El sistema de imágenes del entorno celular es capaz de capturar imágenes de alta resolución que muestran claramente la estructura fina y los procesos dinámicos de las células. Esto es de gran importancia para el estudio de los mecanismos internos de las células, las leyes de aparición y desarrollo de enfermedades y los efectos de los medicamentos. Los datos de imagen detallados y precisos proporcionados por el sistema permiten a los investigadores observar y comparar en diferentes momentos y condiciones de tiempo, asegurando la consistencia y fiabilidad de los experimentos. Además, estos datos también se pueden utilizar para el análisis estadístico, revelando posibles leyes y mecanismos biológicos y proporcionando un fuerte apoyo para la investigación científica.
Tiene un amplio valor de aplicación en muchos campos, como el desarrollo de medicamentos, la investigación del cáncer y la biología del desarrollo. Puede ayudar a los investigadores científicos a comprender en profundidad la interacción entre las células y el microambiente, explorar el mecanismo de aparición de enfermedades y evaluar la eficacia de los medicamentos, acelerando así el proceso de investigación y desarrollo de nuevos medicamentos y promoviendo el progreso en el campo de las ciencias de la vida. La función de control automatizado del sistema reduce la demanda de intervención manual y reduce la dificultad de operación y la tasa de error. Al mismo tiempo, la capacidad eficiente de procesamiento y análisis de datos también mejora en gran medida la eficiencia de la investigación, permitiendo a los investigadores científicos obtener resultados de investigación valiosos más rápidamente.
Pasos de determinación del sistema de imágenes del entorno celular:
1. diseño experimental: al diseñar el programa experimental de imágenes de células vivas, es necesario considerar varios factores de manera integral, como el proceso celular a observar, el método de marcado utilizado, etc. Porque la imagen de células vivas tiene muchas ventajas, incluyendo la capacidad de observar la aparición de procesos celulares dinámicos, el uso de pruebas multicolor para estudiar múltiples aspectos al mismo tiempo, el estudio de estructuras en entornos citogénicos para obtener resultados más reales, la realización de seguimiento biomolecular y estructural con el tiempo y la observación de interacciones celulares. Pero también hay que prestar atención a algunos problemas, como la necesidad de tener métodos específicos de baja toxicidad para marcar objetivos de investigación, debido a que las células vivas no son transmisibles a ciertas moléculas de detección grandes, es difícil mantener el foco en los objetivos móviles, pero también considerar si la tecnología utilizada es perjudicial para las células y garantizar que las células estén en un estado fisiológico natural.
2. cultivo celular: es esencial mantener o cultivar células en las mejores condiciones. La selección de medios de cultivo es particularmente crítica para experimentos con imágenes de retraso y exposición prolongada al entorno circundante. Es necesario garantizar la salud de la célula y mantenerla lo más cerca posible de la temperatura fisiológica, el ph, los niveles de oxígeno y otras condiciones en un ambiente adecuado para obtener resultados experimentales confiables.
3. etiquetado celular: etiquetado dirigido de estructuras celulares, funciones y proteínas objetivo con tintes específicos y reactivos de etiquetado fluorescente. Se deben seleccionar tintes fluorescentes adecuados, como proteínas fluorescentes dirigidas específicamente o pequeños reactivos de permeabilidad a la membrana. Si es necesario detectar múltiples estructuras y procesos al mismo tiempo, se pueden combinar con otros tintes fluorescentes, pero el espectro de excitación y el espectro de emisión deben examinarse con la ayuda de Florence spectraviewer para garantizar que la superposición espectral entre los diferentes tintes se minimice. Al mismo tiempo, es necesario evitar el uso excesivo de Marcadores fluorescentes para evitar problemas como manchas no específicas, mejora de la señal de fondo, artefactos fisiológicos, perturbaciones estructurales, Citotoxicidad y superposición espectral grave.
4. optimización de la señal: haga todo lo posible para reducir la interferencia de fondo y mantener la estabilidad óptica de la señal fluorescente. Se pueden utilizar reactivos que reduzcan la fluorescencia extracelular y aumenten la estabilidad luminosa de los tintes fluorescentes para mejorar la relación señal - ruido. La selección de inhibidores de fondo adecuados para células vivas ayuda a reducir la fluorescencia de fondo extracelular sin pasos de limpieza adicionales; También se pueden utilizar reactivos anti - endurecimiento de células vivas para procesar las muestras para evitar la pérdida de señal causada por exposiciones múltiples o prolongadas.
5. observación de imágenes: para la imagen de células vivas de procesos dinámicos, se necesita observación a largo plazo. En este proceso, es necesario controlar razonablemente las condiciones de iluminación y detección para garantizar la adquisición de datos de imagen de alta calidad.
6. operación de arranque: primero abra el interruptor del controlador del sistema de cultivo celular, el interruptor de campo abierto, el interruptor de la lámpara de mercurio y el interruptor del microscopio; Luego abra el interruptor de dióxido de carbono para que la presión de dióxido de carbono se mantenga estable por debajo de 0,1 mpa; Luego agregue una cantidad adecuada de agua a alta presión al sistema de cultivo celular y coloque la célula; Después de eso, abra el software de control del sistema de imágenes para que el CLD se enfríe por adelantado; Encontrar el campo de visión adecuado bajo el espejo y establecer los parámetros relevantes para la imagen de células vivas.
7. operación de apagado: primero apague el software de control del sistema de imágenes; Luego apague el dióxido de carbono, el campo abierto, la lámpara de mercurio y el interruptor del controlador del sistema de cultivo a su vez; Posteriormente, se cierra el microscopio; Luego apague toda la energía; Extraer las células y limpiar el sistema de cultivo.