altas temperaturas, el material es duro y se pierde a altas temperaturas.

Almohadilla de grafito y tuerca de columna:

Las almohadillas cortas están equipadas con sombreros cortos y las almohadillas largas están equipadas con sombreros largos (por ejemplo, las tuercas de la columna de interfaz Ms 05988 - 20066 deben estar equipadas con un 85% de vespel pre - envejecimiento, un 15% de almohadillas largas de grafito, las tuercas de la columna universal pueden estar equipadas con un 85% de vespel, un 15% de almohadillas cortas de grafito)

La selección de la almohadilla de grafito (debe basarse en el material y el tamaño del diámetro interior de la columna cromatográfica), la frecuencia de reemplazo generalmente se reemplaza cuando la columna cromatográfica se filtra.

¿7. ¿ cuál es el papel del revestimiento y cuándo se reemplazará el revestimiento? ¿¿ qué factores deben tenerse en cuenta al elegir el revestimiento?

El revestimiento es el componente central del sistema de inyección de muestras, donde las muestras se evaporan en gas. El cambio regular de la camisa depende principalmente de las siguientes situaciones: en comparación con el espectro anterior; El grado de limpieza de la muestra; Si hay anomalías en los picos cromatográficos: picos fantasmas, cambios en la forma de los picos, poca reproducibilidad, descomposición de muestras a alta temperatura, etc.

Factores a tener en cuenta en la selección de la tubería de revestimiento: tipo de entrada / tecnología de entrada de muestra, volumen de la tubería de revestimiento, tratamiento o inactivación de la tubería de revestimiento, propiedades especiales (algodón de cuarzo, Copa de cuarzo, cono de diámetro fino, etc.)

¿8. ¿ por qué se utilizan forros desactivados y algodón de vidrio? ¿¿ qué sustancia se utiliza para vivir el revestimiento sin algodón de vidrio?

El punto activo en el revestimiento de la entrada de la muestra puede absorber los componentes de la muestra, causando que el pico de cromatografía arrastre la cola y pierda sensibilidad y reproducibilidad.

Al no desviar la muestra y analizar compuestos ligeramente polares, se debe recomendar el uso de un revestimiento desactivado.

Uso de algodón de vidrio:

Reducir la discriminación térmica y proporcionar una superficie suficiente para la volatilización de la muestra *.

Capturar componentes no volátiles y detritos de aislamiento para que no entren en la columna

Limpiar las muestras de la aguja de la jeringa, mejorando así la reproducibilidad y evitando los residuos de las muestras en el cojín.

Los compuestos utilizados para desactivar el revestimiento de algodón de vidrio son: fenoles, ácidos orgánicos, pesticidas, aminas, drogas abusivas, compuestos polares reactivos, compuestos termoinestables.

Modo de inyección sin desviación: análisis de trazas, baja concentración de muestras, baja velocidad de flujo y pequeña cantidad de inyección.

Modo de inyección de desviación: alta concentración de la muestra, gran velocidad de flujo y gran cantidad de inyección.

9. anillos o de fluorocarbonos y anillos o de grafito

Anillo o de fluorocarbonos: no es fácil de deformar, fácil de reemplazar, se utiliza en la mayoría de los casos

Anillo o de grafito: fácil de deformar y pelar, utilizado cuando la temperatura de la entrada de la muestra es superior a 350 grados.

Frecuencia de cambio: los dos generalmente cambian el anillo o al mismo tiempo que cambian el revestimiento.

10. Cómo limpiar la placa de desviación (junta dorada)

Limpiar y secar por ultrasonido en un disolvente;

B. desactivación con reactivos de Alquilación no clorosilícicos: hmds (hexametildisilano) o bstfa (n, o bis (* sililaalquilo base) o BSA (n, o - bis (* sililaalquilo base) acetamida) o tsim, Tsim (n - * sililamizol base)

Limpiar con disolvente, primero lavar inerte - tolueno, luego limpiar con alcohol - metanol, secar.

¿11. cuáles son los detectores de npd, ecd, tcd, FID y FpD y cuáles son las características de rendimiento?

¿12. ¿ cuáles son los parámetros de la columna de la columna? ¿¿ cómo seleccionar columnas para clientes en función de estos parámetros?

Parámetros de la columna cromatográfica: fase fija, longitud de la columna, diámetro interior, espesor de la película.

Selección de la fase fija: principio de disolución similar.

