-
Correo electrónico
gptchina@gyrosproteintech.com
-
Teléfono
13764581292
-
Dirección
Habitación 1609 - 1613, bloque a, 380 fenglin road, Distrito de xuhui, Shanghai
Acerca de nosotros
Mesa Labs
Solución eficiente de detección de anticuerpos antimicrobianos gyolab, simplifica la operación y mejora la precisión
Fecha:2024-12-10Leer:2
La Plataforma gyrolab utiliza el método de muestreo automatizado para realizar pruebas inmunológicas miniaturizadas en CD microfluídico. Las microesferas de afinidad rellenas con el paquete de estreptomicina en la microestructura de CD se combinan con la especificidad del analito a través de reactivos de captura biotinizados y luego con reactivos de detección marcados con fluorescencia para estimular la señal de fluorescencia en la columna de afinidad por láser y leer la señal de fluorescencia con un detector. El método de inmunoensayo gyrolab tieneAutomatización, alto rendimiento, ahorro de tiempo, baja cantidad de reactivos y muestras, amplio rango dinámico y bajo efecto de matrizY otras ventajas se han utilizado ampliamente en el campo de la investigación y el desarrollo y producción de medicamentos biológicos.
Gyrolab detecta ada en un formato de puente homogéneo (homogenous bridgingformat), y las moléculas farmacéuticas se utilizan simultáneamente como reactivos de captura (biotinización) y como reactivos de detección (alexa fluor). ® 647 etiquetado fluorescente), después de mezclar la muestra y el reactivo, se añade a la columna de estreptomicina de la microestructura de cd, y luego se detecta ADA o control positivo para formar un complejo de puente entre la molécula farmacéutica biotinizada y la molécula farmacéutica marcada por el Grupo fluorescente. Esta forma de detección puede detectar todos los tipos idénticos de Ada (igg, igm, iga, etc.) y no depende de las especies, y se puede utilizar tanto en estudios preclínicos como clínicos.
Plataforma gyrolabProporciona una solución completa para la detección de AdaSimplificar el flujo de trabajo desde la prueba de selección hasta el desarrollo de la prueba de confirmación, incluyendo el módulo de software de análisis ada, El amortiguador de dilución de muestras rexxip ada y dos formatos diferentes de cd.
CD de mezcla de girolabo 96 是CD microfluídico dedicado a la detección de ada por ácido, que integra los pasos de pretratamiento de la disociación ácida de la muestra en el proceso de detección automatizado. Hay 96 microestructuras en cada CD de mezcla, y una cámara de mezcla de muestras en cada microestructura se puede utilizar para la incubación de muestras y la disociación ácida. Al realizar la prueba ada, primero se agrega la muestra al Canal de definición de volumen en la microestructura, la muestra de 200 NL entra en la Cámara de mezcla bajo la fuerza centrífuga de cd, y luego se agrega un amortiguador ácido a la Cámara de mezcla, donde el complejo ADA - fármaco se puede disolver en un ambiente de bajo Ph. A continuación, se añade a la Cámara de mezcla el tampón neutralizante Master mix, que contiene el reactivo de captura y el reactivo de detección, y la molécula ada entra en contacto con el reactivo marcado y forma un nuevo complejo ada. De esta manera, la proporción del reactivo marcado con el fármaco libre no marcado favorece la formación de un complejo de puente de reactivo marcado detectable - ada, que finalmente se captura en las microesferas cubiertas por el paquete de estreptomicina y se detecta mediante un detector de fluorescencia inducido por láser. Este proceso de detección realiza una automatización completa, desde la adición de reactivos de muestra, la disociación ácida en línea hasta la detección de señales, y el programa automatizado controla con precisión el tiempo y el volumen de reacción de cada paso.Minimiza la operación manual, lo que no solo mejora significativamente la precisión de la detección, sino que también reduce considerablemente el tiempo de análisis.
GirolabSoporte para dos métodos diferentes de pretratamiento de muestras para superar la interferencia de medicamentos libres en la detección de AdaLos métodos aplicables se pueden seleccionar con flexibilidad de acuerdo con las características y aplicaciones del medicamento. Detección ada con tecnología gyrolabPrincipales ventajasIncluye:
El sistema de reacción nanoactualizado, con una pequeña cantidad de reactivos y muestras
Resolución automática de ácidos en línea para mejorar la precisión de la detección
La tecnología de punción de columna de afinidad minimiza el efecto de matriz y mejora la sensibilidad de detección y la tolerancia a los medicamentos.
La alta carga de la columna de afinidad es más propicia para que los reactivos marcados de alta concentración compitan con los medicamentos libres, mejorando aún más la tolerancia a los medicamentos a través de la ventaja metrológica.
