I. especificaciones de funcionamiento diario
Preparación e inspección de reactivos
Asegúrese de que las botellas de reactivos (como nitrilo, activación, oxidante) estén bien selladas, mantenga la presión de argón estable y evite que la entrada de aire externo afecte el efecto sintético.
Antes de la síntesis, verifique el excedente de reactivos y reemplace las botellas vacías a tiempo para evitar interrupciones en la síntesis debido a la falta de reactivos.
Entrada de secuencia y configuración de parámetros
La secuencia de ADN objetivo se introduce a través de un software de diseño asistido por computadora, teniendo en cuenta la preferencia del codón, la estructura secundaria y los sitios enzimáticos de restricción.
Confirme si los pasos sintéticos (como la desprotección, el acoplamiento, el cierre, la oxidación) son correctos y elija el método final (por ejemplo, tritylonauto conserva el Grupo 5 '- DMT para su posterior purificación).
Monitoreo del proceso sintético
Ejecute el paso startcolumn antes de iniciar para comprobar si la posición de la columna sintética es correcta.
En la síntesis, la liberación de iones positivos DMT se monitorea a través de una piscina de flujo de conducción para juzgar el progreso de la reacción.
Verifique regularmente si la temperatura, la presión y otros parámetros están dentro del rango normal.
Tratamiento de productos
Después de la síntesis, los productos se cortan del portador sólido y se purifican con opc, page o clar para eliminar fragmentos cortos e iones de sal.
Después de la purificación, el producto se conserva en paquetes para evitar la congelación y descongelación repetidas.
2. puntos clave del mantenimiento diario
Anillo en forma de "o" del tapón
Se inspecciona una vez al mes y se cambia al menos una vez al año. En caso de precipitación blanca, limpie con un hisopo de algodón de nitrilo.
Al reemplazar, retire el anillo antiguo con una pinza hemostática, asegúrese de que el enchufe no tenga partículas, instale el nuevo anillo y realice una prueba de presión.
Botellas y tuberías de almacenamiento de líquidos
Mantenga el cilindro de almacenamiento limpio e inspeccione regularmente la presión de argón y la estanqueidad de la tubería.
Antes de la síntesis, limpie la tubería con nuevos reactivos para evitar que los reactivos antiguos interfieran con la reacción.
Acelerador de flujo
Limpie una vez al mes, primero cocine en agua durante 15 minutos y luego limpie con ultrasonido de metanol para evitar bloqueos.
Limpieza y antipolvo de instrumentos
Limpiar la carcasa con un paño húmedo cada semana para evitar la apertura de la salida de aire; Después del experimento de alta sensibilidad, el almacén de reacción fue esterilizado con una lámpara ultravioleta durante 15 minutos.
Cuando no se usa durante mucho tiempo, se enciende 1 - 2 veces a la semana, aproximadamente media hora cada vez, para evitar que las piezas se mojen.
3. investigación de fallas comunes
Bajo rendimiento sintético
Causas: falla del reactivo, fuga de la tubería, desviación de la posición de la columna sintética.
Solución: reemplazar el reactivo, comprobar la estanqueidad de la línea y recalibrar la posición de la columna sintética.
La pureza del producto es insuficiente
Causa: método de purificación inadecuado, paso de síntesis incorrecto.
Solución: optimizar las condiciones de purificación (como aumentar los pasos de purificación de clar) y comprobar si los parámetros sintéticos son correctos.
Alarma o interrupción del instrumento
Causas: botellas de residuos líquidos llenas, fluctuaciones de energía, temperatura Anormal.
Solución: vaciar la botella de residuos líquidos, usar una fuente de alimentación estabilizada y comprobar si el sensor de temperatura está defectuoso.
Anomalías de datos (como fluctuaciones en la conductividad)
Causa: contaminación de la piscina de conducción, mezcla de reactivos con impurezas.
Solución: limpiar la piscina de conducción, reemplazar el nuevo reactivo y recalibrar.
IV. precauciones operativas
Ambiente estéril: la síntesis de Primers es sensible a la contaminación y se deben usar guantes durante la Operación para evitar la contaminación del ADN exógeno o las enzimas.
Conservación de reactivos: los disolventes como el nitrilo deben conservarse protegidos de la luz, y los activar y oxidar deben sellarse para evitar la humedad.
Registro de datos: registre en detalle la secuencia sintetizada de cada lote, el número de lote del reactivo y el mapa de inspección de calidad para facilitar la trazabilidad de los problemas.