¡Columna polar no / débil - ¡ comúnmente utilizada! Columna polar media - adecuada para separaciones complejas / difíciles; Columna polar fuerte - se utiliza principalmente para aplicaciones especiales.

Longitud de la columna:

Análisis rápido de muestras simples de menos de diez componentes por lo general de 10 a 15 m

La longitud estándar de la columna de 25 a 30 m satisface la mayoría de las aplicaciones.

Análisis de muestras complejas de 50m, 60m y 100m

Diámetro interior:

La columna rellena reemplazable de gran calibre de 0,53 MM puede soportar la inyección de muestras de gran volumen y el análisis de trazas.

Diámetro ancho de 0,32 mm, desviación / no desviación de la muestra, puede soportar la inyección de muestra de gran volumen

Muestra de desviación de diámetro estrecho de 0,25 mm, aplicación de GC / ms, alta eficiencia de columna

Separación rápida de alta eficiencia de columna con un diámetro de 0,18 mm

GC rápido de 0,10 mm, separación rápida requiere instrumentos altos

Espesor de la película:

Película de 0,10 um, baja capacidad de retención y columna, adecuada para compuestos de alto punto de ebullición, muestras densas de componentes o compuestos sensibles al calor de 0,25 a 0,50 um espesor de película estándar ampliamente utilizado

La retención de película gruesa de 1,0 a 10,0 um y la alta capacidad de la columna son adecuadas para compuestos volátiles de bajo punto de ebullición.

La película gruesa es propicia para ocultar el sitio activo, pero la pérdida de la columna es mayor a altas temperaturas.

¿13. ¿ qué significa el límite de temperatura de la columna cromatográfica como 60 ° C a 240 ° C / 260 ° c?

60 ° C - límite inferior de la temperatura, por debajo de esta temperatura, el efecto de la columna se reducirá, pero no dañará la columna.

240 ℃ - límite superior de temperatura constante, que se puede usar durante mucho tiempo aquí.

260 ° C - límite superior de la temperatura de calentamiento programada, no se puede exceder esta temperatura, y no se debe usar más de 10 minutos en esta temperatura.

14. comprender varios parámetros de la columna de Cromatografía líquida y el alcance de la clasificación y aplicación de la columna de cromatografía de agilent.

Superficie - la suma de la superficie exterior de la partícula y la superficie del agujero interior, expresada en m2 / gram;

La Alta superficie tiene una fuerte capacidad de retención, capacidad de columna y grado de separación para la separación de muestras de varios componentes;

Los rellenos con baja superficie a menudo pueden alcanzar rápidamente el Estado de equilibrio, lo que es particularmente importante para la elución gradiente.

Tamaño del agujero - tamaño promedio del agujero o cavidad de la partícula, rango 60 - 10000

Las partículas de relleno de agujeros grandes pueden prolongar el tiempo de retención de moléculas grandes de solutos en la superficie del relleno, lograr una separación completa y mejorar la forma del pico; Muestra MW ≤ 4.000, se selecciona el tamaño del agujero de 80 y la muestra MW > 4.000 se selecciona el tamaño del agujero de 300
Cobertura de carbono - el efecto sobre la separación cromatográfica, la cantidad de fases de unión vinculadas a la sustancia de la matriz.

Alta cobertura de carbono: mejorar la resolución y analizar durante mucho tiempo; Cobertura baja en carbono: acortar el tiempo de funcionamiento

Cierre final / cierre de cola - efectos sobre la separación cromatográfica, utilizando cadenas de alcanos más cortas para unir grupos hidroxi de silicio libre (enlace secundario)

Cierre del extremo: reducir el fenómeno de arrastre del pico cromatográfico causado por la reacción entre el componente a medir y el Grupo hidroxi de silicio ácido residual en la superficie del silicona

Para las muestras polares, hay diferencias obvias en la selectividad entre las columnas cromatográficas sin sellar y las que han sido selladas.

Tamaño de las partículas - 1,8 um 3,5 um → separación rápida

5um → estándar de la industria

7um → columna de preparación

¿15. ¿ cómo lavar la columna de cromatografía líquida?

Para el lavado de columnas de fase inversa:

Lavar la columna de cromatografía con al menos 25 ML cada una de las siguientes disolventes (columna de análisis)

Fase móvil sin sal tampón

100% metanol, 100% nitrilo, 75% nitrilo + 25% propanol, 100% propanol, 100% diclorometano, 100% butano

¡* Si la columna se enjuaga con hexano o diclorometano, ¡ la columna debe enjuagarse con propanol antes de reutilizar la fase móvil en fase inversa!!!