El análisis es rápido, el tiempo de funcionamiento de cada CD es de aproximadamente 1 hora, y el tiempo de funcionamiento de la prueba de disociación ácida en línea con Mixing CD 96 es de aproximadamente 2 horas.
Menos operaciones manuales y menos errores humanos
El módulo de software ada especial guía el proceso de desarrollo de pruebas de selección y pruebas de confirmación de acuerdo con las normas regulatorias.
Los parámetros clave de los métodos de detección de inmunogenicidad incluyenSensibilidad de detección, tolerancia y selectividad de medicamentos. tolerancia farmacológica se refiere a la capacidad de detectar anticuerpos antimicrobianos (ada) en el caso de medicamentos terapéuticos residuales, y la evaluación de la Unión de medicamentos libres a Ada es para evitar el riesgo de falsos negativos. La selectividad se refiere a la evaluación de la solidez de las pruebas en una matriz normal o una matriz de enfermedad, que es esencial para garantizar la consistencia en la evaluación de diferentes muestras en estudios clínicos. Además, uno de los grandes desafíos en el uso del método de puente para la detección de Ada es la interferencia del objetivo, que puede causarResultados falsos positivos.
Investigadores de novimmune sa han probado muestras procesadas de diferentes maneras con técnicas gyrolab y ecl en el desarrollo de un método de detección ada para un fármaco de anticuerpos terapéuticos (novimab) (...).Muestras agotadas de dianas, muestras agotadas de no dianas, muestras acidificadas y muestras no acidificadas) y ejemplos de parámetros clave para dos métodos de detecciónComo la sensibilidad, la tolerancia al fármaco y la tolerancia al objetivo se evaluaron y compararonPara obtener un método de detección de inmunogenicidad clínica que cumpla con el propósito (fit - for - purpose) (1).
Uso por investigadoresFármacos biotinizados como reactivos de captura， Alexa Fluor ® Los fármacos marcados con 647 (gyrolab) o con la etiqueta sulfo - TAG (ecl) se utilizaron como reactivos de captura, y los anticuerpos anticoronarios de conejo policlonales purificados se utilizaron como referentes positivos de ada, y las pruebas de Ada se realizaron en formato puente homogéneo en ambas plataformas. La Plataforma gyrolab utiliza bioaffy 200 CD para la detección de muestras no acidificadas, Mixing CD 96 para la detección de muestras acidificadas, y la disociación y neutralización de ácidos de muestras se completan automáticamente en Mixing cd.
Una muestra de control negativo (nc) y nueve muestras de control positivo (pc, 2, 5, 20, 50, 100, 250, 500, 1000 y 10000 ng / ML ada) se sometieron a pruebas en tres días, determinando la sensibilidad en función de los resultados de las tres operaciones entre pruebas, es decir, devolviendo continuamente concentraciones de PC Z bajas por encima de la señal umbral.
Ambos métodos tienen una alta sensibilidad, por debajo de 100 ng / ML. Para la detección de muestras no acidificadas, la sensibilidad de las plataformas gyrolab y ecl es de 2 ng / ml; Para las muestras que utilizan el paso de disociación ácida,La sensibilidad de la detección de gyrolab es de 5 ng / ml, que es superior a la sensibilidad de 20 ng / ml de ecl.
Los valores de señal detectados por las plataformas gyrolab y ecl en muestras de pc en condiciones no ácidas y descongeladas. El eje X es la concentración de referencia ada y el eje y es la relación señal - ruido (la media de la señal PC se divide por la media de la señal nc)
La detección de muestras acidificadas y no acidificadas se ha estudiado de manera comparativa en dos plataformas utilizando las mejores condiciones optimizadas: se han detectado nueve muestras de PC (5, 20, 50, 100, 250, 500, 1000, 2500 y 10000 ng / ML ada) con anticuerpos monoclonales de 0, 20 y 100 microgramos / ML.Los datos muestran que la Plataforma gyrolab muestra una mayor tolerancia al medicamento. para las pruebas de muestras no acidificadas, gyrolab puede detectar Ada de 100 ng / ML y 500 ng / ml, respectivamente, a concentraciones de medicamentos de 20 microgramos / ML y 100 microgramos / ml, y la Plataforma ecl puede detectar 250 ng / ML y 1000 ng / ml, respectivamente. Para la detección de muestras de disociación ácida, cuando la concentración del medicamento es de 20 microgramos por ml,Gyrolab puede detectar 5 ng / ML Ada, La Plataforma ecl es de 50 ng / ml; Cuando el nivel de concentración del medicamento aumentó a 100 microgramos / ml, la sensibilidad de detección de ambas plataformas fue de 50 ng / ML ada.
