I,Extractor de fase sólidaPrincipios básicos y composición del dispositivo
El extractor de fase sólida (spe) adsorbe selectivamente compuestos objetivo en muestras líquidas a través de adsorbentes sólidos para lograr la separación de la matriz y los perturbadores, y luego eluye o desorbe los objetivos ricos. Sus dispositivos centrales incluyen:
Columna de extracción en fase sólida: compuesta por una columna de polipropileno médico, una placa de tamiz de polipropileno poroso (20 micras) y un relleno (40 - 60 micras o 80 - 100 micras), especificaciones comunes como 100 mg / 1 ml, 500 mg / 3 ml, etc.
Sistema de vacío: incluye bomba de vacío, manómetro, botella de amortiguación para proporcionar presión negativa para promover la muestra a través de la columna de extracción.
Dispositivo de recolección: soporte de tubo de ensayo (12 / 24 posición ajustable), botella de recolección, para recoger líquido de elución.
Componentes auxiliares: muestreador de gran volumen, válvula stopcock (control preciso de la velocidad de flujo), dispositivo anticorrupción.
II. preparación previa a la operación: los detalles determinan el éxito o el fracaso
Medio Ambiente y Seguridad
Asegúrese de que la Mesa de operaciones sea estable, sin agua estancada, sin corrosión ácido - base y lejos de la soplada directa del aire acondicionado (para evitar el envejecimiento del instrumento).
Use guantes protectores y gafas protectoras, verifique la fuente de alimentación estabilizada del laboratorio e inspeccione la capacidad de la botella de recogida de residuos líquidos.
Preparación de muestras y reactivos
Tratamiento de muestras:
Muestra líquida: inyección directa.
Muestra sólida: filtración después de la disolución (película filtrante de 0,45 micras), centrifugación o dilución a la concentración adecuada.
Selección de reactivos:
Columna de extracción: selección de rellenos según las propiedades del objeto objetivo (por ejemplo, la columna C18 es adecuada para sustancias no polares y la columna nh2 es adecuada para compuestos ácidos).
Disolvente activado: metanol para columna de fase inversa (6 veces el volumen de la columna) → agua (4 veces el volumen de la columna); El disolvente orgánico donde se encuentra la muestra para la columna de fase positiva; La columna de intercambio de iones utiliza 3 - 5 ml de agua desionizada.
Inspección del equipo
Compruebe la presión de salida de la bomba de vacío (> 0,1 mpa, presión negativa > - 0,09 mpa) y confirme que la Junta de cada canal no tiene cuerpos extraños.
El canal de control independiente debe confirmar el Estado de apertura con antelación para evitar anomalías de presión.
3. pasos operativos: procesos estandarizados y parámetros clave
Columna de extracción activada
Objetivo: eliminar las impurezas y crear un ambiente de disolvente adecuado.
Método: pasar por la columna de extracción con metanol (6 veces el volumen de la columna) y agua (4 veces el volumen de la columna) a una velocidad de flujo de 0,5 - 1 ml / MIN a su vez, y observar que la superficie de la placa de tamiz muestra una superficie de infiltración horizontal y lisa.
Muestra superior
Método: añadir lentamente la solución de la muestra a la columna de extracción y controlar el volumen total de la muestra ≤ 2000 veces el volumen de la columna (por ejemplo, la columna de 1 ML procesa hasta 2L muestras).
Caudal: material biológico ≤ 5 ml / min, aguas residuales industriales ≤ 15 ml / min, suspender cada 300ml para comprobar si el puntero del medidor hidráulico está estable en la zona Verde.
Recogida: el compuesto objetivo comienza a recogerse cuando sale con el líquido a base de muestra, y las impurezas se mantienen en la columna.
Lavado (eliminación de impurezas)
Objetivo: eliminar los perturbadores y conservar el objetivo.
Método: se utilizó 5 ml de solución de agua que contiene ácido acético al 0,1% para pasar por la columna tres veces, y la velocidad de flujo fue la misma que en la etapa de muestra anterior.
Elución
Objetivo: eluir el objetivo con un pequeño volumen de disolvente.
Método:
Elución de un solo sistema: 75% 0,35 MOL / L de metanol + 25% de solución mixta de cetona, el caudal se redujo al 65% de la etapa inicial.
Elución de doble sistema: uso alternativo de dos disolventes para registrar el número de recogida de cada grupo.
Volumen de elución: evite el exceso (se puede controlar reduciendo la cantidad de disolvente o acortando el tiempo).
Reprocesamiento
Tratamiento del eluyente: secado (secado por soplado de nitrógeno), solubilización pesada (metanol / agua) o concentración (evaporación giratoria).
Regeneración de la columna: enjuagar con agua destilada durante 30 minutos → 60% de metanol durante 45 minutos, retirarlo y colocarlo en un secador de vacío para su conservación.
IV. mantenimiento posterior a la operación: prolongar la vida útil del equipo
Limpieza y almacenamiento
Limpieza: lavar la línea con agua desionizada o detergente hasta que no haya residuos.
Almacenamiento: humedad, polvo y luz, no utilizado durante mucho tiempo, es necesario activar el modo de descarga automática para eliminar la memoria de la bomba, iniciar el procedimiento de autoinspección mensual para evitar la adherencia de los sellos.
Registro y apagado de datos
Al registrar la máquina, el Código del modelo y los parámetros de pH de la muestra en el "libro de registro de uso".
Apague el disyuntor de control general de la fuente de alimentación principal y verifique el Estado del indicador de apagado.
V. problemas y soluciones comunes
Bloqueo de la columna de extracción
Causa: la muestra contiene partículas o el relleno está suelto.
Solución: enjuagar en sentido inverso con metanol (bajo caudal) y reemplazar la columna de extracción si no es válida.
Mal efecto de elución
Causa: elección inadecuada del disolvente de elución o flujo excesivo.
Solución: optimizar las condiciones de elución (como aumentar la proporción de metanol) y reducir el caudal hasta el 65% de la fase inicial.
Presión anormal
Causa: fuga de aire de la Junta o canal no cerrado.
Solución: compruebe la planitud de la almohadilla de sellado y cierre los canales que no sean necesarios.