Para el lavado de columnas de fase positiva:

Lavar la columna de cromatografía con al menos 50 ml cada una de las siguientes disolventes (columna de análisis)

50% metanol + 50% Triclorometano

100% acetato de dietilo

¿16. ¿ cómo envejecer la columna de gas?

Después de instalar la columna, primero se sopla la columna con un gas portador de al menos tres veces el flujo de trabajo habitual, y luego se ajusta el flujo de gas portador al flujo normal, comenzando a calentarse rápidamente de 100 grados a la temperatura de envejecimiento, envejeciendo la columna.

Temperatura de envejecimiento - en un Estado superior a 20 grados de la temperatura final del análisis de la muestra pero no superior al límite superior de la temperatura constante de la columna cromatográfica, el método de temperatura constante de 2 horas envejece rápidamente una nueva columna cromatográfica capilar. la tasa de calentamiento de la columna cromatográfica durante el envejecimiento no está limitada, por lo que se puede utilizar una columna de color de envejecimiento de la tasa de calentamiento.

¿17. ¿ cuáles son los componentes importantes del cromatógrafo líquido? ¿¿ qué detectores tiene la fase líquida?

Desgasificador, bomba, caja de temperatura de columna, muestreador automático, detector. Los detectores son:

Detector ultravioleta de longitud de onda variable vwd, detector de matriz de diodos dad, detector de longitud de onda múltiple mwd, RID、 Detector de refracción diferencial, detector de fluorescencia fld.

¿18. ¿ cómo seleccionar el cabezal de filtro de entrada del disolvente?

Los cabezales de filtro de disolvente para fases líquidas convencionales y capilares son: cabezales de filtro de vidrio con un diámetro de 20 micras (5041 - 2168), cabezales de conexión de PTFE con un diámetro de 5 mm / 3,2 mm (5062 - 8517) y cabezales de filtro de acero inoxidable con un diámetro de 12 - 14 micras (01018 - 60025).

Los cabezales de filtro de disolvente para la preparación de la fase líquida son: cabezales de filtro de vidrio con un tamaño de Poro de 40 micras (3150 - 0944), cabezales de conexión de PTFE de 7 mm / 4 mm (g1361 - 23204)

Si la fase móvil involucra los siguientes disolventes, se debe evitar el uso de cabezales de filtro de acero inoxidable: yoduro de litio, altas concentraciones de ácido nítrico y ácido sulfúrico, soluciones de ácido orgánico en disolventes orgánicos, como el ácido acético al 1% en metanol que corroe el acero inoxidable, el cloruro de carbono y la mezcla de alcohol isopropílico o thf, etc.

La limpieza diaria del filtro de vidrio se puede remojar en ácido nítrico al 35% durante 1 hora (sin limpieza ultrasónica, puede causar ruptura)

19. guía para la selección del Pool de circulación

Columna de Cromatografía líquida capilar (diámetro interior 0,3 o 0,5 mm) piscina de circulación 500nl;

Tanque de semicirculación de columna de Cromatografía líquida de ahorro de diámetro o disolvente (diámetro interior 1,0 o 2,1 mm);

La presión inversa de la piscina de circulación estándar de la columna de Cromatografía líquida tradicional (diámetro interior 3,0 o 4,6 mm) es superior a 100 bar, y la forma de la piscina de circulación de alta presión; La muestra MW ≤ 4000, se selecciona el tamaño del agujero de 80 y la muestra MW > 4000 se selecciona el tamaño del agujero de 300;

Cobertura de carbono - el efecto sobre la separación cromatográfica, la cantidad de fases de unión vinculadas a la sustancia de la matriz.

Alta cobertura de carbono: mejorar la resolución y analizar durante mucho tiempo; Cobertura baja en carbono: acortar el tiempo de funcionamiento

Efectos sobre la separación cromatográfica, utilizando cadenas de alcanos más cortas para unir grupos hidroxi de silicio libre (enlace secundario)

Cierre del extremo: reducir el fenómeno de arrastre del pico cromatográfico causado por la reacción entre el componente a medir y el Grupo hidroxi de silicio ácido residual en la superficie del silicona

Para las muestras polares, hay diferencias obvias en la selectividad entre las columnas cromatográficas sin sellar y las que han sido selladas.

Tamaño de las partículas: 1,8 um 3,5 um → separación rápida

5um → estándar de la industria

7um → preparación