Sensibilidad de detección de ambas plataformas con niveles de fármacos de 0, 20 y 100 microgramos / ML. La sensibilidad se define como la concentración de PC Z baja que supera la señal umbral.
En este estudio, las dianas solubles pueden formar una prueba de interferencia dimer que causa resultados falsos positivos, y en la población enferma, los niveles básicos de dianas solubles pueden ser mucho más altos que los medidos en suero de personas sanas, por lo queMejorar la tolerancia al objetivo de los métodos de detecciónEs muy importante para el análisis clínico.
Para evaluar la eficiencia de los pasos de agotamiento del objetivo, se contendrán cuatro dianas solubles de diferentes concentraciones.(5、20、50 和 200 ng/mL (por ejemplo)Las muestras se dividen en dos grupos y se realizan en un grupo.Tratamiento previo al agotamiento del objetivo, otro grupoEntonces no se agota el objetivoA continuación, se realizan pruebas con / sin pasos de descongelación ácida en dos plataformas. Los datos muestran que tanto gyrolab como la detección de ecl solo pueden tolerar dianas solubles de 5 ng / ML sin disociación ácida; Al combinar el agotamiento del objetivo con los pasos de disociación ácida, el nivel de tolerancia del objetivo de ambas plataformas aumentó a 200 ng / ML.
Evaluar la tolerancia de las dos plataformas a diferentes concentraciones de dianas solubles en condiciones de paso de descongelación sin ácido o agotamiento sin dianas. El umbral representado por las líneas punteadas se fija en una relación señal - ruido de 1,25.
Los resultados de las pruebas de ambas plataformas a diferentes concentraciones de dianas solubles, los símbolos' + 'y' - 'indican que la señal de la muestra está por encima o por debajo del umbral, respectivamente.
Se realizó con una muestra que solo contenía ada libreEvaluación de la precisión de la Sala de pruebas, incluida la detección de muestras disueltas de ácido y muestras no disueltas de ácido. tres pruebas independientes en nueve PC de diferentes concentraciones (2, 5, 20, 50, 100, 250, 500, 1000 y 10000 ng / ml) en diferentes fechas utilizando la Plataforma ecl y cinco pruebas independientes en cinco PC de diferentes concentraciones (5, 20, 100, 500 y 10000 ng / ml) utilizando la Plataforma gyrolab, calculando la precisión de la Sala de operaciones (cvs) en función de los valores de señal obtenidos en cada nivel de PC. Los datos muestran que la precisión de las pruebas gyrolab y ecl es alta sin pasos de descongelación ácida, y el CVS de todas las muestras de PC es inferior al 10%; Sin embargo, en las pruebas de disociación ácida se observó claramente un aumento del CVS detectado por ecl del 10% al 26%, mientras que las pruebas de gyrolab mantuvieron una buena precisión, con menos del 10% de los CVS detectados en otras muestras, excepto en muestras de PC de 5 ng / ML. Esto se debe aLa tecnología gyrolab utiliza un tratamiento de disociación ácida totalmente automatizado, lo que reduce las operaciones manuales y los errores, reduciendo así la variabilidad de los resultados.
Precisión de la Sala de pruebas, "nt" significa que no se ha realizado la prueba, “
Los datos de este estudio muestran que las tecnologías gyrolab y ecl se detectan en ada.Sensibilidad, tolerancia al fármaco, tolerancia al objetivo y precisiónesperarAmbos métodos de detección son adecuados para la verificación del método y el análisis de muestras clínicas.
Detección de muestras con pasos de disociación ácida,Gyrolab tiene una mayor sensibilidad a la detección y tolerancia a los medicamentos
La Plataforma gyrolab integra la resolución de ácido de muestra totalmente automática,Se reducen las operaciones manuales y los errores, y se mejora la repetibilidad de los resultados entre las pruebas.
La prueba gyrolab requiere menos reactivos y la prueba funcionaMenos tiempo y mayor flujo
Referencias:
[1] Collet-Brose J, Couble PJ, Deehan MR, Nelson RJ, Ferlin WG, Lory S. Evaluación de múltiples plataformas tecnológicas de inmunoensayo para seleccionar el ensayo de anticuerpos antifármacos que exhiben la tolerancia más adecuada al fármaco y a la diana. J Immunol Res. 2016; 2016:5069678. doi: 10.1155/2016/5069678. Epub 3 de mayo de 2016. PMID: 27243038; PMCID: PMC4868908.