El sistema de imágenes del entorno celular puede monitorear el crecimiento celular, los cambios morfológicos y las actividades metabólicas en tiempo real, ayudando a los investigadores a comprender con mayor precisión el estado fisiológico y la respuesta de las células. Al registrar y analizar regularmente los datos de la imagen, se pueden detectar anomalías a tiempo, como citotoxicidad, desnutrición o infección por patógenos, y luego tomar las medidas correspondientes para optimizar las condiciones de cultivo celular o resolver problemas.
Principios básicos de funcionamiento del sistema de imágenes del entorno celular:
1. tecnología de imágenes ópticas: el sistema de imágenes del entorno celular adopta principalmente una estructura de microscopio invertido, que integra componentes ópticos como focos de contraste de fase y lentes objetivo. Estos componentes trabajan juntos para que la luz pueda irradiar con precisión la muestra de células observadas y recoger la luz reflejada o transmitida para formar una imagen clara. Al mismo tiempo, en combinación con cámaras de alta sensibilidad, las señales ópticas se pueden convertir en imágenes digitales, admitiendo una variedad de modos de imagen, como campos brillantes, fluorescencia y efectos de relieve, para satisfacer diferentes necesidades experimentales.
2. etiquetado fluorescente y observación dinámica: mediante el uso de tintes fluorescentes específicos, se pueden etiquetar proteínas o organelos específicos en las células. Con la microscopía de fluorescencia, se puede transformar la actividad celular de una "instantánea" estática a una "película" dinámica, mostrando la actividad dentro de la célula en tiempo real, como el transporte molecular, la interacción entre los eles orgánicos, etc.
3. control automatizado y mantenimiento ambiental: también está equipado con un sistema de control automatizado, que puede ajustar con precisión los parámetros ambientales como la temperatura, la humedad y la concentración de dióxido de carbono, proporcionando un entorno de crecimiento estable y adecuado para las células. Esto no solo garantiza la actividad celular durante el experimento, sino que también reduce la interferencia causada por los cambios en los factores ambientales y mejora la precisión y fiabilidad del experimento.
Precauciones para el uso del sistema de imágenes del entorno celular:
1. Código de uso de la lámpara de mercurio: el interruptor de la lámpara de mercurio no debe abrirse repetidamente con frecuencia, y el intervalo entre los dos interruptores debe alcanzar más de 30 minutos, de lo contrario puede afectar la vida útil y el rendimiento de la lámpara de mercurio.
2. control de la temperatura ambiente: la Cámara del microscopio debe mantener un ambiente de baja temperatura, y la temperatura estable ayuda a mantener la precisión del instrumento y el Estado celular, reduciendo los errores causados por las fluctuaciones de temperatura.
3. medidas para evitar la luz y los terremotos: se debe prestar atención a evitar la luz durante el experimento para evitar que la luz cause daños a las células o interfiera con los resultados del experimento; Al mismo tiempo, evite la vibración, porque la vibración puede causar problemas como el desenfoque de la imagen y el desplazamiento del foco, lo que afecta la calidad de la imagen.
4. puntos clave para la selección del medio: al preparar la muestra, la fórmula del medio utilizada no solo debe contener nutrientes adecuados para promover el crecimiento y desarrollo celular, sino que también debe considerar factores como el ph, la capacidad de amortiguación y la presión osmótica. Los medios inadecuados pueden afectar la expresión celular, el fenotipo y el comportamiento de la apariencia. Se recomienda utilizar un medio de cultivo sin rojo fenol y reducir la concentración sérica para reducir la señal de fondo.
5. requisitos de operación aséptica: durante las operaciones de recolección de células, etc., las operaciones asépticas deben llevarse a cabo estrictamente para evitar la contaminación. Partículas exóticas o fragmentos celulares pueden interferir con la calidad de la imagen y afectar la precisión del experimento.
6. necesidad de optimización de la sonda: antes de realizar experimentos formales, se debe optimizar la concentración de la sonda fluorescente y el tiempo de incubación. No sólo es necesario garantizar que la vitalidad celular no se vea afectada después de la incubación, sino también garantizar que se pueda detectar una intensidad adecuada de la señal fluorescente. Además, se puede reducir la posible fluorescencia de fondo incorporando pasos de lavado.
7. condiciones ambientales estables: durante todo el experimento de imagen, las condiciones ambientales estables se controlan y mantienen estrictamente, incluyendo temperatura, humedad y gas (oxígeno y dióxido de carbono). Un entorno estable no solo mantiene la salud celular, sino que también reduce el riesgo de deriva del foco. Por ejemplo, antes de configurar la configuración de recolección, se debe garantizar que los microporos se encuentren en la Mesa de instrumentos o en la Sala de control ambiental para el equilibrio térmico; Si se añade un medio al agujero durante el experimento de retraso, se debe garantizar que tenga la misma temperatura media que en el recipiente de imagen.
8. aplicación del módulo de calentamiento de la lente: para experimentos con imágenes de lentes de agua o aceite, la temperatura de la lente puede tener un mayor impacto en la muestra debido al contacto de la lente con la muestra a través del medio, en este momento es necesario equipar el módulo de calentamiento de la lente para garantizar que la muestra esté En un ambiente de temperatura adecuado.
9. utilización del sistema de control de plano focal: aprovechar al máximo las funciones de enfoque automático del software (como Best focus), el sistema de Estabilización de plano focal (afc) y el enfoque preciso (closelop) para garantizar que se puedan obtener imágenes claras en diferentes momentos y mejorar la calidad de la imagen y la precisión de los datos.
10. aprovechar las ventajas del monitoreo remoto: si el equipo tiene una función de monitoreo remoto, puede utilizar razonablemente esta función para monitorear el progreso del experimento en tiempo real, detectar y resolver problemas a tiempo y mejorar la eficiencia y la tasa de éxito del experimento.