La limpieza de la columna de extracción en fase sólida es un eslabón clave para garantizar la precisión experimental y prolongar la vida útil de los consumibles. El siguiente proceso de limpieza profesional se expone sistemáticamente desde cuatro aspectos: pretratamiento, limpieza profunda, tratamiento de materiales especiales y mantenimiento de almacenamiento:

I. proceso básico de limpieza

1. método de lavado positivo

- lógica de selección de disolventes: siguiendo el principio de gradiente polar "alto → medio → bajo". El eluyente fuerte (metanol / nitrilo) elimina los residuos obstinados, luego cambia a un disolvente polar medio (diclorometano / acetato de dietilo) para eliminar los productos intermedios y finalmente expulsa las impurezas solubles en agua en agua pura. Se recomienda que la cantidad de cada disolvente alcance entre 5 y 10 veces el volumen de la columna para garantizar una infiltración completa.

- puntos de control del caudal: adoptar un modo lento de baja presión (≤ 2 ml / min) para evitar cambios en la densidad del relleno causados por un lavado severo. Se puede lograr un control preciso de la velocidad con la ayuda de una bomba de flujo constante, y observar que el líquido de salida cambia de turbidez a aclaración es una señal de cumplimiento.

2. estrategia de impacto inverso: para las columnas cromatográficas que han experimentado un bloqueo significativo, se conectan boca abajo al dispositivo de extracción en fase sólida y se utilizan cilindros de nitrógeno de alta presión para proporcionar un flujo de aire pulsado (0,4 mpa). Esta acción mecánica permite descascarar eficazmente los sedimentos coloidales adheridos a la superficie de la placa de tamiz, y luego realizar inmediatamente un lavado positivo para evitar el asentamiento secundario.

II. plan de eliminación de contaminantes dirigidos

1. residuos de muestras biológicas: la precipitación por desnaturalización de proteínas se puede hacer con un puñetazo combinado de tampón fosfórico con pH = 7,4 + 0,1% tween - 20, el primero mantiene un Punto isoeléctrico para evitar cambios drásticos en la conformación de la proteína y el segundo desintegra la capa de adhesión reduciendo la tensión superficial. Si es necesario, se introduce la proteasa K para la digestión durante la noche.

2. invasión de la mezcla lipídica: activar el sistema sinérgico de cetona - N - hexano (1: 1), el primero disuelve la capa bimolecular de Fosfolípidos y el segundo destruye el dominio cristalino del colesterol. El efecto de lavado circular es mejor en condiciones de baño de agua de 60 ℃.

3. tecnología de regeneración de rellenos especiales

1. resurrección de la columna de intercambio de iones: cuando la resina catiónica está contaminada por un complejo metálico, se inyecta una solución de HCl de 3 MOL / L (liberando cam2 / MG m2 unido), agua desionizada hasta la neutralidad, y finalmente se resucita el grupo funcional con un tampón tris (ph = 8,0) que contiene 0,1 MOL / ledta. Las columnas aniónicas deben cambiarse a NaOH en lugar de HCl para operaciones similares.

¡2. mantenimiento de medios compuestos de grafeno: ¡ este nuevo tipo de adsorbente está estrictamente prohibido para los choques ultrasónicos! Se recomienda enjuagar continuamente de baja potencia con etanol - agua (7: 3), complementado con una agitación magnética de baja velocidad ( < 200rpm). Después de secarse al aire natural, se sella al vacío para evitar la oxidación y la degradación.

IV. verificación de la eficacia y control de la calidad

1. verificación de la curva estándar: preparar una solución estándar de concentración de la serie (que cubre el límite inferior del rango lineal al límite superior), y determinar la tasa de recuperación después del tratamiento de la columna limpia. Si la tasa de recuperación del objeto objetivo cae en el rango del 85% al 115% y el RSD es inferior al 5%, indica que el procedimiento de limpieza es confiable.

2. experimento controlado en blanco: se seleccionan aleatoriamente columnas vacías lavadas para realizar operaciones de simulación de todo el proceso, y la detección por GC - MS / clar no debe detectar compuestos emblemáticos utilizados anteriormente. Se presta especial atención a los rastros residuales de sustancias volátiles difíciles.